1. 1° CONGRESO ARGENTINO Y LATINOAMERICANO DE
CIRUGÍA HEPATO-PANCREATO-BILIAR
“PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO HEPATICO
PARA LA PREVENCION DEL DAÑO POR LESION
ISQUEMIA REPERFUSION Y COMPARACION DE
MODELOS DE CLAMPLEO EN RATAS.”
Estudio prospectivo, aleatorizado y pareado.
Dr. Juan Manuel Sanguinetti, Dr. Diego Muguruza,
Br. Ma.Eugenia Rodriguez, Br. Diego Maianti,
Dr.Juan D. Fernandez.
Departamento Básico de Cirugía
Prof. Dr. Gonzalo Fernández Naone.
Facultad de Medicina
Universidad de la República
Montevideo - Uruguay

2. INTRODUCCION
LESION POR ISQUEMIA REPERFUSION (LIR)
Se produce cuando existe cese del flujo sanguíneo a un tejido
u órgano y luego la reperfusión del mismo.
En la isquemia se produce un estado proinflamatorio y
sustancias potencialmente citotóxicas.
Durante la reperfusión se liberan sustancias y citotóxicas y
citolíticas a nivel local y sistémico.
En diversos procedimientos el hígado es expuesto a la LIR.

3. INTRODUCCION
Estrategias para disminuir la LIR:
• Quirúrgicas.
• Inmunomoduladores.
• Fármacos.
• Terapias génicas.
• Terapias basadas en el “Shock térmico”.

4. INTRODUCCION
• PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO (PI).
• Proceso en el cual se realiza la aplicación de episodios de
isquemia reperfusión breves y repetitivos antes de una
isquemia prolongada.
• Diferentes órganos :
• Corazón , Músculo estriado, Cerebro, Intestino, Pulmones,
Riñones, Hígado.

5. INTRODUCCION
Son escasos trabajos que analicen las primeras alteraciones en la
LIR y no encontramos trabajos que tomen en cuenta la arteria
hepática accesoria en el PIH
• Beneficio PIH.
• Comparamos dos modelos diferentes de PIH.
• Proponemos un modelo de clampeo hepático tomando en
cuenta la arteria hepática accesoria.

6. OBJETIVO
Valorar la eficacia del preacondicionamiento isquémico en la
disminución de la lesión hepatocítica luego de una LIR,
provocada en ratas al clampear el pedículo hepático y
reperfundirlo por veinticuatro horas .
Comparar dos modelos de clampleo hepático diferentes.

7. MATERIAL Y MÉTODO
• Estudio experimental prospectivo, aleatorizado y pareado.
• 12 ratas machos, de la cepa Wistar, de la misma edad y
peso (entre 300 y 350 gr).
• Por protocolo marcado, se dividió a los animales en dos
grupos: A y B de acuerdo a la modalidad de clampeo.

8. MATERIAL Y MÉTODO
• Grupo A :
• 5 minutos de isquemia y 5 minutos de reperfusión de los
lóbulos izquierdos superiores
(los que poseen una arteria hepática accesoria)
• 90 minutos de isquemia total del hígado.
• Sobrevida de 24 hs.
• Hepatectomía .
• Grupo B :
• Se les realizó el mismo procedimiento pero en el lóbulo
lateral superior derecho.

9. MATERIAL Y MÉTODO

10. MATERIAL Y MÉTODO

11. Grupo A

12. Grupo B

13. MATERIAL Y MÉTODO
• Se seleccionaron los lóbulos medio izquierdo y lateral superior
derecho para hacer los estudios histológicos, tanto en los grupos A
como B.
• Seleccionamos siempre el mismo cuadrante dentro de la lámina.
• Reper: vena centrolobulillar.
• Número de hepatocitos alterados.

14. MATERIAL Y MÉTODO
• Se midieron tres variables de lesión del hepatocito:
 Alteración nuclear.
 Alteraciones citoplasmáticas.
 Alteraciones de la histoarquitectura.
0 Ausencia de Lesiones
1 Cambios Histológicos Leves Área de LESION < 30%, área total en campo visual
(aumento X10)
2 Cambios Histológicos Moderados Área de LESION 30 – 70% área total en campo visual
(aumento X10)
3 Cambios Histológicos Severos Área de LESION > 70%, área total en campo visual
(aumento X10)

15. MATERIAL Y MÉTODO
Cambios valorados
• Núcleo:
• Morfología alterada.
• Bordes irregulares y festoneados.
• Aumento del tamaño.
• Cromatina desorganizada.
• Citoplasma:
• Vacuolización.
• Hiperclaridad.
• Balonamiento.
• Histoarquitectura:
• Desorganización peri vena centrolobulillar.

16. RESULTADOS
PREACOND HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA
SIN LESION
2 1 1 4
GRUPO A
LEVE
4 3 1 8
• 12 animales MOD.
0 2 3 5
sobrevivieron
al SEVERO
0 0 1 1
procedimiento:
CONTROL HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA
SIN LESION
1 0 0 1
LEVE
3 0 1 4
MOD.
2 6 2 10
SEVERO
0 0 3 3

17. GRUPO B
RESULTADOS
PREACOND HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA
SIN LESION
2 0 0 2
LEVE
3 3 2 8
MOD.
1 3 2 6
SEVERO
0 0 2 2
CONTROL HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA
SIN LESION
0 0 0 0
LEVE
3 2 1 6
MOD.
2 2 2 6
SEVERO
1 2 3 6

18. RESULTADOS
• Promedio de lesiones:
• Grupo A:
• Lóbulo preacondicionado LEVE
• Lóbulo no preacondicionado : MODERADA
• Grupo B:
• Lóbulo preacondicionado : LEVE
• Lóbulo no preacondicionado :
MODERADA

19. Sin Preacondicionar
GRUPO A
Preacondicionado

20. Sin Preacondicionar
GRUPO B
Preacondicionado

21. RESULTADOS
ANALISIS ESTADISTICO
• Grupo A
Menor lesión a nivel de la suma de las lesiones para los
lóbulos preacondicionados. p igual a 0,031.(Wilcoxon).
• Grupo B
Menor lesión a nivel de la suma de las lesiones para los
lóbulos preacondicionados. p igual a 0,016.(Wilcoxon).
• Comparamos los lóbulos preacondicionados de cada grupo:
No presentaron diferencia significativa para ninguno de los tipos
de lesión.(Mann Whitney)

22. DISCUSION
• Modificación en el modelo de clampeo hepático.
• Arteria hepática accesoria ?
• Nos aseguramos el clampeo total del lóbulo lateral superior
derecho hepático, donde no existe circulación accesoria.
• Comparamos dos modelos de Campleo hepático diferentes.
• Implementamos un modelo pareado.

23. DISCUSION
• Ya demostramos el beneficio del PI en la fase de
isquemia sin reperfundir.
“VALOR DEL PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO
HEPATICO EN LA PREVENCION DEL DAÑO POR ISQUEMIA EN
RATAS.”
Dr. Juan Manuel Sanguinetti, Dr. Manuel Sanguinetti, Dr.
Juan Cossa,Br. Juan D. Fernández, Br. Diego Muguruza.

24. DISCUSION
• Analizamos las primeras alteraciones histológicas de la LIR.
• No existe consenso en el número de ciclos ni en el tiempo de
duración de los mismos para lograr una óptima protección del
hepatocito.
• En base a la bibliografía analizada decidimos realizar un
preacondicionamiento de 5 minutos de isquemia y 5 minutos
de reperfusión.

25. CONCLUSIONES
Una serie de preacondicionamiento isquémico de 5 minutos de
isquemia, con 5 minutos de reperfusión, disminuye las lesiones
hepatocíticas luego de una isquemia hepática total de 90
minutos, con posterior reperfusión de 24 hs en la rata.
No se presentaron diferencias significativas entre los dos
modelos de clampeo planteados.
La presencia de la arteria hepática accesoria no demostró
importancia funcional en el modelo de isquemia planteado.

26. 1° CONGRESO ARGENTINO Y
LATINOAMERICANO DE CIRUGÍA
HEPATO-PANCREATO-BILIAR
2012
MUCHAS GRACIAS