DESCRIBIR LA TECNICA DE CONSERVACION DE MICROORGANISMOS POR LIOFILIZACION - AREVALO NAVARRO STEFANI BRILLY.pdf
1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL
TEMA:
DESCRIBIR LA TECNICA DE CONSERVACIÓN DE
MICROORGANISMOS POR LIOFILIZACIÓN
CURSO:
BIOTECNOLOGÍA
INTEGRANTES:
AREVALO NAVARRO, STEFANI BRILLY
DOCENTE:
SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN
CICLO:
VIII
ILO-PERU
2022
2. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
Macassi, A. S., & de Ugaz, O. L. (1995). Liofilización. Revista de Química,9(2),173-183 2 | 3
Antecedentes históricos de la liofilización:
Un proceso rudimentario de liofilización
tuvo su origen en el imperio Inca, alrededor del año
200 a.C., en la zona del altiplano andino a 4.000
msnm, el cual era utilizado para la fabricación del
chuño (papa deshidratada) y charqui (carne de llama
deshidratada); posteriormente, los vikingos
utilizaron este proceso para la conservación de pescado. El proceso de liofilización fue
re-inventado en 1906 por Arsène d’Arsonval y Frédéric Bordas, mientras que en el año
1911 surgen los primeros métodos de liofilización para bacterias, empleando suero y
leche como agentes protectores. La técnica de liofilización se desarrolla en forma
industrial durante la Segunda Guerra Mundial y fue aplicada, fundamentalmente, a la
liofilización de plasma humano y producción de penicilina. La preservación de
microorganismos es una tarea fundamental en una colección de cultivos microbianos.
En ella se debe asegurar que la viabilidad y pureza de los microorganismos sea
mantenida durante décadas. Para cumplir con este objetivo existen varias técnicas de
preservación, siendo la liofilización un método que cumple con los requisitos exigidos
por la Federación Mundial de Colecciones de Cultivo (WFCC).
La técnica de liofilización y su aplicación para preservar microorganismos
La liofilización consiste en la eliminación del agua presente en una sustancia
congelada, a través de la sublimación del hielo; es decir, el agua en estado sólido pasa a
estado gaseoso directamente, sin pasar por estado líquido.
Para lograr la sublimación del agua congelada, la temperatura y la presión parcial del
vapor de agua deben ser inferiores a la del punto triple del agua, es decir menor que
0,0099 °C y menor que 0,006 atm (610,5 Pa) y, cuando la muestra se calienta, el hielo
se sublima directamente a vapor sin pasar por estado líquido El proceso físico de
deshidratación producido en la liofilización puede afectar la estructura de las células,
3. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA
Macassi, A. S., & de Ugaz, O. L. (1995). Liofilización. Revista de Química,9(2),173-183 3 | 3
debido a la formación de cristales de hielo, tanto dentro
como fuera de la célula, disminuyendo su viabilidad. El
uso de sustancias protectoras de la liofilización (o
lioprotectoras) para proteger a las células durante el
proceso de liofilización es ampliamente utilizado en las
colecciones de cultivos microbianos, por lo cual se
recomienda su uso encarecidamente.
El proceso de liofilización tiene varias ventajas por sobre la criopreservación. Por
ejemplo, tiene un bajo costo de mantenimiento debido a que los microorganismos
liofilizados son preservados en viales o ampollas de vidrio, los que a su vez son
almacenados en gavetas, prescindiendo de suministro de energía eléctrica para su
mantención. Estos viales o ampollas de vidrio son de tamaño pequeño, por lo que son de
fácil distribución, siendo el método ideal para el envío de muestras a terceros. Otra
ventaja es que el microorganismo no requiere ser cultivado previo al despacho, a
diferencia de la criopreservación en que el material sí requiere ser cultivado antes de
despacharlo. En cuanto a las desventajas del proceso de liofilización, se puede
mencionar que el equipo tiene un alto costo inicial y requiere personal capacitado para
realizarlo, además de ser un proceso más lento y laborioso que la criopreservación. En
general, la viabilidad de los microorganismos obtenida tras este proceso no es tan alta
como en el caso de la criopreservación, además, hay microorganismos que no toleran el
proceso de liofilización, como es el caso de aquellos pertenecientes a los géneros
Phytophthora sp. y Pythium sp., por lo que es necesario desarrollar nuevos protocolos
para lograr este objetivo.
Equipamiento necesario para la liofilización
• Liofilizador