PCR EN TIEMPO REAL<br />GERMAN A. MOLINA MARTINEZ<br />SEBASTIAN A. VALENCIA SANABRIA<br />
Introduccion:				RT-PCR<br />variante de la PCR<br />Uso de sustancia marcada con fluoruro<br />Termociclador equipado par...
fundamento				RT-PCR<br />Realizada en un termociclador<br />Calentar y enfriar muestras(ciclos 25-40)<br />3 etapas<br />
materiales				RT-PCR<br />Molde de DNA<br />Cebadores<br />dNTPs<br />Tampon de reaccion<br />Polimerasa<br />Fluoruro<br ...
Etapas					RT-PCR<br />1 separacion  95°C<br />2 alineamiento  50-60°C<br />3 polimerizacion68-72°C<br />Reduccion de ruid...
clasificacion				RT-PCR<br />PCR- cuantitativa<br />Fluorocromosinespecificos<br />Sondas moleculares<br /><ul><li>Generac...
SYBR green
 (λmax = 488 nm) (λmax = 522 nm)
Bajoencostos
Usa oligonucleotido marcado fluorescentemente
Detecta la aparicion del producto deseado .
Sondas :taqman
             : molecular beacons
             :scorpion</li></li></ul><li>Analisis<br />Q-PCR<br />SYBR-green<br />Permite la identificacion de los product...
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Rt Pcr

  1. 1. PCR EN TIEMPO REAL<br />GERMAN A. MOLINA MARTINEZ<br />SEBASTIAN A. VALENCIA SANABRIA<br />
  2. 2.
  3. 3. Introduccion: RT-PCR<br />variante de la PCR<br />Uso de sustancia marcada con fluoruro<br />Termociclador equipado para captar fluorescencia<br />No utiliza agarosa<br />Mediciondespues de cada ciclo de amplificacion<br />
  4. 4. fundamento RT-PCR<br />Realizada en un termociclador<br />Calentar y enfriar muestras(ciclos 25-40)<br />3 etapas<br />
  5. 5. materiales RT-PCR<br />Molde de DNA<br />Cebadores<br />dNTPs<br />Tampon de reaccion<br />Polimerasa<br />Fluoruro<br />Termociclador<br />
  6. 6. Etapas RT-PCR<br />1 separacion 95°C<br />2 alineamiento 50-60°C<br />3 polimerizacion68-72°C<br />Reduccion de ruido<br />“variedad de parametros”<br />
  7. 7.
  8. 8.
  9. 9.
  10. 10. clasificacion RT-PCR<br />PCR- cuantitativa<br />Fluorocromosinespecificos<br />Sondas moleculares<br /><ul><li>Generacion exponencial de luz
  11. 11. SYBR green
  12. 12. (λmax = 488 nm) (λmax = 522 nm)
  13. 13. Bajoencostos
  14. 14. Usa oligonucleotido marcado fluorescentemente
  15. 15. Detecta la aparicion del producto deseado .
  16. 16. Sondas :taqman
  17. 17. : molecular beacons
  18. 18. :scorpion</li></li></ul><li>Analisis<br />Q-PCR<br />SYBR-green<br />Permite la identificacion de los productos de <br />La amplificacion (ADN)<br />Cuantificacion de la expresiongenica<br />absoluta<br />relativa<br />Curva de calibrado<br />No Curva de calibrado<br />Retrotranscripcion<br />Gen control.<br />
  19. 19.
  20. 20.
  21. 21.
  22. 22. RT-PCR Y CANCER<br />AVANCES TECNOLOGICOS MOLECULARES PERMTEN NUEVA TAXONOMIA<br />
  23. 23. RT-PCR Y CANCER<br />DIVISION CELULAR<br />REPARACION CELULAR<br />APOPTOSIS<br />ANGIOGENESIS<br />
  24. 24. RT-PCR Y CANCER<br />INFECCION VIRAL<br />METILACION DNA<br />ALTERACION DE LA SECUENCIA.<br />
  25. 25. RT-PCR Y CANCER<br />GENETICA DEL TUMOR<br />BIOLOGIA DEL TUMOR<br />CAUSAS DEL TUMOR<br />PRONOSTICO<br />RESISTENCIA<br />TOXICIDAD DE TERAPIA <br />
  26. 26. RT-PCR Y CANCER<br />PROGRAMACION GENETICA DE CADA TUMOR ES UNICA<br />CA MAMA las celulas tumorales se diferencian de linfocitos y cel del estroma<br />
  27. 27. RT-PCR Y CANCER<br />MUTACION P53<br />Características histológicas agresivas<br />Potencial invasión<br />Resistencia a la terapia<br />
  28. 28. SUBTIPOS MOLECULARES<br />CA MAMA<br />LINFOMAS<br />CA PULMON<br />4 CLASES DE CA DUCTAL INVASIVO<br />5 CLASES DE TUMORES DE CEL PEQUEÑAS<br />2 TIPOS DE CEL B<br />

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