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Estudio bacteriológico de las infecciones por
tuberculosis
1882, Robert Koch describió el agente etiológico y lo
denominó Bacterium tuberculosis.
1896, Lehmann y Neumann. Renombraron la TB por el
de Mycobacterium tuberculosi.
¿QUE CONOCEN ACERCA DE LA TUBERCULOSIS?
TAXONOMIA del bacilo de Koch
Reino: Bacteria
Filo / División: Actinobacteria
Orden: Actinomycetales
Familia: Mycobacteriaceae
Género: Mycobacterium
Especie: Mycobacterium tuberculosi
Importancia del diagnóstico clínico de la TB
El 24 de marzo es el día Mundial de la Tuberculosis,
enfermedad causada por un bacilo de koch; una bacteria que
fue descubierta en 1882 por el Dr. Roberto Koch. La fecha
busca promover el diagnóstico precoz y recuperar a aquellos
pacientes que por diversos motivos hayan abandonado el
tratamiento.
EPIDEMIOLÒGIA DE LA TUBERCULOSIS
Datos clave
Un total de 1,5 millones de personas murieron de
tuberculosis en 2020 (entre ellas 214.000 personas con VIH).
En todo el mundo, la tuberculosis es la decimotercera causa
de muerte y la enfermedad infecciosa más mortífera por
detrás de la COVID-19 (por encima del VIH/Sida).
Bioseguridad
Para las manipulaciones de muestras clínicas
acidorresistentes, se recomiendan las prácticas, el
equipo de contención y las instalaciones del Nivel
de Bioseguridad 2.
Precauciones del trabajo:
Para todas las actividades técnicas del laboratorio
de tuberculosis
En caso de accidentes dentro
de la cámara de bioseguridad
● Se suspende el trabajo dejando el flujo encendido
● Cubrir con una toalla de papel embebida en solución de
fenol al 5% dejando actuar durante 30 min.
● Eliminar el material contaminado en un recipiente o
bolsa autoclavable
● Hacer cambio de guantes y de los otros elementos de
protección personal solo si es necesario.
● Desinfectar el área contaminada (superficie y paredes
del gabinete)
● Retirar el personal del área del accidente
● Colocarse mascarillas N95 ò N100 si no están siendo
utilizadas.
● Rociar el área derramada con fenol al 5%, cubrir con
papel y rociar nuevamente con fenol al 5%
● Retirarse del área y dejar actuar el desinfectante durante
30 min.
● Recoger con guantes y pinza el material roto y colocarlo
dentro de un recipiente autoclavable conteniendo fenol al
5%
● Volver a desinfectar la superficie afectada con fenol al 5%
● Ventilar el laboratorio antes de retomar las tareas
● Registrar cada accidente con detalle: la fecha, nombre de
la persona involucradas y # que identifica las muestras.
En caso de accidentes dentro del
laboratorio
Muestras Obtención y procesamiento
Cada paciente con sospecha de tuberculosis debe
recoger 3 muestras de esputo de entre 3-5 ml cada
uno.. Las muestras se obtendrán de la siguiente
manera:
1ª MUESTRA: Se tomará cuando el paciente acuda al
puesto de Salud con sospecha de enfermedad
tuberculosa.
2ª MUESTRA: La tomará el paciente al día siguiente
en su domicilio, nada más despertar y en ayunas,
enjugándose previamente la boca.
3ª MUESTRA: Se tomará al entregar la segunda en el
Puesto de Salud.
Esputo
¿Cómo debe recogerse la muestra?
● El esputo debe depositarse en un envase con las siguientes
características:
● Boca ancha (no menos de 5 cm de diámetro) para una
adecuada recolección y posterior procesamiento de la
muestra.
● Capacidad entre 30-50 ml.
● Cierre hermético, con tapa de rosca (evitará el
derramamiento y la producción de aerosoles).
● Material plástico, desechable, resistente a roturas y
transparente o semitransparente, para poder observar las
características y calidad de la muestra sin necesidad de abrir
el bote.
● El envase debe etiquetarse o rotularse con los datos del
paciente.
● El etiquetado o rotulado debe hacerse siempre en la pared
del bote, nunca en la tapa del mismo.
Toma de la muestra
1. Dar al paciente el bote rotulado o etiquetado con sus datos.
2. Indicar al paciente que se enjuague la boca antes de emitir la muestra.
3. Explicar al paciente que es necesario obtener una muestra del tracto
respiratorio inferior y que no es válida la saliva.
4. Para ello habrá que indicar al paciente que inspire profundamente,
retenga el aire por un instante breve y posteriormente elimine las
secreciones con un golpe intenso de tos.
5. Una vez obtenida la primera muestra, se facilitará al paciente un nuevo
envase etiquetado o rotulado con sus datos, para que recoja la segunda
muestra a la mañana siguiente en su domicilio y la entregue con la
mayor rapidez posible en el puesto de Salud.
6. Lo ideal es que las muestras, una vez obtenidas, se procesen de forma
inmediata y que no pasen más de dos horas desde su obtención hasta
la llegada al puesto de Salud.
7. Posteriormente las muestras se introducirán en una caja de plástico que
se colocará en un lugar fresco, seco y protegido de la luz.
Procesamiento de la
muestra
Reactivos para la tinción: Agua, Fucsina
Fenicada, Alcohol Clorhídrico al 3% y Azul
de Metileno.
Baciloscopia
La técnica se basa en la ácido alcohol resistencia, que es la
propiedad que tienen las micobacterias de unir en su pared
de fucsina fenicada así retenerlas frente a la acción de
decolorantes como la mezcla de ácido y alcohol.
Esta propiedad no específica del bacilo de la tuberculosis,
sino que la tienen los bacilos del género mycobacterium
Preparacion y fijacion
del extendido
Lectura de la Baciloscopia
•Usar el objetivo 10x enfocar el extendido evitando la zona donde se
depositó el aceite de inmersión
•Cuidadosamente cambiar al objetivo de 100x y mover hasta ubicar la
zona del porta objeto en la que deposito el aceite de inmersión y
ajustar el enfoque fino hasta que las células se vean nítidos
•Observar la calidad del extendido y de la coloración. Si no fuesen
buenas repetir la baciloscopia de esa muestra
•Contar el número de campos leídos y el número de BAAR que ha
identificado.
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bacteriologia.pptx

  • 1. Estudio bacteriológico de las infecciones por tuberculosis
  • 2. 1882, Robert Koch describió el agente etiológico y lo denominó Bacterium tuberculosis. 1896, Lehmann y Neumann. Renombraron la TB por el de Mycobacterium tuberculosi. ¿QUE CONOCEN ACERCA DE LA TUBERCULOSIS?
  • 3. TAXONOMIA del bacilo de Koch Reino: Bacteria Filo / División: Actinobacteria Orden: Actinomycetales Familia: Mycobacteriaceae Género: Mycobacterium Especie: Mycobacterium tuberculosi
  • 4. Importancia del diagnóstico clínico de la TB El 24 de marzo es el día Mundial de la Tuberculosis, enfermedad causada por un bacilo de koch; una bacteria que fue descubierta en 1882 por el Dr. Roberto Koch. La fecha busca promover el diagnóstico precoz y recuperar a aquellos pacientes que por diversos motivos hayan abandonado el tratamiento.
  • 5. EPIDEMIOLÒGIA DE LA TUBERCULOSIS Datos clave Un total de 1,5 millones de personas murieron de tuberculosis en 2020 (entre ellas 214.000 personas con VIH). En todo el mundo, la tuberculosis es la decimotercera causa de muerte y la enfermedad infecciosa más mortífera por detrás de la COVID-19 (por encima del VIH/Sida).
  • 6. Bioseguridad Para las manipulaciones de muestras clínicas acidorresistentes, se recomiendan las prácticas, el equipo de contención y las instalaciones del Nivel de Bioseguridad 2. Precauciones del trabajo: Para todas las actividades técnicas del laboratorio de tuberculosis
  • 7. En caso de accidentes dentro de la cámara de bioseguridad ● Se suspende el trabajo dejando el flujo encendido ● Cubrir con una toalla de papel embebida en solución de fenol al 5% dejando actuar durante 30 min. ● Eliminar el material contaminado en un recipiente o bolsa autoclavable ● Hacer cambio de guantes y de los otros elementos de protección personal solo si es necesario. ● Desinfectar el área contaminada (superficie y paredes del gabinete) ● Retirar el personal del área del accidente ● Colocarse mascarillas N95 ò N100 si no están siendo utilizadas. ● Rociar el área derramada con fenol al 5%, cubrir con papel y rociar nuevamente con fenol al 5% ● Retirarse del área y dejar actuar el desinfectante durante 30 min. ● Recoger con guantes y pinza el material roto y colocarlo dentro de un recipiente autoclavable conteniendo fenol al 5% ● Volver a desinfectar la superficie afectada con fenol al 5% ● Ventilar el laboratorio antes de retomar las tareas ● Registrar cada accidente con detalle: la fecha, nombre de la persona involucradas y # que identifica las muestras. En caso de accidentes dentro del laboratorio
  • 8. Muestras Obtención y procesamiento Cada paciente con sospecha de tuberculosis debe recoger 3 muestras de esputo de entre 3-5 ml cada uno.. Las muestras se obtendrán de la siguiente manera: 1ª MUESTRA: Se tomará cuando el paciente acuda al puesto de Salud con sospecha de enfermedad tuberculosa. 2ª MUESTRA: La tomará el paciente al día siguiente en su domicilio, nada más despertar y en ayunas, enjugándose previamente la boca. 3ª MUESTRA: Se tomará al entregar la segunda en el Puesto de Salud. Esputo
  • 9. ¿Cómo debe recogerse la muestra? ● El esputo debe depositarse en un envase con las siguientes características: ● Boca ancha (no menos de 5 cm de diámetro) para una adecuada recolección y posterior procesamiento de la muestra. ● Capacidad entre 30-50 ml. ● Cierre hermético, con tapa de rosca (evitará el derramamiento y la producción de aerosoles). ● Material plástico, desechable, resistente a roturas y transparente o semitransparente, para poder observar las características y calidad de la muestra sin necesidad de abrir el bote. ● El envase debe etiquetarse o rotularse con los datos del paciente. ● El etiquetado o rotulado debe hacerse siempre en la pared del bote, nunca en la tapa del mismo.
  • 10. Toma de la muestra 1. Dar al paciente el bote rotulado o etiquetado con sus datos. 2. Indicar al paciente que se enjuague la boca antes de emitir la muestra. 3. Explicar al paciente que es necesario obtener una muestra del tracto respiratorio inferior y que no es válida la saliva. 4. Para ello habrá que indicar al paciente que inspire profundamente, retenga el aire por un instante breve y posteriormente elimine las secreciones con un golpe intenso de tos. 5. Una vez obtenida la primera muestra, se facilitará al paciente un nuevo envase etiquetado o rotulado con sus datos, para que recoja la segunda muestra a la mañana siguiente en su domicilio y la entregue con la mayor rapidez posible en el puesto de Salud. 6. Lo ideal es que las muestras, una vez obtenidas, se procesen de forma inmediata y que no pasen más de dos horas desde su obtención hasta la llegada al puesto de Salud. 7. Posteriormente las muestras se introducirán en una caja de plástico que se colocará en un lugar fresco, seco y protegido de la luz. Procesamiento de la muestra Reactivos para la tinción: Agua, Fucsina Fenicada, Alcohol Clorhídrico al 3% y Azul de Metileno.
  • 11. Baciloscopia La técnica se basa en la ácido alcohol resistencia, que es la propiedad que tienen las micobacterias de unir en su pared de fucsina fenicada así retenerlas frente a la acción de decolorantes como la mezcla de ácido y alcohol. Esta propiedad no específica del bacilo de la tuberculosis, sino que la tienen los bacilos del género mycobacterium Preparacion y fijacion del extendido
  • 12. Lectura de la Baciloscopia •Usar el objetivo 10x enfocar el extendido evitando la zona donde se depositó el aceite de inmersión •Cuidadosamente cambiar al objetivo de 100x y mover hasta ubicar la zona del porta objeto en la que deposito el aceite de inmersión y ajustar el enfoque fino hasta que las células se vean nítidos •Observar la calidad del extendido y de la coloración. Si no fuesen buenas repetir la baciloscopia de esa muestra •Contar el número de campos leídos y el número de BAAR que ha identificado. Interpretación de resultados