La tinción de Ziehl-Neelsen es un método para identificar organismos ácido-resistentes como Mycobacterium tuberculosis, el cual causa la tuberculosis. El método implica teñir la muestra con una solución de fucsina que se adhiere a las bacterias, seguido por una decoloración con alcohol-ácido que remueve el colorante de todas las bacterias excepto las ácido-resistentes. Las bacterias teñidas de rojo son entonces identificadas microscópicamente.

1. Coloración Ácido-Resistente (De Ziehl-Neelsen) Ginel Mesa 09-0470 Lab. Microbiología I Sección 71

2. ¿Qué es la tinción de Ziehl-Neelsen? Es un tintado bacteriológico especial utilizado para identificar organismos acido-resistentes, en su mayoría mycobacterias. Mycobacterium tuberculosis es el más importante de este grupo, y es responsable de la enfermedad conocida como tuberculosis (TB).

3. Fundamento Ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos de cadena larga en sus paredes celulares que les dan la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos.

4. Cont. La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificación de los ácidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias.

5. Procedimiento Caliente. Hacer un frotis de la muestra. Aplicar fucsina-fenicada . Calentar por 3-5 minutos. – ENJUAGAR CON AGUA. Decolorar con alcohol-ácido por 7 minutos. –ENJUAGAR. Si elportaobjetos aún están rosa, aplique una cantidad adicional de alcohol de 1 a 3 minutos. Aplicar azul de metileno (1 minuto). –ENJUAGAR. Ahora coloque una pequeñita gota de aceite de inmersión y haga la observación al microscopio.

6. Procedimiento Frio. Hacer un frotis. Dejarlo en el puente de tinción. Aplicar fucsina-fenicada (solución con fenol y mayor concentración de fucsina). Dejar en vasos Coplin durante 20 minutos. Decolorar con alcohol ácido.

7. Resultados. Algunos microorganismos ácido-alcohol resistentes BAAR : rojo. Núcleos : azul semiamarillo. Mycobacterium: fuertemente ácido-alcohol resistentes. Nocardia y Actinomices: débilmente ácido-alcohol resistentes. Parásitos coccídeos (Cryptosporidium) de muestras fecales.