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INSTITUTO DE BIOLOGÍA
MOLECULAR Y BIOTECNOLOGÍA
TRUJILLO - PERU
REGULACIÓN GÉNICA
EN PROCARIONTES
Introducción
Blgo. José González Cabeza
• Los dos estadios del proceso que lleva del genoma al transcriptoma.
• Ensamblaje corriente
gen, del
proteínas
Proteínas
arriba del
complejo de
(RNAP y
accesorias).
la RNAP
la región de
sintetiza el
• Cuando
abandona
iniciación y
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Expresión del Genoma
Blgo. José González Cabeza
SECUENCIAS REGULADORAS DEL DNA
DURANTE LA TRANSCRIPCIÓN
Blgo. José González Cabeza
RNAP BACTERIANAS SE UNEN EN SECUENCIAS PROMOTORAS
• Constan de 2 segmentos  c/u de 6 nt.
Secuencia -35: 5´- TTGACA – 3´
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• + 1  se encuentra alrededor de 20 a 600 nucleótidos corriente
arriba del comienzo de la región de codificación.
Promotor Procariota
Blgo. José González Cabeza
Promotor Procariota
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Promotores en E. coli.
Resumen
Región -35 Espaciador Región -10 Espaciador Inicio del RNA
TTGACA N17 TTAACT N7 A
TTTACA N16 TATGAT N7 A
TTTACA N17 TATGTT N6 A
TTGATA N16 TATAAT N7 A
CTGACG N18 TACTGT N6 A
TTGACA TATAAT
trp
tRNATyr
lac
recA
araB, A, D
Promotores de E. coli
Blgo. José González Cabeza
ESQUEMA DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
EN PROCARIOTAS
Blgo. José González Cabeza
Diferencias entre Transcripción Procarionte y
Eucarionte
PROCARIONTE: EUCARIONTE:
 RNAm policistrónico.
 Transcripción y Traducción están acoplados.
 Una única RNA Polimerasa
 RNAm monocistrónico.
 Transcripción y procesamiento están acoplados.
 Tres RNA Polimerasas diferentes.
Blgo. José González Cabeza
Regulación de la Expresión Génica
Blgo. José González Cabeza
Operón
 OPERÓN: Es la unidad genética constituida por genes adyacentes que funcionan
coordinadamente bajo el control de un operador, una única proteína represora y un solo
promotor”.
 Unidad transcripcional que contiene:
 Genes Estructurales: Los cuales codifican proteínas que cumplen funciones relacionadas.
 Genes Regulatorios: Genes asociados a la expresión o funcionamiento de un o conjunto de
genes
“Policistronico”
Blgo. José González Cabeza
Regulación Transcripcional en Procariontes
OPERÓN: Genes para enzimas de una vía
metabólica agrupados en una
localización cromosómica.
OPERADOR: Secuencia regulatoria
adyacente, que determina si se transcibe
o no. Proteínas reguladoras que se
asocian al operador para controlar la
transcripción del operón.
“Policistronico”
Blgo. José González Cabeza
Clasificación de los Operones de Acuerdo a su
Regulación
Blgo. José González Cabeza
“Inducción” de un Operón
Inducción: Síntesis aumentada en respuesta a
un metabolito.
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el sistema pero no pueden ser metabolizados
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REPRESIÓN: Síntesis
reducida en respuesta a un
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Metabolismo de la Lactosa (Operón lac)
 Los genes involucrados en el
metabolismo de la glucosa se
expresan de forma constitutiva en E.
coli.
 El metabolismo de los otros azucares
como fuentes energéticas está
regulado, es inducible.
 Lactosa = Disacárido (Glucosa +
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 La lactosa estimula el incremento de
1000 veces la expresión de 3
proteínas.
Blgo. José González Cabeza
Organización del Operón lac de E. coli
Blgo. José González Cabeza
El Operador
El represor es un tetrámero, el
cual se une a la región
operadora generando un loop
en el DNA (“escondiendo”)
impidiendo la unión de la RNA
Polimerasa.
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Operón lac: En un medio de cultivo SIN lactosa
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Operón lac: Regulación Negativa, Inducible
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La regulación es estudiada mediante mutagénesis en
los distintos elementos del Operón
La mutación inducida, impide
que el ribosoma continue
unido al RNAm, por tanto se
reduce la síntesis del resto de
genes.
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Mutación
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Mutaciones en las Regiones Reguladoras
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Antecedentes Genéticos para el modelo del Operón
GENOTIPO
Con
lactosa
Sin
lactosa
I+
O+
Z+
"+" " - "
I-
Oc
Z+
" - " " - "
I-
Oc
Z+
" + " " + "
I+
Oc
Z+
" + " " + "
I-
O+
Z+
/ F´ I+
" + " " - "
I+
Oc
Z+
/ F´ O+
" + " " + "
I+
O+
Z+
/ F´ I-
" + " " - "
I+ O+
Z+
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IS
O+
Z+
" - " " - "
IS
O+
Z+
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" - " " - "
“C” Constitutivo
“S” Superrepresor, significa que la
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… muchas gracias
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TEMA 7 - REGULACION GENICA EN PROCARIONTAS - Dr. GONZALEZ CABEZA (1).pptx

  • 1. IBMB Blgo. Dr. José Guillermo González Cabeza gonzalezbiotec@hotmail.com INSTITUTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR Y BIOTECNOLOGÍA TRUJILLO - PERU REGULACIÓN GÉNICA EN PROCARIONTES
  • 3. • Los dos estadios del proceso que lleva del genoma al transcriptoma. • Ensamblaje corriente gen, del proteínas Proteínas arriba del complejo de (RNAP y accesorias). la RNAP la región de sintetiza el • Cuando abandona iniciación y RNA. Expresión del Genoma Blgo. José González Cabeza
  • 4. SECUENCIAS REGULADORAS DEL DNA DURANTE LA TRANSCRIPCIÓN Blgo. José González Cabeza
  • 5. RNAP BACTERIANAS SE UNEN EN SECUENCIAS PROMOTORAS • Constan de 2 segmentos  c/u de 6 nt. Secuencia -35: 5´- TTGACA – 3´ Secuencia -10: 5´- TATAAT - 3´ • + 1  se encuentra alrededor de 20 a 600 nucleótidos corriente arriba del comienzo de la región de codificación. Promotor Procariota Blgo. José González Cabeza
  • 7. Promotores en E. coli. Resumen Región -35 Espaciador Región -10 Espaciador Inicio del RNA TTGACA N17 TTAACT N7 A TTTACA N16 TATGAT N7 A TTTACA N17 TATGTT N6 A TTGATA N16 TATAAT N7 A CTGACG N18 TACTGT N6 A TTGACA TATAAT trp tRNATyr lac recA araB, A, D Promotores de E. coli Blgo. José González Cabeza
  • 8. ESQUEMA DE LA EXPRESIÓN GÉNICA EN PROCARIOTAS Blgo. José González Cabeza
  • 9. Diferencias entre Transcripción Procarionte y Eucarionte PROCARIONTE: EUCARIONTE:  RNAm policistrónico.  Transcripción y Traducción están acoplados.  Una única RNA Polimerasa  RNAm monocistrónico.  Transcripción y procesamiento están acoplados.  Tres RNA Polimerasas diferentes. Blgo. José González Cabeza
  • 10. Regulación de la Expresión Génica Blgo. José González Cabeza
  • 11. Operón  OPERÓN: Es la unidad genética constituida por genes adyacentes que funcionan coordinadamente bajo el control de un operador, una única proteína represora y un solo promotor”.  Unidad transcripcional que contiene:  Genes Estructurales: Los cuales codifican proteínas que cumplen funciones relacionadas.  Genes Regulatorios: Genes asociados a la expresión o funcionamiento de un o conjunto de genes “Policistronico” Blgo. José González Cabeza
  • 12. Regulación Transcripcional en Procariontes OPERÓN: Genes para enzimas de una vía metabólica agrupados en una localización cromosómica. OPERADOR: Secuencia regulatoria adyacente, que determina si se transcibe o no. Proteínas reguladoras que se asocian al operador para controlar la transcripción del operón. “Policistronico” Blgo. José González Cabeza
  • 13. Clasificación de los Operones de Acuerdo a su Regulación Blgo. José González Cabeza
  • 14. “Inducción” de un Operón Inducción: Síntesis aumentada en respuesta a un metabolito. Inductores Gratuitos: Metabolitos que inducen el sistema pero no pueden ser metabolizados (IPTG). “Sistema Cerrado” “Sistema Abierto” Blgo. José González Cabeza
  • 15. “Represión” de un Operón REPRESIÓN: Síntesis reducida en respuesta a un metabolito. Blgo. José González Cabeza
  • 16. Metabolismo de la Lactosa (Operón lac)  Los genes involucrados en el metabolismo de la glucosa se expresan de forma constitutiva en E. coli.  El metabolismo de los otros azucares como fuentes energéticas está regulado, es inducible.  Lactosa = Disacárido (Glucosa + Galactosa).  La lactosa estimula el incremento de 1000 veces la expresión de 3 proteínas. Blgo. José González Cabeza
  • 17. Organización del Operón lac de E. coli Blgo. José González Cabeza
  • 18. El Operador El represor es un tetrámero, el cual se une a la región operadora generando un loop en el DNA (“escondiendo”) impidiendo la unión de la RNA Polimerasa. Blgo. José González Cabeza
  • 19. Operón lac: En un medio de cultivo SIN lactosa Blgo. José González Cabeza
  • 20. Operón lac: En un medio de cultivo CON lactosa Blgo. José González Cabeza
  • 21. Operón lac: Regulación Negativa, Inducible Blgo. José González Cabeza
  • 22. La regulación es estudiada mediante mutagénesis en los distintos elementos del Operón La mutación inducida, impide que el ribosoma continue unido al RNAm, por tanto se reduce la síntesis del resto de genes. Blgo. José González Cabeza
  • 24. Mutaciones en las Regiones Reguladoras Blgo. José González Cabeza
  • 25. Antecedentes Genéticos para el modelo del Operón GENOTIPO Con lactosa Sin lactosa I+ O+ Z+ "+" " - " I- Oc Z+ " - " " - " I- Oc Z+ " + " " + " I+ Oc Z+ " + " " + " I- O+ Z+ / F´ I+ " + " " - " I+ Oc Z+ / F´ O+ " + " " + " I+ O+ Z+ / F´ I- " + " " - " I+ O+ Z+ / F´ Oc " + " " - " IS O+ Z+ " - " " - " IS O+ Z+ / F´ I+ " - " " - " “C” Constitutivo “S” Superrepresor, significa que la alolactona no se puede unir al represor, por tanto esta molecula seguirá inhibiendo Blgo. José González Cabeza “+” o “-” se refiere a la presencia o ausencia de actividad beta galactosidasa
  • 26. Control Positivo del Operón lac: Activación por Catabolito El operon lac, también sufre una regulación positiva por el CAP Blgo. José González Cabeza
  • 27. Control Positivo del Operón lac: Activación por Catabolito Blgo. José González Cabeza
  • 28. Estado funcional del Operón lac de E. coli wt en medio con baja concentración de glucosa Blgo. José González Cabeza
  • 29. Secuencia del Operón lac de E. coli Blgo. José González Cabeza
  • 30. Operón lac: Control Positivo, con represión - RESUMEN DE Cap-cAMP - Blgo. José González Cabeza
  • 31. Regulación General del Operón lac Blgo. José González Cabeza
  • 32. Operón triptófano (trp) de E. coli “RNA Policistrónico” Blgo. José González Cabeza
  • 33. Operon trp: Control negativo, con represión por producto Blgo. José González Cabeza
  • 34. Organización de la región líder/atenuador del operón trp. Acoplamiento transcripción-traducción en bacterias RNAm Atenuación de la Traducción Región Codificante (con codones para Trp) Blgo. José González Cabeza Tres Regiones:  “Pausa”  “Antiterminación”  “Terminación” Se pueden adoptar diferentes conformaciones del RNA, dependiendo de las condiciones de la células.
  • 35. Modelo de Atenuación: Presencia de trp Blgo. José González Cabeza
  • 36. Modelo de Atenuación: Presencia de trp RNA DNA RIBOSOMA RNA POLIMERASA Blgo. José González Cabeza
  • 37. Modelo de Atenuación: Presencia de trp RNA DNA RIBOSOMA RNA POLIMERASA Blgo. José González Cabeza
  • 38. Modelo de Atenuación: Ausencia de trp Blgo. José González Cabeza
  • 39. Modelo de Atenuación: Presencia de trp Blgo. José González Cabeza
  • 40. Operón trp: Atenuación Blgo. José González Cabeza
  • 41. Operón trp: Antiterminación Blgo. José González Cabeza
  • 42. Operón trp: Atenuación Blgo. José González Cabeza
  • 43. La Atenuación es un Mecanismo Común Blgo. José González Cabeza
  • 44. Cuatro Modelos de Regulación en Procariontes Blgo. José González Cabeza