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CULTIVO DE SECRECION
VAGINAL
La leucorrea, conocida comúnmente como “descenso”, es la causa más
frecuente de la consulta ginecológica en cualquier edad. Se le
describe como un incremento del flujo vaginal que se produce
normalmente por la exudación permanente de la vagina y del cuello del
útero, acompañándose de abundantes células de descamación y bacterias
habituales. Se pueden presentar dos tipos de leucorrea: fisiológica y
patológica
Es por ello que un cultivo vaginal es importante para detectar
infecciones vaginales crónicas, de transmisión sexual o no, las cuales
cuando se vuelven crónicas pueden derivar en casos más graves como
enfermedades pélvicas, y/o hasta infertilidad. Hoy en día se cuenta
con la posibilidad de hacer un cultivo con antibiograma que ayuda al
médico a determinar el tratamiento específico para el microorganismo
causante de la infección.
Obtención de muestras del tracto genital
femenino
Condiciones previas: La paciente no debe estar
recibiendo tratamiento antimicrobiano. no
practicarse duchas vaginales, ni tener
relaciones sexuales 24 horas antes de la
obtención de la muestra. Así mismo, no debe
bañarse el día de la recolección de la misma.
Materiales
• Espéculo estéril
• Hisopos de alginato de calcio o de
algodón previamente buferados y
esterilizados
• Solución salina fisiológica estéril
• Medio de transporte: Amies o Stuart
• Láminas portaobjetos limpias y
desengrasadas
Procedimiento: Para la obtención de la
muestra vaginal y/o cervical, se debe
emplear un espéculo; la maniobra puede
ser realizada por el médico en la consulta o
por el microbiólogo en el laboratorio,
siempre que se disponga de una camilla
ginecológica. Por lo general, las muestras
son enviadas al laboratorio, por ello es
importante la instrucción del personal que
recolectará las mismas.
Observación: si la muestra es recolectada
en el laboratorio de microbiología, se debe
disponer además de los medios de cultivo
necesarios, según el tipo de muestra a
obtener.
Procedimiento para la investigación
microbiológica de muestras vaginales
Características macroscópicas de la muestra:
Valorar e identificar las siguientes características
en la secreción genital:
• Cantidad
• Consistencia
• Olor
• pH
• Color
Características microscópicas de la muestra: Con
la muestra vaginal obtenida se debe realizar un
montaje en fresco entre lámina y laminilla y dos
extendidos finos para teñir al gram.
 Examen al fresco: informar la presencia de
células descamativas, leucocitos y bacterias,
presencia o ausencia de levaduras y de
trofozoítos de Trichomonas vaginalis.
 Gram: Herramienta citológica muy útil para el
diagnóstico diferencial entre vaginitis y
vaginosis bacteriana o citolítica.
TINCIÓN DE
GRAM
Es la tinción más utilizada en Microbiología. Se
emplea para la observación microscópica de
muestras clínicas y de cultivos bacterianos. Permite
visualizar la mayoría de las bacterias y algunos
hongos (principalmente levaduras), por lo que con
ella se puede hacer el diagnóstico de infección por
Candida, y detecta además si la paciente padece
vaginosis bacteriana.
Permite diferenciar las bacterias en dos grandes
grupos:
o Gram positivas: se tiñen de AZUL.
o Gram negativas: se tiñen de ROJO.
También permite identificarlas por su forma:
o Cocos: bacterias redondas.
o Bacilos: bacterias alargadas.
1. MATERIAL NECESARIO
 Torunda de
algodón estéril.
 Portaobjetos.
 Mechero de
alcohol o gas.
 Agua.
 Reactivos: Cristal
Violeta, Lugol,
Alcohol-Acetona,
Safranina o
Fucsina.
 Microscopio.
 Aceite de
inmersión para el
microscopio.
1. Una vez tomada la muestra, preparar una extensión de la misma sobre
un portaobjetos.
2. Dejar secar a temperatura ambiente (hasta que la muestra esté
completamente seca).
3. Fijar la muestra con calor pasando el portaobjetos por encima de la
llama de un mechero durante unos segundos y dejar enfriar. A partir de
este momento la muestra ya está lista para ser teñida.
4. Cubrir completamente la preparación con el reactivo llamado CRISTAL
VIOLETA y dejarlo actuar durante un minuto.
5. Lavar con AGUA.
6. Cubrir la preparación completamente con el reactivo LUGOL y dejarlo
actuar durante 1 minuto.
7. Lavar con AGUA.
8. Decolorar la preparación con ALCOHOL-ACETONA durante unos
segundos (15-20 seg). Recuerde que este el paso más importante de la
tinción, no sobrepase ese tiempo. Las bacterias gram positivas quedan
teñidas de azul, las gram negativas se decoloran.
9. Lavar con AGUA.
10.Cubrir la preparación con SAFRANINA o FUCSINA diluida durante 1
minuto.
11.Lavar con AGUA. Las bacteria gram negativas quedan teñidas de rojo y
Procedimiento de la tinción gram
13. Visualizar en microscopio con objetivo 100x y aceite de inmersión. Las
levaduras (Candida) tienen una forma ovoide, en muchas ocasiones se las puede
observar en gemación y pueden presentar prolongaciones denominadas
pseudohifas; se tiñen de azul/morado tras la tinción de Gram, por lo que se
comportan como microorganismos gram-positivos:
Antibiograma
Se efectúa cuando se aíslan bacterias de
tipo entérico o cocos Gram-positivos,
generalmente en niñas en etapa pre-
púber o púber, o en la menopausia.
También puede hacerse cuando se aísla
gonococo del endocérvix. En pacientes en
edad fértil, cuando la patología obedece
mayormente a parásitos, hongos, virus o
vaginosis bacteriana, no es posible
realizarla. Existen esquemas específicos
para el tratamiento de estas entidades.

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  • 2. La leucorrea, conocida comúnmente como “descenso”, es la causa más frecuente de la consulta ginecológica en cualquier edad. Se le describe como un incremento del flujo vaginal que se produce normalmente por la exudación permanente de la vagina y del cuello del útero, acompañándose de abundantes células de descamación y bacterias habituales. Se pueden presentar dos tipos de leucorrea: fisiológica y patológica Es por ello que un cultivo vaginal es importante para detectar infecciones vaginales crónicas, de transmisión sexual o no, las cuales cuando se vuelven crónicas pueden derivar en casos más graves como enfermedades pélvicas, y/o hasta infertilidad. Hoy en día se cuenta con la posibilidad de hacer un cultivo con antibiograma que ayuda al médico a determinar el tratamiento específico para el microorganismo causante de la infección.
  • 3. Obtención de muestras del tracto genital femenino Condiciones previas: La paciente no debe estar recibiendo tratamiento antimicrobiano. no practicarse duchas vaginales, ni tener relaciones sexuales 24 horas antes de la obtención de la muestra. Así mismo, no debe bañarse el día de la recolección de la misma. Materiales • Espéculo estéril • Hisopos de alginato de calcio o de algodón previamente buferados y esterilizados • Solución salina fisiológica estéril • Medio de transporte: Amies o Stuart • Láminas portaobjetos limpias y desengrasadas
  • 4. Procedimiento: Para la obtención de la muestra vaginal y/o cervical, se debe emplear un espéculo; la maniobra puede ser realizada por el médico en la consulta o por el microbiólogo en el laboratorio, siempre que se disponga de una camilla ginecológica. Por lo general, las muestras son enviadas al laboratorio, por ello es importante la instrucción del personal que recolectará las mismas. Observación: si la muestra es recolectada en el laboratorio de microbiología, se debe disponer además de los medios de cultivo necesarios, según el tipo de muestra a obtener. Procedimiento para la investigación microbiológica de muestras vaginales Características macroscópicas de la muestra: Valorar e identificar las siguientes características en la secreción genital: • Cantidad • Consistencia • Olor • pH • Color Características microscópicas de la muestra: Con la muestra vaginal obtenida se debe realizar un montaje en fresco entre lámina y laminilla y dos extendidos finos para teñir al gram.  Examen al fresco: informar la presencia de células descamativas, leucocitos y bacterias, presencia o ausencia de levaduras y de trofozoítos de Trichomonas vaginalis.  Gram: Herramienta citológica muy útil para el diagnóstico diferencial entre vaginitis y vaginosis bacteriana o citolítica.
  • 5. TINCIÓN DE GRAM Es la tinción más utilizada en Microbiología. Se emplea para la observación microscópica de muestras clínicas y de cultivos bacterianos. Permite visualizar la mayoría de las bacterias y algunos hongos (principalmente levaduras), por lo que con ella se puede hacer el diagnóstico de infección por Candida, y detecta además si la paciente padece vaginosis bacteriana. Permite diferenciar las bacterias en dos grandes grupos: o Gram positivas: se tiñen de AZUL. o Gram negativas: se tiñen de ROJO. También permite identificarlas por su forma: o Cocos: bacterias redondas. o Bacilos: bacterias alargadas.
  • 6. 1. MATERIAL NECESARIO  Torunda de algodón estéril.  Portaobjetos.  Mechero de alcohol o gas.  Agua.  Reactivos: Cristal Violeta, Lugol, Alcohol-Acetona, Safranina o Fucsina.  Microscopio.  Aceite de inmersión para el microscopio. 1. Una vez tomada la muestra, preparar una extensión de la misma sobre un portaobjetos. 2. Dejar secar a temperatura ambiente (hasta que la muestra esté completamente seca). 3. Fijar la muestra con calor pasando el portaobjetos por encima de la llama de un mechero durante unos segundos y dejar enfriar. A partir de este momento la muestra ya está lista para ser teñida. 4. Cubrir completamente la preparación con el reactivo llamado CRISTAL VIOLETA y dejarlo actuar durante un minuto. 5. Lavar con AGUA. 6. Cubrir la preparación completamente con el reactivo LUGOL y dejarlo actuar durante 1 minuto. 7. Lavar con AGUA. 8. Decolorar la preparación con ALCOHOL-ACETONA durante unos segundos (15-20 seg). Recuerde que este el paso más importante de la tinción, no sobrepase ese tiempo. Las bacterias gram positivas quedan teñidas de azul, las gram negativas se decoloran. 9. Lavar con AGUA. 10.Cubrir la preparación con SAFRANINA o FUCSINA diluida durante 1 minuto. 11.Lavar con AGUA. Las bacteria gram negativas quedan teñidas de rojo y Procedimiento de la tinción gram
  • 7.
  • 8. 13. Visualizar en microscopio con objetivo 100x y aceite de inmersión. Las levaduras (Candida) tienen una forma ovoide, en muchas ocasiones se las puede observar en gemación y pueden presentar prolongaciones denominadas pseudohifas; se tiñen de azul/morado tras la tinción de Gram, por lo que se comportan como microorganismos gram-positivos:
  • 9.
  • 10.
  • 11. Antibiograma Se efectúa cuando se aíslan bacterias de tipo entérico o cocos Gram-positivos, generalmente en niñas en etapa pre- púber o púber, o en la menopausia. También puede hacerse cuando se aísla gonococo del endocérvix. En pacientes en edad fértil, cuando la patología obedece mayormente a parásitos, hongos, virus o vaginosis bacteriana, no es posible realizarla. Existen esquemas específicos para el tratamiento de estas entidades.