El documento describe un proyecto de aprendizaje para preparar medios de cultivo y realizar un muestreo microbiológico de ambientes de un laboratorio de biotecnología vegetal utilizando la técnica de sedimentación en placa. El proyecto incluye preparar medios de cultivo, realizar el muestreo antes y después de la desinfección del laboratorio, incubar las placas, y analizar los resultados para determinar la calidad microbiológica de las diferentes áreas del laboratorio.

1. Tipo de Formación: Titulada x Complementaria: <br />Fecha de Sesión: <br />Día 30Mes 07Año 2011<br />Terminación<br />Día 30Mes07Año 2011<br />Inicia <br />Programa de Formación: TECNICO EN PROPAGACION DE MATERIAL VEGETAL<br />FICHA <br />Proyecto de Aprendizaje: _Propagación in-vitro de tres especies de frutales, hortalizas, flores.<br />Instructor: __Liceth Alejandra Cabrejo Cárdenas <br />OBJETIVO SESIONPreparar medios de cultivo necesarios para el recuento de microorganismos en AMBIENTES del laboratorio de Biotecnología VegetalEstablecer los puntos y cronograma de muestreo para determinar la calidad microbiológica de las diferentes áreas del laboratorio de biotecnología vegetal.Realizar el muestreo de ambientes para determinar bioindicadores de contaminación de aire.<br />Fase del ProyectoCompetencia AsociadaFormulaciónSembrar el material vegetal in-vitro de acuerdo con protocolos planteados<br />CONOCIMIENTOS CONCEPTOS – PRINCIPIOS - PROCESOSESTRATEGIAS PEDAGOGICASRECURSOSMedios de cultivoCalidad de aireGrupos indicadoresMesófilos aerobiosHongosTécnica de recuento en placaAuto aprendizaje: Búsqueda y análisis de la información. Tareas individuales.Implementación de técnicasTIC´sRótulosMarcadoresAlcohol antisépticoAlcohol industrialServilletasAgua destilada Cinta de esterilizaciónMedios de cultivo. Plate countAgar PDAAgar EndoEquiposBalanzaPlacas de calentamientoAutoclaveEquipo de destilaciónMaterialesEspátulasBeaker de 500ml (2)Erlenmeyer de 500ml (3)Cajas de petri 60Agitador de vidrio o Agitador magnéticoPita<br /> <br />ACTIVIDAD I PARTE PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO<br />Preparar los siguientes medios:<br />200ml de Agar Plate Count para recuento de bacterias Mesófilas aerobias<br />200ml de Agar PDA para recuento de hongos<br />Tener en cuenta las instrucciones de preparación de la etiqueta. No olviden que para la preparación deben emplear agua destilada.<br />Seguir los siguientes pasos:<br />Prender la Balanza<br />Prender las placas de calentamiento<br />Realizar los calculos dependiendo de la composición del medio de cultivo<br />Alistar los implementos o materiales ( espátula, medios, agua destilada, vidrio reloj)<br />Pesar la cantidad necesaria ( no olvidar tarar)<br />Adiconar el agua destilada al volumen requerido +10 ml )<br />Colocar a ebullición bajo agitación. Estar muy pendientes para evitar derrames.<br />Tapar el medio con papel reiynol o aluminio, papel kraft y una pita<br />Marcar el medio , con la fecha de preparación, nombre del medio, grupo y curso.<br />Colocar cinta de esterilización<br />Llevar al autoclave.<br />Autoclavar a 121ªC x 15 minutos<br />Dejar enfriar a 45ªC o temperatura cachete<br />Servir los medios en cajas de petri esteriles. Si sobra medio, guardar en la nevera.<br />Marcar las cajas: Nombre del medio, fecha, punto de muestreo.<br />Guardar las cajas en nevera. Bocabajo y envueltas en vinipel.<br /> FIRMA DEL INSTRUCTOR: Liceth Alejandra Cabrejo Cárdenas<br />ACTIVIDAD II PARTE . MUESTREO TECNICA DE SEDIMENTACION<br />Realizar limpieza al laboratorio<br />Colocar las cajas de PC, PDA en los puntos de muestreo<br />Quite la tapa cuidadosamente de cada medio de cultivo y expongala el agar durante 15 minutos.<br />Realizar la desinfección al laboratorio ( especificar desinfectante y tiempo de acción) empelar un atomizador para esparcir el desinfectante en las áreas a evaluar<br />Colocar nuevamente las cajas de PC, PDA en los puntos de muestreo<br />Quite la tapa cuidadosamente de cada medio de cultivo y expongala el agar durante 15 minutos<br />Incubar las cajas de PDA a temperatura ambiente. Envolverlas en vinipel, marcarlas con nombre del grupo. Colocarlas encima de la incubadora y bocabajo. Realizar una primera lectura el lunes y la siguiente el miercoles. (sacarlas de la incubadora y colocarlas en la nevera, mientras el sábado realizamos la lectura<br />Incubar las cajas de PC en la incubadora a 35ªC x 48 horas. Hacer lectura el lunes<br />Realizar aislamientos (sábado 6 de Agosto)<br />TALLER<br />Cuáles son los tipos de agentes biológicos que son empleados para evaluar la calidad de aire?<br />Que es un bioaerosol?<br />Cuáles son las diferentes técnicas para realizar muestreos microbiológicos de aire?<br />Que son zonas críticas, semicríticas, y no críticas? Según esta definición como clasificaría las áreas del laboratorio de biotecnología ?<br />Según el lugar de muestreo que le correspondió: establezca un protocolo de limpieza y desinfección para el área asignada<br />Plano Lugar puntos de muestreo con nombre y número.<br />Cronograma<br />Diagrama de flujo procesamiento de la muestra.<br />MEDIO PDA Agar papa dextros<br />Glucosa 10gr/litro<br />Infusión de papa 39g/l<br />Agar agar 15gr/l<br />MEDIO PLATE COUNT (PC) Para Mesofilos aerobios<br />Peptona 7gr/lit<br />Agar agar 15 gr/lit<br />Fosfato di potásico 5gr/lit<br />Compromisos para la siguiente sesión<br />Entregar protocolo preparación de medios y protocolo técnica de muestreo<br />TECNICA: SEDIMENTACION EN PLACA<br />PARA CONTROL DE CALIDAD DE AMBIENTES DE LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA<br />Dibuje el plano de laboratorio y ubique los puntos de muestreo<br />Rotular las cajas según puntos de muestreo, antes y después de desinfección<br />Limpiar laboratorio<br />Exponer las cajas marcadas con antes de desinfectar<br />Desinfectar con tego al 1.5% por 15 minutos<br />Exponer las cajas marcadas con después de desinfectar<br />Exponer las cajas marcadas con después de desinfectar<br />Verifiquen los puntos y las cajas antes y después para que no queden cruzadas las cajas y obtengamos resultados erróneos<br />Incubar cajas PC 35 grados centígrados PDA temperatura ambiente , hacer primera lectura el lunes y luego el sábado. Guardar en nevera el lunes<br /> Lectura de resultados<br />PLANO<br />Tabla de resultados<br />AREA EVALUADAPUNTO EVALUADOBACTERIA UFC/15MINHONGO UFC/15 MINFOTOGRAFIA<br />