medios de cultivos

1.  Tatiana nieto
Cód.: 09172032
bacteriología

2. BUENAS PRACTICAS DE
LABORATORIO!!

3. Un conjunto ddee rreeggllaass,, ddee pprroocceeddiimmiieennttooss
ooppeerraacciioonnaalleess yy pprrááccttiiccaass eessttaabblleecciiddaass yy
pprroommuullggaaddaass ppoorr ddeetteerrmmiinnaaddooss oorrggaanniissmmooss ccoommoo
llaa ((OOrrggaanniizzaattiioonn ffoorr EEccoonnoommiicc CCooooppeerraattiioonn aanndd
DDeevveellooppmmeenntt ((OOCCDDEE)),, FFoooodd aanndd DDrruugg
AAddmmiinniissttrraattiioonn ((FFDDAA)),,eettcc..)),, qquuee ssee ccoonnssiiddeerraann ddee
oobblliiggaaddoo ccuummpplliimmiieennttoo ppaarraa aasseegguurraarr llaa ccaalliiddaadd ee
iinntteeggrriiddaadd ddee llooss ddaattooss pprroodduucciiddooss eenn
ddeetteerrmmiinnaaddooss ttiippooss ddee iinnvveessttiiggaacciioonneess oo eessttuuddiiooss

4.  Verificar correcto lavado de material :
1. Verificación pH (azul de bromotimol 0.04%)
2. Verificación de presencia de residuos inhibitorios
remanentes del detergente.
 Garantizar el control de calidad del agua de
preparación:
1. Control de calidad microbiológico: recuentos <103 UFC/mL.
2. Control de parámetro de conductividad: <25μS/cm.

5.  Rehidratación y disolución:
1. Medios de cultivo comerciales: de acuerdo a las
indicaciones del fabricante.
2. Medios por composición: seguir las indicaciones de la
formulación.
 Medición y ajuste de pH: Antes y/o
después de esterilización NaOH 40g/L, HCl
36.5g/L.

6.  Esterilización: Destrucción o eliminación
completa de toda forma de vida microbiana.
1. Por calor humedo : autoclave 121 + 3ºC, 15 lb, 15
minutos.
2. Por filtración: bajo vacío o condiciones de presurización,
use membranas de 0.2 μm previamente desecadas.
 Adición de Suplementos lábiles:
El medio debe estar a 47-50ºC, y el aditivo deberá
estar a temperatura ambiente.

7.  Dispensar el medio de cultivo:
Volumen dispensado/caja: 20-25mL (3mm)
Volumen dispensado/Tubo: 9mL u otros.
 Control de esterilidad: Incubación
 Rotulado y almacenamiento:
Agar en cajas de petri: refrigrerar maximo por dos semanas
Medios líquidos: monitorear pérdida de volumen/ máximo 3
meses.
NOMBRE MEDIO CULTIVO
FECHA DE PREPARACIÓN
NUMERO DE LOTE

8. TODOS LOS PARÁMETROS EVALUADOS
DEBEN REGISTRARSE EN LOS
FORMATOS DESTINADOS PARA TAL
FIN.
LO QUE NO SE ESCRIBE NO
EXISTE!

10. CONTROL DE CALIDAD
TTééccnniiccaass yy aaccttiivviiddaaddeess qquuee
ssee uussaann ppaarraa ssaattiissffaacceerr llooss
rreeqquuiissiittooss ddee ccaalliiddaadd
CONTROL DE CALIDAD DE
MEDIOS DE CULTIVO
Abarca los procedimientos
desarrollados antes, durante y
despues de la preparación de medios
de cultivo microbiológicos con miras a
satisfacer y garantizar el cumplimiento
de los requerimientos de calidad

11.  CONTROL DE ESTERILIZACIÓN.
 CONTROL DE DETECTORES CON
MICROORGANISMOS DE PRUEBA:

12.  CARACTERÍSTICAS DE LLOOSS MMIICCRROOOORRGGAANNIIMMOOSS
SSEELLEECCCCIIOONNAADDOOSS PPAARRAA CCOONNTTRROOLL DDEE MMEEDDIIOOSS::
MO QUE DEBEN SELECCIONARSE PARA PRUEBAS DE CALIDAD DE
DETECTORES
Cepa de crecimiento robusto (positivo) con características típicas
Cepa débilmente positiva (de naturaleza mas sensible)
Cepas que exhiban características negativas
Cepas con crecimiento parcial o completamente inhibido

13. MEDIO
CEPA DE EVALUACIÓN
FUNCION
MEDIO DE
REFERENCI
A
CONTROL
Deseada No
deseada
Agar Chromocult E. Coli
C. freudii E. faecalis Productivid
ad N.A semicuanti
tativo
Baird-Parker
(coagulasa +)
S. aureus ATCC
6538/25923
Productivi
dad TSA Cuantitati
vo
BHI S. aureus ATCC 25923 Productivi
dad N.A Cualitativo

14. LOS MEDIOS DE CULTIVO DEBEN SER
EVALUADOS EN DOS NIVELES:
 CALIDAD DE LOS NUTRIENTES
 SU CAPACIDAD SELECTIVA

15.  CUANTITATIVO: calculo de un índice a partir de
estimaciones objetivas del crecimiento bacteriano
(recuentos). Siempre debe contarse con un medio de
referencia
 CUALITATIVO: evaluación de los atributos del medio en
prueba, por valoración subjetiva del crecimiento bacteriano
(bueno, malo, regular).
 SEMICUANTITATIVO BASADO EN ECOMETRICO:
determinación de un índice a partir de estimaciones
subjetivas del crecimiento bacteriano (valoración del
crecimiento).

16.  PRODUCTIVIDAD: usado para demostrar la
capacidad del medio para promover el
crecimiento de un MO. Si se trata de
métodos cuantitativos, calcular:
PR : Ns/No Ns=conteo total de colonias obtenido
en el medio de cultivo test (de una o más
placas)
No: conteo total de colonias obtenido
en el medio de cultivo de referencia. Debe ser
ACEPTABLE PR>0.7 <100UFC/mL

17.  SELECTIVIDAD: cuando es necesario
demostrar que un medio suprime el
crecimiento de uno y favorece el de
otro.
SF=DO-DF
DDOO== ddiilluucciióónn mmaass aallttaa aa llaa qquuee ccrreecceenn aall
mmeennooss 1100 UUFFCC eenn eell mmeeddiioo ddee rreeffeerreenncciiaa
DDFF== ddiilluucciioonn mmaass aallttaa aa llaa qquuee ccrreecceenn eenn

19. 0= Corresponde a
ausencia de
crecimiento
1= Corresponde a
crecimiento débil
2= Corresponde a buen
crecimiento.
MO DESEADO:2/INDESEADO:<2