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Toxoplasmosis
toxoplasma gondii
Equipo 1
4CM7
• Reino: Protista
• Phylum: Apicomplexa
• Clase: Conoidasida
• Orden: Eucoccidiorida
• Familia: Sarcocystidae
• Género: Toxoplasma
• Especie: T. gondii
Tiene un ciclo de reproducción y transmisión que
comprende:
• Una fase sexual en el epitelio entérico del huésped
principal (felino)
• Una fase de reproducción asexual extraintestinal en lo
huéspedes intermediarios (mamíferos y aves).
• Es intracelular obligado
• Tiene forma de media luna
• Mide entre 4 y 8 µm de largo por 2 a 4 µm de ancho.
CICLO BIOLÓGICO
HUÉSPEDES
DEFINITIVO
INTERMEDIARIOS
Animales de sangre
caliente
Más importante
GATO
• El felino se infecta por vía oral.
• Trofozoíto
• Quistes con bradizoítos
• Ooquistes con esporozoítos
Resisten el
paso por el
tracto
digestivo
Jugo
gástrico
destruye las
cubiertas
Se libera en
intestino
delgado
Penetra
enterocito
Comienzan a
multiplicar
su núcleo
(proceso de
reproducción:
esquizogonia)
Enterocito =
Esquizonte
Núcleos se
rodean de
membrana
plasmática
Se liberan
del
ezquizonte
=
merozoíto
Repetir ciclo
esquizogonico en
enterocito nuevo
Merozoíto
Gametocitos
Micro y
macrogametos
Ooquiste
Humano
Formas infectantes
• Taquizoíto
• Bradizoíto
• Esporozoíto
Quiste
tisular en
heces
Esporula
1-7 días
Taquizoíto Esporozoíto
Invade
cualquier
célula
Taquizoíto
Taquizoíto
sobrevive
en vacuola
dentro de
la célula
Reproducción
por fusión
binaria
Rompe la
célula
Reacción
inmunitaria
Bradizoíto
Se
multiplican
con lentitud
Se
encuentran
dentro de
quiste
Fase
crónica
SN,
corazón,
ojos
Sobreviven
68 días
• El diagnóstico se establece mediante la demostración del aumento
de los títulos de anticuerpos en muestras de sangre recogidas de
manera seriada.
• Para ello se emplean pruebas serológicas.
• Laboratorios de referencia emplean un panel de pruebas
denominado PERFIL SEROLÓGICO DE TOXOPLASMA GONDII (PST),
para determinar si la infección es compatible con una de recién
adquisición o es más antigua.
Esta prueba incluye:
• La prueba de colorante Sabin-Feldman, para determinar los
anticuerpos IgG
• Análisis de inmunoadsorción ligada a enzimas (ELISA), para
determinar anticuerpos IgM, IgA e IgE.
• La prueba de aglutinación inmunoadsorbente, para medir la
concentración de anticuerpos IgE.
• La prueba de aglutinación diferencial, para medir las
concentraciones de anticuerpos IgG.
Aglutinación en Látex, PCR, fijación del complemento,
inmunofluorescencia indirecta y radioinmunoensayo directo e
indirecto.
MÉTODO
INDIRECTO
Se puede
realizar…
Biopsia de ganglios linfáticos, cerebro, miocardio y otros tejidos
sospechosos, así como de líquidos corporales como el liquido
cefalorraquídeo y líquido amniótico.
Tinción de fluorescencia basados en anticuerpos monoclonales.
Exámenes de gabinete (Rx, tomografía computarizada, resonancia
magnética, ultrasonido, oftalmológico).
MÉTODO
DIRECTO
Situaciones clínicas más
frecuentes…
Diagnóstico de la infección:
• En inmunocompetentes: Cualquier prueba que mida anticuerpos
totales o de clase IgG, por ejemplo aglutinación diferencial
• En inmunosuprimidos y sospecha infección del S.N.C. : En el
ámbito de la inmunosupresión debida a algún tipo
de trasplante es importante saber cuanto antes si el donante,
receptor o ambos están infectados. Un caso especial son los
pacientes con inmunosupresión producida por VIH. En estos
pacientes está indicado el empleo de marcadores de "actividad del
parásito" tales como PCR o detección de
• En el embarazo y recién nacido. Determinación por PCR
Material
Paramétodoindirecto…
Tubo tapón rojo o amarillo
Sistema vacutainer o jeringa
Torundas
Torniquete
1.- Identificar al
paciente y ver
prueba a realizar
2.-Presentarse al
paciente
3.-Lavarse las
manos
4.-Rotular el tubo
5.-Enseñarle el material
sellado
6.-Preparar material
para la venopunsión
7.-Poner torniquete 8.-Localizar vena a
puncionar
TÉCNICA…
9.-Realizar asepsia 10.-Puncionar y
extraer sangre
11.-Retirar el
torniquete
12.-Sacar el tubo del
sistema vacutainer 13.-Desechar
punzocortante
14.-Poner etiqueta
de la muestra con
nombre y código del
paciente
Prueba ELISA por toxoplasmosis
Es un examen que se realiza para buscar anticuerpos
en la sangre.
Toxoplasmosis puede ser un peligro para un feto en
desarrollo o una persona inmunocomprometida.
• Los micropocillos que se usan como fase
solida están recubiertas con antígenos
específicos
• Los anticuerpos existentes en la muestra
unen a los antígenos inmovilizados de la
placa de micro titulación
• El conjugado de anticuerpos de IgG anti
humano con peroxidasa de rábano, se unen
con el complejo antígeno-cuerpo en
muestra positivas – este complejo
desarrolla una coloración azul.
• Finalmente se añade acido sulfúrico para
detener la reacción cambiando azul a
amarillo.
Pre incubar la bandeja
de desarrollo: 3hrs a
temperatura ambiente
o 20 min a 37c
Perforar la cubierta
de aluminio de la fila
a de la bandeja de
desarrollo con el
perforador
Agregar 10u de las muestras
y testigos en el fondo de los
pocillos perforados
previamente. Mezclar
vaciando y rellenando la
punta de la micro pipeta
Sacar el peine del
empaque
Insertar el peine en la
fila a con el lado
impreso hacia los
números y mezclar
Incubar 10 min a 37c
Minutos antes de cumplidos
los 10 min de incubación
perforar la cubierta de
aluminio de la fila b de la
bandeja de desarrollo con el
perforador
Absorber el líquido
adherido a los dientes
con ayuda del papel
absorbente
Primer lavado: insertar
y retirar el peine
vigorosamente y en
repetidas ocasiones en
los pocillos de la fila b
durante 1 min
Perforar los pocillos
de a fila c
Absorber el líquido
adherido a los
dientes con ayuda de
pale absorbente
Insertar el peine de la
fila c con el lado
impreso hacia los
números y mezclar
Incubar 20 min a 37c
Minutos antes de
cumplidos los 10 min de
incubación perforar la
cubierta de aluminio de
la fila d
Absorber el líquido
adherido a los
dientes con ayuda del
papel absorbente
Segundo lavado: insertar y
retirar el peine
vigorosamente y en repetidas
ocasiones en los pocillos de
la fila d durante 2 min
Perforar los pocillos
de a fila e
Absorber el líquido
adherido a los
dientes con ayuda de
pale absorbente
Tercer lavado: insertar y
retirar el peine
vigorosamente y en repetidas
ocasiones en los pocillos de
la fila e durante 2 min
Perforar la cubierta de
aluminio de la fila f y
absorber el líquido
adherido en el peine
como en el paso 9
Insertar el peine en la
fila f y mezclar
Incubar a 10 min a
37ºc
Después de trascurrido el
tiempo de incubación,
retirara el peine e insertarlo
nuevamente en la fila E
durante un minuto para
detener la reacción
Retirar el peine y
dejar secar al aire
Leer el resultado
IgM
Marcador de la fase
aguda de la enfermedad
Pueden permanecer
detectables durante
muchos meses e incluso
años después de
producida la infección
IgG
Su presencia implica que
en algún momento de la
vida el paciente ha estado
en contacto con el
parásito
Neonatos la respuesta de
anticuerpos IgM puede
demorar varios meses después
de la infección
Su ausencia
prácticamente
descarta la infección
Su presencia implica la
necesidad de proseguir
el estudio
Presencia de anticuerpos IgG e IgM anti-toxoplasma gondii
Reporte emitido al medico por el laboratorio
Integración del
diagnostico
nosológico y etiológico
• Es una enfermedad de difícil diagnóstico
parasitológico, pues no es fácil demostrar el
agente etiológico y establecer la relación entre
infección y enfermedad.
• En base a los resultados obtenidos vía laboratorio
y con la diferenciación de manifestaciones clínicas
se puede dar el Dx como:
Toxoplasmosis congénita: Transmisión vertical debida a infección activa en
la madre durante el embarazo (ya sea por reactivación de bradizoítos en
fase latente o por infección primaria aguda).
Toxoplasmosis ocular: Debida a toxoplasmosis congénita en la mayor parte
de los casos. Los principales signos y síntomas de la enfermedad ocular
aguda son dolor ocular, fotofobia, lagrimeo, visión borrosa, un cuadro no
específico.
Infección aguda adquirida: El período de incubación es de 10 - 14 días. Se
presenta linfadenitis cervical y occipital moderada, mal estado general; en
ocasiones se incluye linfadenopatía supraclavicular e inguinal, fiebre
moderada, dolor de garganta, cefalea y mialgias. Los taquizoítos se
encuentran en todos los órganos en la infección aguda.
Toxoplasmosis cerebral
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Toxoplasma
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Toxoplasma

  • 2. • Reino: Protista • Phylum: Apicomplexa • Clase: Conoidasida • Orden: Eucoccidiorida • Familia: Sarcocystidae • Género: Toxoplasma • Especie: T. gondii
  • 3. Tiene un ciclo de reproducción y transmisión que comprende: • Una fase sexual en el epitelio entérico del huésped principal (felino) • Una fase de reproducción asexual extraintestinal en lo huéspedes intermediarios (mamíferos y aves). • Es intracelular obligado • Tiene forma de media luna • Mide entre 4 y 8 µm de largo por 2 a 4 µm de ancho.
  • 7. • El felino se infecta por vía oral. • Trofozoíto • Quistes con bradizoítos • Ooquistes con esporozoítos
  • 8. Resisten el paso por el tracto digestivo Jugo gástrico destruye las cubiertas Se libera en intestino delgado Penetra enterocito Comienzan a multiplicar su núcleo (proceso de reproducción: esquizogonia) Enterocito = Esquizonte Núcleos se rodean de membrana plasmática Se liberan del ezquizonte = merozoíto Repetir ciclo esquizogonico en enterocito nuevo
  • 11. Formas infectantes • Taquizoíto • Bradizoíto • Esporozoíto
  • 12. Quiste tisular en heces Esporula 1-7 días Taquizoíto Esporozoíto Invade cualquier célula Taquizoíto Taquizoíto sobrevive en vacuola dentro de la célula Reproducción por fusión binaria Rompe la célula Reacción inmunitaria Bradizoíto Se multiplican con lentitud Se encuentran dentro de quiste Fase crónica SN, corazón, ojos Sobreviven 68 días
  • 13.
  • 14.
  • 15. • El diagnóstico se establece mediante la demostración del aumento de los títulos de anticuerpos en muestras de sangre recogidas de manera seriada. • Para ello se emplean pruebas serológicas. • Laboratorios de referencia emplean un panel de pruebas denominado PERFIL SEROLÓGICO DE TOXOPLASMA GONDII (PST), para determinar si la infección es compatible con una de recién adquisición o es más antigua.
  • 16. Esta prueba incluye: • La prueba de colorante Sabin-Feldman, para determinar los anticuerpos IgG • Análisis de inmunoadsorción ligada a enzimas (ELISA), para determinar anticuerpos IgM, IgA e IgE. • La prueba de aglutinación inmunoadsorbente, para medir la concentración de anticuerpos IgE. • La prueba de aglutinación diferencial, para medir las concentraciones de anticuerpos IgG. Aglutinación en Látex, PCR, fijación del complemento, inmunofluorescencia indirecta y radioinmunoensayo directo e indirecto. MÉTODO INDIRECTO
  • 17. Se puede realizar… Biopsia de ganglios linfáticos, cerebro, miocardio y otros tejidos sospechosos, así como de líquidos corporales como el liquido cefalorraquídeo y líquido amniótico. Tinción de fluorescencia basados en anticuerpos monoclonales. Exámenes de gabinete (Rx, tomografía computarizada, resonancia magnética, ultrasonido, oftalmológico). MÉTODO DIRECTO
  • 18. Situaciones clínicas más frecuentes… Diagnóstico de la infección: • En inmunocompetentes: Cualquier prueba que mida anticuerpos totales o de clase IgG, por ejemplo aglutinación diferencial • En inmunosuprimidos y sospecha infección del S.N.C. : En el ámbito de la inmunosupresión debida a algún tipo de trasplante es importante saber cuanto antes si el donante, receptor o ambos están infectados. Un caso especial son los pacientes con inmunosupresión producida por VIH. En estos pacientes está indicado el empleo de marcadores de "actividad del parásito" tales como PCR o detección de • En el embarazo y recién nacido. Determinación por PCR
  • 19. Material Paramétodoindirecto… Tubo tapón rojo o amarillo Sistema vacutainer o jeringa Torundas Torniquete
  • 20. 1.- Identificar al paciente y ver prueba a realizar 2.-Presentarse al paciente 3.-Lavarse las manos 4.-Rotular el tubo 5.-Enseñarle el material sellado 6.-Preparar material para la venopunsión 7.-Poner torniquete 8.-Localizar vena a puncionar TÉCNICA…
  • 21. 9.-Realizar asepsia 10.-Puncionar y extraer sangre 11.-Retirar el torniquete 12.-Sacar el tubo del sistema vacutainer 13.-Desechar punzocortante 14.-Poner etiqueta de la muestra con nombre y código del paciente
  • 22.
  • 23. Prueba ELISA por toxoplasmosis Es un examen que se realiza para buscar anticuerpos en la sangre. Toxoplasmosis puede ser un peligro para un feto en desarrollo o una persona inmunocomprometida.
  • 24. • Los micropocillos que se usan como fase solida están recubiertas con antígenos específicos • Los anticuerpos existentes en la muestra unen a los antígenos inmovilizados de la placa de micro titulación
  • 25. • El conjugado de anticuerpos de IgG anti humano con peroxidasa de rábano, se unen con el complejo antígeno-cuerpo en muestra positivas – este complejo desarrolla una coloración azul. • Finalmente se añade acido sulfúrico para detener la reacción cambiando azul a amarillo.
  • 26. Pre incubar la bandeja de desarrollo: 3hrs a temperatura ambiente o 20 min a 37c Perforar la cubierta de aluminio de la fila a de la bandeja de desarrollo con el perforador Agregar 10u de las muestras y testigos en el fondo de los pocillos perforados previamente. Mezclar vaciando y rellenando la punta de la micro pipeta Sacar el peine del empaque Insertar el peine en la fila a con el lado impreso hacia los números y mezclar Incubar 10 min a 37c Minutos antes de cumplidos los 10 min de incubación perforar la cubierta de aluminio de la fila b de la bandeja de desarrollo con el perforador Absorber el líquido adherido a los dientes con ayuda del papel absorbente Primer lavado: insertar y retirar el peine vigorosamente y en repetidas ocasiones en los pocillos de la fila b durante 1 min
  • 27. Perforar los pocillos de a fila c Absorber el líquido adherido a los dientes con ayuda de pale absorbente Insertar el peine de la fila c con el lado impreso hacia los números y mezclar Incubar 20 min a 37c Minutos antes de cumplidos los 10 min de incubación perforar la cubierta de aluminio de la fila d Absorber el líquido adherido a los dientes con ayuda del papel absorbente Segundo lavado: insertar y retirar el peine vigorosamente y en repetidas ocasiones en los pocillos de la fila d durante 2 min Perforar los pocillos de a fila e Absorber el líquido adherido a los dientes con ayuda de pale absorbente
  • 28. Tercer lavado: insertar y retirar el peine vigorosamente y en repetidas ocasiones en los pocillos de la fila e durante 2 min Perforar la cubierta de aluminio de la fila f y absorber el líquido adherido en el peine como en el paso 9 Insertar el peine en la fila f y mezclar Incubar a 10 min a 37ºc Después de trascurrido el tiempo de incubación, retirara el peine e insertarlo nuevamente en la fila E durante un minuto para detener la reacción Retirar el peine y dejar secar al aire Leer el resultado
  • 29.
  • 30.
  • 31. IgM Marcador de la fase aguda de la enfermedad Pueden permanecer detectables durante muchos meses e incluso años después de producida la infección IgG Su presencia implica que en algún momento de la vida el paciente ha estado en contacto con el parásito Neonatos la respuesta de anticuerpos IgM puede demorar varios meses después de la infección Su ausencia prácticamente descarta la infección Su presencia implica la necesidad de proseguir el estudio
  • 32.
  • 33. Presencia de anticuerpos IgG e IgM anti-toxoplasma gondii Reporte emitido al medico por el laboratorio
  • 35. • Es una enfermedad de difícil diagnóstico parasitológico, pues no es fácil demostrar el agente etiológico y establecer la relación entre infección y enfermedad. • En base a los resultados obtenidos vía laboratorio y con la diferenciación de manifestaciones clínicas se puede dar el Dx como: Toxoplasmosis congénita: Transmisión vertical debida a infección activa en la madre durante el embarazo (ya sea por reactivación de bradizoítos en fase latente o por infección primaria aguda). Toxoplasmosis ocular: Debida a toxoplasmosis congénita en la mayor parte de los casos. Los principales signos y síntomas de la enfermedad ocular aguda son dolor ocular, fotofobia, lagrimeo, visión borrosa, un cuadro no específico. Infección aguda adquirida: El período de incubación es de 10 - 14 días. Se presenta linfadenitis cervical y occipital moderada, mal estado general; en ocasiones se incluye linfadenopatía supraclavicular e inguinal, fiebre moderada, dolor de garganta, cefalea y mialgias. Los taquizoítos se encuentran en todos los órganos en la infección aguda. Toxoplasmosis cerebral Toxoplasmosis del embarazo