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Monitoreo de saxitoxina en
tres especies de pez globo de
            Florida




         Alumna: Natalia Laurens

      Universidad Nacional de Quilmes
INTRODUCCIÓN
Se realiza el monitoreo de saxitoxina en especies de
pez globo comunes en la costa de Florida debido al
descubrimiento de que la misma se almacenada en
el músculo de estos peces y produce intoxicación en
                    las personas
Saxitoxina
La saxitoxina es una neurotoxina estable al calor, es un polipéptido
tóxico producida por dinoflagelados: Alexandrium spp., Gymnodinium
catenatum, Pyrodinium bahamense




En los casos más graves las toxinas bloquean los nervios del cuerpo
humano dando lugar a la parálisis. La muerte se produce por asfixia
La SXT es una molécula muy
grande como para atravesar el
canal de sodio, como en su
estructura tiene como núcleo
una purina esta le permite
unirse al canal de sodio
mediante un grupo guaridino,
bloqueando así el canal de
sodio.




                                Organismos como el Pez Globo
                                sufrieron un cambio evolutivo y sus
                                canales de sodio son insensibles a
                                esta toxina
Características del pez globo
•Hay mas de 120 especies de pez globo en todo el mundo.
 •Casi todos los peces globo contienen tetrodotoxina,
  Para los humanos, la tetrodotoxina es mortal,
  hasta 1.200 veces más venenosa que el cianuro.

 •Se alimentan de animales invertebrados y algas.Los especímenes más
    grandes pueden incluso partir cáscaras con su pico duro y comer
    almejas, mejillones y mariscos.


                       •En algunos lugares su carne es considerada un manjar.
                       •Solo cocineros expertos pueden preparar platos con
                       este pez.
Especies monitoreadas

Southern puffer

        Checkered puffer


  Bandtail puffer
Sitios de muestreo y capturas

                                         Jacksonville (JX)




      Apalachicola (AP)

                    Cedar Key (CK)
                                         Indian River (IR)
                   Tampa Bay (TB)


                                           Tequesa (TQ)
                Charrlotte Harbor (CH)




                                           Florida Keys (FK)
Extracción de toxina y análisis
 El pez fue pesado y medido en longitud
 Se tomaron muestras de piel, músculos,
contenido de intestinos, gónadas e hígado
 Los tejidos fueron homogeneizados individualmente
con HCl 0,1 N en shaker
 Calentados en baño de agua en ebullición
 Centrifugados a 3000 x g. (10 min)
 El sobrenadante fue almacenado a 2oC
¿Qué es un ensayo ELISA?
¿Qué es un ensayo ELISA?
Test de Saxitoxina
     Se colocan los
     estándares de
      Saxitoxina o
  muestras a analizar y
      el anticuerpo
  secundario conjugado
     con la enzima


   Luego de 1 hora
   se lava con agua
     bidestilada o
      agua MiliQ
Test de Saxitoxina
                          Se añade el sustrato y
                          el cromógeno: peróxido
                                  de urea y
                             tetrametilbencidina

                                                      Se realiza la
                                                   lectura del color a
                                                        450 nm.

 Luego de 1 hora
 de incubación se
detiene la reacción
con ácido sulfúrico
        1N
RESULTADOS
      En las aguas de Florida,
      se recolectaron 1.097
      peces globo de 3
      especies diferentes :
      - 873 Southem
      - 171 Checkered
      - 53 Bandtail
Southem puffer fish
Se obtuvieron peses con un peso y longitud promedio de 148 g, y 18 cm,
respectivamente.

 No hubo relación aparente entre el peso y la longitud del pez globo con la
concentración de STX.
Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez
globo del sur(mg STX equiv./100 g de tejido) de
diferentes lugares de la costa de Florida
Checkered puffer fish
 Se obtuvieron peces con un peso y longitud promedio de 157 g, y
 17 cm, respectivamente.


Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez globo
    cuadriculado(mg STX equiv./100 g de tejido) de
        diferentes lugares de la costa de Florida
Bandtail puffer fish
Se obtuvieron peces con un peso y longitud promedio de 157 g, y
17 cm, respectivamente.

Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez
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Toxina en el pez globo

  • 1. Monitoreo de saxitoxina en tres especies de pez globo de Florida Alumna: Natalia Laurens Universidad Nacional de Quilmes
  • 2. INTRODUCCIÓN Se realiza el monitoreo de saxitoxina en especies de pez globo comunes en la costa de Florida debido al descubrimiento de que la misma se almacenada en el músculo de estos peces y produce intoxicación en las personas
  • 3. Saxitoxina La saxitoxina es una neurotoxina estable al calor, es un polipéptido tóxico producida por dinoflagelados: Alexandrium spp., Gymnodinium catenatum, Pyrodinium bahamense En los casos más graves las toxinas bloquean los nervios del cuerpo humano dando lugar a la parálisis. La muerte se produce por asfixia
  • 4. La SXT es una molécula muy grande como para atravesar el canal de sodio, como en su estructura tiene como núcleo una purina esta le permite unirse al canal de sodio mediante un grupo guaridino, bloqueando así el canal de sodio. Organismos como el Pez Globo sufrieron un cambio evolutivo y sus canales de sodio son insensibles a esta toxina
  • 5. Características del pez globo •Hay mas de 120 especies de pez globo en todo el mundo. •Casi todos los peces globo contienen tetrodotoxina, Para los humanos, la tetrodotoxina es mortal, hasta 1.200 veces más venenosa que el cianuro. •Se alimentan de animales invertebrados y algas.Los especímenes más grandes pueden incluso partir cáscaras con su pico duro y comer almejas, mejillones y mariscos. •En algunos lugares su carne es considerada un manjar. •Solo cocineros expertos pueden preparar platos con este pez.
  • 6. Especies monitoreadas Southern puffer Checkered puffer Bandtail puffer
  • 7. Sitios de muestreo y capturas Jacksonville (JX) Apalachicola (AP) Cedar Key (CK) Indian River (IR) Tampa Bay (TB) Tequesa (TQ) Charrlotte Harbor (CH) Florida Keys (FK)
  • 8. Extracción de toxina y análisis  El pez fue pesado y medido en longitud  Se tomaron muestras de piel, músculos, contenido de intestinos, gónadas e hígado  Los tejidos fueron homogeneizados individualmente con HCl 0,1 N en shaker  Calentados en baño de agua en ebullición  Centrifugados a 3000 x g. (10 min)  El sobrenadante fue almacenado a 2oC
  • 9. ¿Qué es un ensayo ELISA?
  • 10. ¿Qué es un ensayo ELISA?
  • 11. Test de Saxitoxina Se colocan los estándares de Saxitoxina o muestras a analizar y el anticuerpo secundario conjugado con la enzima Luego de 1 hora se lava con agua bidestilada o agua MiliQ
  • 12. Test de Saxitoxina Se añade el sustrato y el cromógeno: peróxido de urea y tetrametilbencidina Se realiza la lectura del color a 450 nm. Luego de 1 hora de incubación se detiene la reacción con ácido sulfúrico 1N
  • 13. RESULTADOS En las aguas de Florida, se recolectaron 1.097 peces globo de 3 especies diferentes : - 873 Southem - 171 Checkered - 53 Bandtail
  • 14. Southem puffer fish Se obtuvieron peses con un peso y longitud promedio de 148 g, y 18 cm, respectivamente. No hubo relación aparente entre el peso y la longitud del pez globo con la concentración de STX.
  • 15. Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez globo del sur(mg STX equiv./100 g de tejido) de diferentes lugares de la costa de Florida
  • 16. Checkered puffer fish Se obtuvieron peces con un peso y longitud promedio de 157 g, y 17 cm, respectivamente. Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez globo cuadriculado(mg STX equiv./100 g de tejido) de diferentes lugares de la costa de Florida
  • 17. Bandtail puffer fish Se obtuvieron peces con un peso y longitud promedio de 157 g, y 17 cm, respectivamente. Concentraciones de saxitoxina en los tejidos del pez globo badtail(mg STX equiv./100 g de tejido) de diferentes lugares de la costa de Florida