3. GENERALIDADES
• Medio enriquecido con
complemento VX (NAD, y
hemina) de tal forma que
favorece el crecimiento
de diversos patógenos
fastidiosos como
Haemophilus spp. y
Neisseria spp. aislados de
materiales clínicos nobles
(LCR, aspirados
invasivos) o no (sangre,
secreciones) entre otros.
• Indicado para la
investigación
clínica de
microorganismos
fastidiosos en
muestras de
origen noble y en
muestras de
secreciones.
4. COMPOSICIÓN
• Medio de cultivo
enriquecido.
• Se añade sangre de
carnero o caballo
antes de esterilizar
• Aislamiento de
bacterias exigentes
5. MUESTRA
• a- Tipos de muestras
• - Se pueden utilizar muestras clínicas
como: orina, secreciones y otros fluidos
corporales, materiales biológicos diversos,
muestras o cualquier otra muestra que
pueda contener microorganismos con
capacidad de desarrollarse en este medio.
• b- Precauciones y cuidados especiales
• - Producto destinado al uso diagnóstico in vitro;
• - No usar materiales con la fecha de caducidad expirada o que presenten sello de
calidad roto o alterado.
• - Antes de descartar el material usado, esterilizar en autoclave a 121ºC por 20
minutos.
6. INCUBACIÓN
• Fácil: Se incuban a una temperatura de 35°
a 37°C, durante 18 a 24 horas.
• Difícil: Se incuban a una temperatura de 35°
a 37°C, durante 18 a 24 horas pero con una
atmosfera de 5% de CO2
8. PREPARACI
ÓN
Materiales Necesarios:
•Agar chocolate en polvo o placas preparadas.
•Matraz de vidrio.
•Agitador magnético.
•Autoclave.
•Sangre de cordero o suero de caballo.
•Otros componentes según la receta específica.
Procedimiento de Preparación:
1.Preparación del Agar Base: Mezcla el agar chocolate en
polvo con agua destilada siguiendo las instrucciones del
fabricante.
2.Calienta la mezcla mientras agitas para disolver
completamente el polvo.
3.Lleva la solución a ebullición para esterilizarla.
4.Adición de Componentes Específicos: Una vez
esterilizado el agar base, deja que se enfríe hasta unos
50-55°C.
5.Añade la sangre de cordero o suero de caballo estériles
a la mezcla en la proporción adecuada.
6.Mezcla suavemente para distribuir uniformemente los
componentes.
7.Vertido y Solidificación: Vierte la mezcla en placas de
cultivo estériles o en recipientes adecuados.
8.Deja que el agar se solidifique a temperatura ambiente
o en una campana de flujo laminar.
9.Esterilización Final: Autoclava las placas o recipientes
con el agar chocolate a la temperatura y presión
adecuadas para garantizar la esterilidad del medio.
Una vez completados estos pasos, el agar chocolate
estará listo para ser utilizado en el cultivo de
microorganismos en laboratorios de microbiología.
9. ¿CÓMO
CULTIVA
R?
• Con asa bacteriológica estéril trabajando
siempre a la llama del mechero, tomar una
mínima muestra.
• Sembrar suavemente sobre la superficie
tersa del medio por el procedimiento de
agotamiento.
• Incubar las placas en posición invertida a
37ºC en aerobiosis o atmósfera de 6% de
CO2.
• Al término de 18-24 horas de
incubación examinar el cultivo y
determinar los estudios a seguir según
las características de las colonias.
