Este documento describe los objetivos y desarrollo de una práctica de laboratorio sobre la introducción a la elaboración de medios de cultivo. Explica los tipos de medios de cultivo, el proceso de preparación, y ejemplos como el Agua Peptonada, APC Agar, VRBL, EMB, y Caldo Mac Conkey. El objetivo es aprender las técnicas de preparación siguiendo especificaciones para realizar con éxito la elaboración de cualquier medio de cultivo.

1. UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL
ESTADO DE MEXICO UAEMex
UNIVERSIDAD DE IXTLAHUACA CUI
LICENCIATURA EN QUIMICO FARMACEUTICO BIOLOGO
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA GENERAL
PRACTICA 4: INTRODUCCION A LA ELABORACION DE
MEDIOS DE CULTIVO
ALUMNO: ERIK CONTRERAS LUIS
Q.F.B. SANDRA YECENIA MARTINEZ CARREON
GRUPO: 601 EQUIPO: 4
12MAR16

2. OBJETIVOS:
 Aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo en laboratorio de
microbiología.
 Desarrollar las habilidades necesarias para la correcta preparación de medios, y
conocer sus características tanto físicas así como sus variadas presentaciones y
métodos de preparación de los diversos tipos de medios de cultivo, siguiendo las
especificaciones de los proveedores.
DESARROLLO:
Al comienzo de la sesión en la parte teórica, se repasó con anterioridad las características
y instrucciones generales para la preparación de los diferentes cultivos que se realizaran
en laboratorio.
Esquema general de la preparación de medios de cultivo en tubos de ensaye.

3. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS GENERALES. Son aquellos que permiten el crecimiento de una gran variedad de
microorganismos.
MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO. Son aquellos que favorecen el crecimiento de u
determinado tipo de microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento de los
demás.
MEDIOS SELECTIVOS. Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de
microorganismos determinado, inhibiendo el desarrollo de los demás.
MEDIOS DIFERENCIALES. Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades
que un determinado tipo de microorganismos posee.
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO
En la actualidad, la mayoría de los medios de cultivo se encuentran comercializados;
normalmente bajo la forma de liofilizados a los que es preciso rehidratar. En estos casos la
preparación del medio de cultivo se reduce sencillamente a pesar la cantidad deseada del
mismo y disolverla en agua destilada siguiendo las instrucciones del fabricante. Las
sustancias termolábiles, seesterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes
después de que estos hayan sido previamente esterilizados en el autoclave y enfriados a
temperatura ambiente ó a 40-50ºC si se trata de medios con agar.
Antes de su esterilización los medios líquidos se reparten en los recipientes adecuados
(tubos, matraces, etc.). Si es un medio sólido y se ha de distribuir en tubos ó en matraces
será necesario fundir el agar en baño Maria u horno microondas, una vez fundido y
homogenizado, se distribuye en caliente a los tubos ó matraces (no en placas Petri) se tapa
y se esteriliza en el autoclave.
Una vez finalizada la esterilización los medios se dejaran enfriar a temperatura ambiente y
en el caso de medios sólidos contenidos en tubos deberán, en su caso, inclinarse para que
al solidificarse adopten la formade agar inclinado ó pico de flauta(slant) si tal es su finalidad.
Las placas de Petri se preparan vertiendo el medio fundido y estéril dentro de ellas y en un
ambiente aséptico (por ejemplo en la proximidad de la llama de un mechero Bunsen) es
conveniente homogenizar el medio en el transcurso de la operación para evitar que el agar
sedimente en el fondo del recipiente y no se distribuya por igual en todas las placas.
También es posible conservar el medio destinado a preparar placas Petri solidificado y
estéril en tubos que se fundirán al baño Maria en el momento de la preparación de las
mismas.
Los caldos y medios sólidos pueden conservarse, una vez esterilizados, a temperatura
ambiente pero para reducir su deshidratación y el consiguiente cambio en las
concentraciones de sus componentes es preferible conservarlos a 4ºC.

4. Ejemplos de medios de cultivo:
Agua peptonada: Medio usado como diluyente y para enriquecimiento bacteriano a partir
de alimentos y otros materiales de interés sanitario.
APC Agar plate count: Medio de cultivo recomendado para el recuento de bacterias
aeróbicas en aguas, aguas residuales, productos lácteos y otros alimentos. También es
recomendado como medio general para determinar poblaciones microbianas.
Baird Parker Medio Base: Medio de alta especificidad diagnóstica, selectivo y diferencial
para el aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa positiva en alimentos y otros
materiales de importancia sanitaria.
VRBL Violeta Rojo Bilis Lactosa: Medio selectivo para la investigación presuntiva y
recuento de coliformes en alimentos y productos lácteos. Es importante aclarar que este
medio en particular no debe esterilizarse en autoclave.
EMB (eosina-azul de metileno): Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para
el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas
exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.
YGC (extracto de levadura, glucosa, cloramfenicol): Medio selectivo recomendado para el
recuento genérico de mohos y levaduras.

5. Caldo Mac Conkey: Medio de cultivo selectivo, utilizado para la investigación presuntiva de
microorganismos coliformes en aguas, alimentos y otros materiales de importancia
sanitaria.
Caldo lactosado: Se recomienda como prueba presuntiva para investigar la presencia de
bacterias del grupo coliforme en agua, productos lácteos, etc.
Actualmente también está indicado para el preenriquecimiento no selectivo en
la búsqueda de Salmonella spp. a partir de alimentos.
CONCLUSIÓN
Para una correcta manipulación de reactivos y elaboración de medios es necesario conocer
de forma teórica las generalidades de la preparación de medios de cultivo, asi como sus
riesgos que lo acompañan y sobe los materiales a utilizar, su especificaciones según sean
as condiciones o si estas ya vienen redactadas por el proveedor todo esto con la finalidad
de realizar con éxito la preparación practica de cualquier medio de cultivo.
BIBLIOGRAFIA:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Protocolo2_3_19088.pdf
http://www.ugr.es/~cjl/medios%20de%20cultivo.pdf
http://annymojica.blogspot.mx/2012/02/21-medios-de-cultivo.html
http://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practicoI.pdf