Este documento describe 5 formas de conservar células: 1) criopreservación por cámara de congelación, 2) criopreservación por unidad de almacenamiento, 3) criopreservación en reproducción asistida, 4) criopreservación por ovocitos, y 5) criopreservación por vitrificación. Cada método implica congelar las células a bajas temperaturas para preservarlas a largo plazo, pero los métodos difieren en el proceso de congelación y almacenamiento.
1. 5 FORMAS DE CONSERVAR CÉLULAS
1. CRIPRESERVACIÓN POR CÁMARA DE CONGELACIÓN
Como su nombre lo indica es la unidad que permite congelar o "criopreservar" la muestra biológica
por largo tiempo, preservando al mismo tiempo su viabilidad. Un sistema controlado por
computadora controla el grado de congelación del vapor del nitrógeno para evitar el deterioro de
la célula por fenómenos osmóticos o por la cristalización del agua.
2. CRIOPRESERVACIÓN POR UNIDAD DE ALMACENAMIENTO
Es en donde se almacena la muestra después de que esta ha alcanzado la temperatura deseada. Ya
en esta unidad a la muestra se le colocan gradillas adecuadas al volumen y al tipo de muestra.
La criopreservación es útil para las técnicas de reproducción asistida, a las cuales acuden parejas
con problemas de fertilidad. Así se congela el semen del donante, con el fin de realizar varios
intentos de fecundación del óvulo en el momento más adecuado.
3. CRIPRESERVACIÓN EN REPRODUCCIÓN ASISTIDA
Esta criopreservación va a resultar muy interesante a la hora de querer conservar muestras de
pacientes que por ejemplo van a someterse a un tratamiento de quimioterapia. Como vamos a
disponer de millones vamos a necesitar estandarizar el método. De esta forma, vamos a encontrar
cuatro métodos:
Método 1: Alicuotar en pequeños volúmenes (menos de 0,5 ml) con un volumen igual de medio
de congelación y sumergir en nitrógeno líquido.
Método 2: Añadir el crioprotector y mantener 45 minutos a 4ºC previo a sumergir en nitrógeno.
2. Método 3: Incubar a 4ºC y formar gotas sobre un bloque de CO2 sólido.
Método4:Incubar a 4ºC y mantener dos horas en vapores de nitrógeno. De estaforma sesimula
una rampa suave de congelación.
Método 5: Usar un congelador biológico programable.
4. CRIPRESERVACIÓN POR OVACITOS
Los ovocitos, de los elementos implicados en la reproducción asistida, es el material más sensible a
la criopreservación. Este hecho se debe probablemente a que su placa metafásica es muy sensible.
Los ovocitos sobreviven poco y mal a la congelación, siendo la tasa de gestación por ciclo de
descongelación sólo del 10%. La tasa de implantación de los embriones conseguidos a partir de
ovocitos criopreservados será de un 5% aproximadamente. De forma que hacen falta unos 60
ovocitos por gestación. Estos números dan a conocer y ponen de relieve la gran sensibilidad de los
ovocitos a la criopreservación.
5. CRIOPRESERVACIÓN POR VITRIFACCIÓN
La vitrificación es la actual técnica con la que se preserva la fertilidad. A diferencia de la congelación
tradicional, esta técnica permite preservar los óvulos sin mermar su calidad. La vitrificación (o
congelación ultrarápida) ha permitido tasas similares en tratamientos de reproducción asistida con
óvulos frescos y congelados.