Microscopio clasificación

CLASIFICACIÓN DEL MICROSCOPIO
Actualmente existe una gran diversidad de equipos, los requisitos que se plantean a los
microscopios de investigación evolucionan vertiginosamente en el campo de la microscopia.
Todos los elementos de los microscopios son de acceso y manejo fácil. Los tubos binoculares
complementan el tipo de construcción ergonómicamente ventajosa del microscopio, gracias a
la altura regulable y separación interpupilar de los oculares, al ángulo de observación
individualmente graduable al campo visual para un trabajo eficiente y libre de cansancio.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
 Existen microscopios monoculares, microscopios binoculares, microscopios estereoscópicos,
microscopios con sistema invertido, (metalográfico), microscopios con sistema de captura
digital de imágenes, microscopios para cirugía.
 Es necesario preparar las muestras debidamente antes de poder estudiarlas, el objeto tiene
que ser muy delgado para que este suficientemente transparente y así permita el paso de
luz, de lo contrario la observación del objeto no será la correcta.
 En otros análisis algunos objetos no son suficientemente transparentes y en tal caso
solamente se podrá estudiar su superficie, y esto se logrará con un microscopio
estereoscópico.

 Las preparaciones secas tienen posibilidad muy limitada para sus estudios, generalmente
se estudia con aumentos bajos iluminándolos desde arriba, es decir como objetos opacos,
de nuevo se recomienda los microscopios estereoscópicos.
 Preparaciones temporales, revelan mas detalle si se montan en una gota de agua y se
cubre con un cubre objetos, el cubre objetos es necesario para que el agua no toque la
lente frontal del objetivo, y también para que se tenga una superficie plana y así entrará la
luz al objetivo, aquí empieza a tenerse mucho cuidado en nuestra óptica ya que podemos
humedecer las lentes de los objetivos y deberemos de estar secando con un cotonete la
parte de contacto de nuestro objetivo.
 Preparaciones permanentes, se monta el objeto en un material transparente sobre la
lamina porta objetos y después se cubrirá con otra lamina más delgada de vidrio cubre
objetos. Esto requiere que la preparación sea deshidratada por medio de alcohol o alguna
otra substancia química.
 La microscopia metalúrgica difiere tanto de la convencional que ha sido necesario la
construcción de un microscopio especial para esta clase de trabajo.
 En el caso del microscopio estereoscopio esta diseñado fundamentalmente para darnos la
tercera dimensión de un objeto, es decir para que se pueda observar su profundidad.

MARCAS DISPONIBLES EN EL MERCADO
habrá que tomar en cuenta algunos aspectos muy importantes en la adquisición de un
equipo microscópico, como el servicio postventa y la garantía que deberá brindar el
proveedor, sea accesible y atienda las necesidades inmediatas del cliente. En las pruebas
sobre todo ópticas, no es posible engañar la calidad de las imágenes, por la parte de
iluminación también es muy importante conocer que tipo de iluminación que se tiene y
por último y no menos importante la mecánica que debe de ser suave, rígida y segura en
cada uno de los movimientos.
El proveedor de microscopios deberá saber cual será la aplicación del equipo y así
ofrecer el producto adecuado a su cliente, en caso de ser de enseñanza, de laboratorio
de investigación, quirúrgico entre otros.
Es muy importante verificar la capacidad del soporte técnico de la casa vendedora, para
el posible crecimiento del microscopio, ya que ahora existen estas ventajas de ir
adaptando los equipos y complementándolos de acuerdo a las necesidades.
A continuación se mencionan algunas marcas reconocidas por años en el mercado
nacional de microscopios, las cuales cuentan con un gran respaldo en la fabricación de
los mismos: Carl Zeiss de México, Olimpus, American Óptica, Rossbach de México. Motic
y Leica. Se tendrá que verificar si el proveedor cuenta con accesorios y asistencia técnica
inmediata.

VENTAJAS Y DESVENTAJAS
Cuando se adquiere un microscopio es muy importante conocer lo que nos ofrece el
proveedor de microscopios y las ventajas del equipo, ya que esto será un beneficio en las
largas jornadas de trabajo.
Es muy común escuchar que la iluminación es flexible según Kohler, que se cuentan con
objetivos ICS, que algunos objetivos son compatibles con otros microscopios, otros nos
dicen que son totalmente automatizados para algunas aplicaciones, objetivos
apocromaticos y de campo plano, cosas que de verdad son posibles solo que algunos las
dicen en sus manuales pero no las cumplen, y esto es algo que sobre todo en cuestiones
de la óptica si es difícil de probar que el equipo lo este cumpliendo.
No es necesaria la experticia en la clasificación de la óptica, más sin embargo será de
mucha utilidad identificar con facilidad algunos problemas sencillos de los oculares,
objetivos condensadores, desviaciones de los prismas, que nos ayudarán a tener en
buenas condiciones nuestro equipo de trabajo.
Se identificará la causa del problema al observar algo de color en los bordes de las
imágenes que se analizan, o al no enfocar bien con un ocular y con el otro si, o en ambos
oculares a la vez; ya que está problemática suele suceder frecuentemente en los equipos.

EL MICROSCOPIO EN LAACTUALIDAD
LAS PARTES DEL MICROSCOPIO
El microscopio ha venido evolucionando día a día en sus
avances ópticos electrónicos y mecánicos. Hoy en día con la
aparición de nuevos modelos en el mercado, en algunos casos
resulta difícil para el usuario decidirse a dar un mantenimiento
preventivo al equipo, ya que la falta de conocimiento
adecuado de las partes del microscopio pronuncian el abismo
entre las generaciones de microscopios.
El conocimiento de la estructura fundamental de un
microscopio y las partes que lo componen así como su función,
ayudarán al usuario en su interrelación con el equipo
microscópico para tomar las decisiones adecuadas sobre los
cuidados necesarios del mismo.

PARTES DE UN MICROSC0PIO
UN MICROSCOPIO SE CONFORMAPOR LAS PARTES
QUE SE OBSERV
AN EN LASIGUIENTE FIGURA.

PRUEBAS EN USO
Óptica ICS
La óptica ICS (Infinity Color-corrected System) quiere decir: Imágenes luminosas, con corrección cromática y
contrastes fuertes. Por esta razón, los objetivos ICS forman una parte muy importante en el microscopio para
el trabajo diario de laboratorio.
Revolver portaobjetivos
El revolver portaobjetivos debe garantizar la visión libre y clara de las muestras de observación así como
una marcha suave y se enclave con precisión con cada uno de los objetivos.
Procedimientos de valoración
Procedimientos para valorar objetivos plan acromático 4 ò 5X, 10X, 40X y 100X. Los objetivos
plano acromáticos serán sometidos a la prueba de la “Estrella” para observar.
a) Campo plano
1.- Tomar un substrato con pin-holes.
Este substrato puede ser fabricado depositando polvo o mejor pequeñas micro esferitas en un porta objeto
y luego aluminisarse en una campana de vacío, o utilizar polvo blanco como objetos corpusculares en el
porta objeto. El tamaño de estas micro estructuras deben de ser tal que no puedan ser resueltas por
cuestiones de difracción por el objetivo a evaluar de un microscopio.
2.- Enfocar los pin-holes con el objetivo de evaluar y seleccionar de estos los que presenten un patrón de
difracción más cercano al de un disco de Airy y por lo tanto que el objetivo no pueda resolver su estructura.
Es necesario comprobar que los pin-holes seleccionados sean lo mas circulares posibles por lo que es
necesario verlos con un instrumento que garantice que lo son. (Puede ser utilizando otro microscopio que
se este seguro de su calidad de imagen).
3.- Realizar una observación de todo el campo visual.
4.- La presencia de un campo plano estará dada por un enfoque uniforme y obtención de nitidez total en
todo el campo visual, sin necesidad de hacer continuos ajustes con el mando micrométrico.
5.- Para que presente campo plano los pin-holes de las orillas y del centro deben de estar ambos
enfocados.

PRUEBAS EN USO
b) Acromatismo (corrección de color, ausencia de color en las imágenes del microscopio)
1.- Utilizar el mismo substrato con pin-holes e la prueba de campo plano.
2.- Colocar sobre la platina el substrato.
3.- Seleccionar y enfocar en eje y fuera de eje un pin-hole con patrón de disco de airy.
4.- Observar si en eje existe aberración cromática al estar enfocado y al desenfocar ligeramente dentro y
fuera de foco el patrón de airy.
5.- Enfocar fuera de eje un pin-hole.
6.- Observar si en eje existe aberración cromática al estar enfocado y al desenfocar ligeramente dentro
y fuera de foco el patrón de airy.
7.- Si se genera una descomposición de haz de luz blanca mostrando una serie de halos de colores,
se estará produciendo el fenómeno de aberración cromática.
Esta prueba se realiza sin colocar filtro adicional alguno al microscopio, es decir con luz blanca.
Por lo tanto, esta prueba recibe el nombre de prueba de la estrella, ya que el campo oscuro obtenido
en el campo de observación, así como los puntos de luz observados semeja la bóveda celeste. 3.-Realizar
una observación de todo el campo visual.
La prueba de la estrella es particularmente utilizada para lentes de objetivos de microscopios y lentes
de telescopios.

c) Aberraciones (imágenes distorsionadas o borrosas).
1.- Tomar el substrato con pin-holes de las pruebas anteriores.
2.- Enfocar en eje un pin-hole para observar su patrón de airy.
3.- En ausencia de aberraciones geométricas de primer orden el patrón de airy no debe
ser sustancialmente distorsionado. Por lo que se debe mostrar simetría y uniformidad en sus
discos de airy.
4.- Desenfocar ligeramente el patrón de airy. dentro y fuera de foco.
5.- En ausencia de aberraciones el patrón se desenfocara simétricamente en más de un sentido
que en otro. En caso de que exista distorsión, esta presenta algún tipo de aberración
geométrica.
6.- Repetir paso 2, 3 y 4 para pin-holes fuera de eje.
7.- Observar la distorsión del patrón de airy. enfocado y desenfocado dentro y fuera de eje,
para detectar presencia de aberraciones geométricas.
Nota: Es conveniente utilizar filtros de luz en esta prueba, en caso de que existan
aberraciones cromáticas, con el fin de evaluar las aberraciones geométricas, para una longitud
de onda.
8.- Estas pruebas son cualitativas, más no subjetivas. La prueba de la estrella es adecuada
para determinar si existe o no aberraciones en un sistema óptico.
PRUEBAS EN USO

CARACTERIZACIÓN DE UN MICROSCOPIO
Oculares
Su función es magnificar más el aumento del objetivo, y colocar las imágenes
que ha formado el juego óptico en un punto focalde poco más o menos tres o
cuatro milímetros del lente superior del ocular.
Existen varios tipos de oculares, los Huygens, los Ramsden los de punto focal
largo, los de campo ancho (especiales para patología).
El microscopio compuesto forma una imagen real amplificada del objeto por
medio de una lente llamada objetivo y luego se observa esta imagen por
medio de una lupa a la que se le llama ocular.
La imagen se observa invertida debido a la inversión del objetivo. Como la
pupila del ojo tiene un diámetro pequeño, es necesario colocarla sobre el
plano en que todos los rayos cruzan el área circular mínima, a fin de que todos
los rayos penetren en el. Esta área es una imagen real de la abertura del
objetivo, y se domina pupila de salida.
Este sistema tiene dos desventajas: la pupila de salida esta muy alejada del
ocular, y el ocular debe tener un diámetro mayor que el de la imagen real.
Se pueden evitar mediante el uso de una lente convergente sobre el plano de
la imagen, a la que llaman lente de campo. Esta lente dobla el haz
acercándolo al eje óptico sin cambiar la imagen, conservando así la misma
amplificación el microscopio. Al conjunto formado por el ocular y la lente de
campo se le llama en forma general simplemente ocular.

Objetivos
La amplificación de un microscopio se obtiene multiplicando la ampliación del objetivo por la
amplificación del ocular.
Existen cuatro tipos de objetivos, según su poder amplificador. Para bajas amplificaciones el diseño
es un doblete simple o un par de dobletes formando el sistema de Lister, para amplificaciones
intermedias se añade al frente del doblete una lente plano-convexa gruesa a fin de disminuir la
distancia focal del objetivo. En esta forma se obtiene el diseño
de amici.
Para altas amplificaciones es necesario disminuir aun mas la distancia focal del objetivo sin
introducir aberraciones. Esto se logra añadiendo al frente del objetivo un sistema de dos lentes al
que sé acostumbra llamar dúplex frontal; se obtiene así, el llamado objetivo sumergible o de
inmersión.
El dúplex frontal del objetivo sumergible, hace uso de las propiedades de los puntos aplanaticos
de Abbe.

Sistema de Iluminación
El sistema de iluminación básico de un microscopio consta de un lente
condensadora que forma una imagen del filamento de la fuente
luminosa sobre el diafragma de abertura. Esta imagen se vuelve a
formar sobre la pupila de entrada del objetivo del microscopio por
medio de la lente condensadora.
El diafragma de la abertura efectiva del objetivo y la lente condensadora
forman también una imagen del diafragma de campo sobre el objeto.
Este diafragma controla el diámetro del área iluminada del objeto a
observar.
Selección de equipo
Para una correcta selección de equipo, que satisfaga las necesidades de
las observaciones a realizar es recomendable tomar en cuenta los
siguientes incisos:
a) De las partes más delicadas es la adquisición de equipos de
microscopia que actualmente se tienen que licitar por ley en algunas
instituciones y dependencias gubernamentales sobre todo si es una
compra de más de 10 equipos, es importante saber y conocer los
diferentes modelos que se ofrecen en el mercado pero no son siempre los
mas adecuados por ejemplo, para que se ocuparan, ya que el usuario o
comprador decidirá cual de los equipos es el mejor o mas adecuado para
lo que se usara. Si es de laboratorio o de experimentación o de cirugía o
quizás simplemente de educación o enseñanza.

b)Por seguridad de los equipos algunos fabricantes adaptan en los
oculares, objetivos, lentes condensadoras y filtros de color algunos
sistemas de seguridad los cuales son pequeños tornillos que no permiten
sacar al ocular o al objetivo, y esto es seguridad tanto de limpieza como
para evitar extravíos de alguna parte del microscopio ya que el extravío de
cualquier parte del mismo es costoso para cualquier persona o
institución.
c)En la selección de equipos ya se tienen algunas bases que las mismas
instituciones han desarrollado para estar lo mas seguros de tener lo que
se necesita para un buen trabajo ya sea de educación enseñanza o
investigación y desarrollo científico estas bases son simples y por
supuesto no es mas que involucrar a los interesados en este trabajo y
ponerse a escribir para así llegar a un común acuerdo de lo que se
necesita y asía adonde se quiere llegar. Para que cuando hagan la
invitación a los proveedores de microscopios ellos sepan que es lo que
esperamos de los equipos por ofertar y por supuesto la calidad de los
elementos que lo compones será un factor importante para una final y
acertada decisión.

MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO
MANTENIMIENTO PREVENTIVO
El microscopio es un instrumento de precisión construido de valiosos y delicados materiales, con
un buen mantenimiento y cuidado tal instrumento durara muchos años, pero solo bastara un
descuido en la perdida
de cualquiera de sus elementos puede arruinarlo y dejarlo inservible, si vamos a mover
constantemente
nuestro equipo es conveniente tomarlo de las partes que nos indica el proveedor generalmente
es del brazo o cuello del microscopio, estando frío por supuesto esto evitara que se fundan los
focos de iluminación, el lugar de almacén del deberá ser lo mas limpio del polvo, humedad, o
exceso de calor en anaqueles estables y fijos.
Al iniciar el mantenimiento de un microscopio es muy importante tener las herramientas y los
materiales adecuados, como soluciones líquidas preparadas para la limpieza; y por supuesto una
área destinada para el mantenimiento.
Las herramientas y materiales necesarios son:
1. Se requiere jeringa pera del # 5 o aire comprimido
2. Despachador con 60% de acetona y 40% de éter
3. Algodón y palillos para cotonetes
4. Desarmador de cruz o estrella
5. Desarmador plano
6. Juego de llaves allen
7. Thinner
8. Estopa
9. Silicón líquido

Cuando no se tiene la práctica es importante seguir las siguientes
indicaciones:
a) Se comienza removiendo los oculares ya que son los que generalmente siempre
están más sucios, es necesario iniciar una buena limpieza empezando con aire, ya
sea con la jeringa pera o aire comprimido y luego con un cotonete humedecido
de la solución de 60% de acetona y 40% de éter en un despachador de solventes
para que este no se evapore, sé dará una pasada sobre la lente ocular y en un
sentido tratando de pasar por toda la lente se tira el cotonete y se toma otro y se
realiza la misma operación viendo que quede limpia la superficie, cuando la grasa
y polvo adherido desaparecen. Se inspeccionara la parte posterior del ocular,
siempre sin desarmar ya que el ensamble de los oculares de fábrica vienen libres
de impurezas internas y es Imposible que se penetre el polvo a menos que lo
dejemos en lugares húmedos por lo pronto NO se deberá abrir nunca un
componente óptico que sabemos que esta sellado ya que se puede perder la
alineación óptica de nuestras lentes.
b) Se revisará que el cabezal del microscopio gire los 360° alrededor del cuerpo y
ver que tenga un ajuste de giro. Revisando el tornillo opresor que sé vera en el
cuello de giro.
c) Los objetivos también sé removerán de su lugar, estos cuentan con un sistema
de rosca en el revolver del microscopio y se destornillaran cada uno de ellos para
poder limpiar las caras de mayor contacto con las muestras de análisis de trabajo;
se hará la misma aplicación que con el ocular limpiando con cotonetes y aire a
presión por la parte posterior del objetivo, NO se deberán violar, sacar, sumergir
en soluciones de limpieza a los objetivos, ya que estas prácticas dañaran
permanentemente al objetivo, en la parte posterior se inyectará el aire a presión
para su limpieza, la cual será suficiente.

d) La platina del microscopio es un lugar en donde se escurren diferentes materiales
y es la parte que soporta las muestras de análisis; esta cuenta con una regleta de
desplazamiento y pinzas de sujeción de el portaobjetos; en la mayoría de los
microscopios la regleta y la pinza se pueden remover de la platina para lograr una
mejor limpieza y un engrasado a las cremalleras de desplazamiento X, Y.
La platina al igual que la regleta se limpiarán con solvente thinner, para remover
cualquier sedimento de análisis, pero teniendo cuidado de no tocar otra parte
del cuerpo del microscopio con el thinner, ya que está sustancia puede resultar
muy agresiva para otras partes.
Un buen espacio acondicionado para el mantenimiento será lo más adecuado
para ir poniendo con orden cada pieza que se retira y limpia del microscopio.
e) El condensador y del diafragma son partes muy delicadas, subiendo el
condensador hasta la parte mas alta o sea cerca de la platina, se afloja el tornillo
opresor que sé encuentra a un costado del diafragma y con las dos manos
sujetamos el condensador que generalmente esta integrado el diafragma, con la
precaución de no lastimar la óptica de amplificación o difusión de la fuente de
iluminación que esta en la base del microscopio, ya afuera se limpiará primero la
base o soporte de la óptica del condensador la cual generalmente tendrá
muchos residuos ya secos de viejas muestras y quizás pequeñas astillas de vidrio,
ya que con frecuencia los portaobjetos se fracturan y en este lugar se depositan
pequeños fragmentos de vidrio, con loas cuales habrá de tenerse cuidado. Se
puede usar thiner para Limpiar la parte mecánica de desplazamiento del
condensador y en donde se hayan depositado residuos de gilol o de muestra de
análisis. Pasando a la aplicará como en las anteriores (ocular y objetivo) el
mismo procedimiento de aire, cotonete y la solución de acetona con éter tanto
en la lente superior como en la interior. NO se deberá desarmar el condensador
y diafragma, ya que no es necesario, solo en caso de que el diafragma presente
daño.

f) Finalmente en la parte inferior del microscopio, se observa la lente difusora de luz, la
cual es convexa, se le aplicará primero aire comprimido y luego la solución de limpieza
de acetona con éter por la parte superior, si lente esta muy polvosa o sucia por dentro
será necesario remover la tapa de la base del microscopio. Algunos microscopios tienen
un diafragma el cual se opera desde afuera o desde la base de los microscopio, esta
tapa se remueve solo que sea necesario tanto por la limpieza óptica como para el
cambio de foco o algún desperfecto electrónico, que pudieran ser cables quemados
por un alto voltaje, cambio del potenciometro de luz o soldado de alguna parte del
cable de alimentación de luz.
g) Una vez que el microscopio esta sin sus partes ópticas principales quedará el cuerpo
del microscopio, el cual también deberá ser limpiado, se comienza verificando el mando
de enfoque que traslada la portaplatina, la cual esta situado de manera funcional, se
manejará fácilmente, mientras que las manos están apoyadas en la mesa de trabajo.
El mando con engranaje de rodamiento permite enfocar todas las preparaciones de
manera exacta y segura sin requerir mantenimiento y reajustándose automáticamente.
En el caso de aumentos bajos, la muestra se enfoca fácilmente, con el mando
macrométrico. El mando micrométrico recorre toda la carrera.
Los componentes del mando están protegidos por limitadores en las posiciones finales.
Mando micrométrico equivale 1 vuelta= a 0,2mm de desplazamiento. Mando
macrométrico equivale a 1 vuelta= a 2mm de desplazamiento , la carrera total es de
25mm que los mandos macro y micro deberán estar operando suave y sin ningún
problema de vibración externa, para detectar si el equipo necesita grasa el tipo de grasa
es de silicona esta dura varios años sin que sea necesario remover ya que por sus
propiedades no-suelta absolutamente nada de escurrimientos de aceites o de otros
materiales y se adhiere en las cremalleras de avance por lo que es inmediato ya que el
movimiento macro o micro se endurece y esto nos indica que algo anda mal ya que
siempre estos movimientos son suaves y cómodos de operar.

En la mayoría de los mandos micro y macro de los microscopios se cuenta con un
sistema de freno o de pocicionador del macro y con el micro se puede mover y ajustar
mejor el enfoque, es frecuente que este sistema de freno o de ajuste se dañe, para
esto se tiene que iniciar un proceso de desarmado mecánico de las perillas de avance
del micro y macro ya sea de tornillo o de opresores aleen, es muy importante antes de
iniciar un desensamble sea óptico, electrónico o mecánico siempre contar con las
herramientas apropiadas y justas a los tornillos u opresores a remover, así mismo
tener un orden tanto de que pieza se quita primero hasta la posición de la misma, la
tornilleria de los microscopios es muy frágil por lo que no se tiene que hacer fuertes
Presiones al apretar esto pueden causar un rompimiento del tornillo si se diera
presión mas fuerza de lo necesario.
h) En algunas ocasiones se llega a dañar la cremallera de avance de de los mandos micro
y macro y es necesario hacer un ajuste mecánico en donde existen unos tornillos de
acercamiento en roce de la cremallera y el piñón estos están en algunos microscopios
en la parte donde esta el condensador que al removerlo veremos algunos tornillos de
ajuste y así mismo se verá en que condiciones esta la cremallera de avance del sistema
del condensador. Se evaluará si es necesario lubricarla, el ajuste logrará con suavidad y
extremada atención y cuidado, si son cuatro tornillos se hará un primero
dando un cuarto de vuelta en sistema de apriete en cruz, ya que el apretar demasiado
podrá romper un engrane del piñón o algunos dientes de la cremallera, si se esta
seguro de dejarlo bien, será preferible llamar al técnico de la casa vendedora para que
el ajuste esta parte, ya que es muy fácil dañar al sistema mecánico
permanentemente.

i) La limpieza del cuerpo del microscopio ya libre de todas sus partes
podremos pasarle una franela humedecida de silicon líquido para limpiar
muebles, este se vende en los supermercados para huso en el hogar, por lo
que sé removerán todos los residuos de grasa o de otros agentes que
hallan causado suciedad en el cuerpo del microscopio, esto se hará con
cuidado tratando de llegar a todos los ángulos y esquinas donde se
acumule polvo y residuos. El silicón líquido por se libre de grasa y no nos
dejara nada de vestigios de escurrimientos o de decoloración en el cuerpo
del microscopio.
j) Una vez terminado este proceso se ensambla el microscopio de una
manera ordenada, comenzando por la última pieza que removimos hasta
terminar, como la tapa del microscopio base de iluminación, condensador,
pinzas de platina y así sucesivamente, cada una de las partes en su lugar
quedaran ajustadas y alineadas. Y de esta forma se podrán iniciar
nuevamente las pruebas de observación con algunas muestras. En las
primeras observaciones se podrá ver el cambio en la calidad de las
imágenes, y en la suavidad de sus movimientos que serán como cuando
adquirimos el equipo de nuevo.

ERRORES EN LAPRÁCTICA
Algunas de las recomendaciones básicas se describen en los siguientes incisos:
a) Cuando se inicia un buen mantenimiento NO es necesario desensamblar todas sus
partes: ópticas, mecánicas y electrónicas, porque todos ellos están provistos de sellos
del fabricante y con la garantía de seguridad de que no se penetrará nada nunca en
condiciones normales de trabajo, además se corre el riesgo de confundir una cara de
cualquier lente interna ya sea del ocular o del objetivo. Por lo que se recomienda
únicamente limpiar con aire comprimido o con una jeringa pera del #5, si aun la
lente esta manchada se deberá limpiar con algodón en forma de cotonete
humedecido en la solución de acetona con éter, limpiando suavemente sobre la
superficie a limpiar. Nunca se debe limpiar con alcohol puro ya que se puede dañar la
película antirreflectora que tiene la lente, el alcohol por el agua que contiene produce
con el tiempo pequeños hongos en la película y esto va deteriorando la calidad de la
misma.
b) El usuario del microscopio nunca deberá usar maquillaje en los ojos ni mucho menos
máscara de pestañas durante la operación, esto deteriora en gran medida la lente
ocular del sistema, ya que se trabaja demasiado cerca de la misma y esto con el
tiempo puede provocar rayas en la película antirreflectora.
c) Con los objetivos se debe tener extremo cuidado ya que algunos microscopios no
tienen un tope de seguridad, el cual para evita lastimar la lente del objetivo, al subir
al máximo la platina del objeto a observar.
Se recomienda buscar el tope de seguridad del microscopio que se encuentra en la
parte interior del cuello del microscopio cerca del revolver de oculares y fijarlo, pero si
no se encontrará este tope en el microscopio se deberá tener mucho cuidado cuando
se acerca el objetivo a la platina, no lastimar al objetivo.

El objetivo que en la mayoría de los casos será 100x, y el de inmersión, deberán limpiarse con el
algodón en forma de cotonete humedecido en la solución de acetona con éter, si por alguna razón se
llegará a rayar la superficie del ocular, se podrá pulir levemente la superficie con fieltro para pulir
óptica y con pulidor de 3 micras que puede ser Cerite, Barnesita o Opalin, estos son pulidores para
óptica de precisión, con lo que fueron seguramente fabricados las ópticas del microscopio.
d) El condensador tiene como misión condensar la luz que viene del foco a un punto más o
menos de un milímetro y medio arriba de la superficie (de la platina del microscopio) es decir,
aproximadamente en el lugar donde va a ser puesto el objeto el cual esta colocado sobre el
porta objetos que tiene un espesor de 9 décimas de milímetro.
Algunos condensadores están provistos de un diafragma iris para controlar la cantidad de luz
que va a emitir, como también el ángulo de los rayos de iluminación.
e) Es muy importante recordar de ciertas aplicaciones del diafragma, si se cierra el diafragma
este punto resulta menor al ángulo que esta calculado el objetivo para su abertura numérica, la
habilidad del objetivo para resolver ciertos detalles va a ser reducida pero la visión será más
clara.
f) También algunos condensadores están marcados con el ángulo de abertura numérica que nos
marcara diferentes aberturas del diafragma iris, de manera es fácil de saber de no cerrarlo a un
punto menor de la abertura numérica con el cual este marcado el objetivo que se este usando.
Si aun entra demasiada luz para ver el objeto claramente, esta luz de sobra deberá eliminarse
por medio de filtros de color colocados en los porta filtros del microscopio.
g) En algunas ocasiones se llega a dañar el diafragma, en la mayoría de los casos es posible
repararlo si no se a perdido ninguna de las obleas que lo componen, solo será un trabajo de
paciencia y se lograra el armado sin problema poniendo los pernos en sus cavidades y el brazo
de abertura en el espacio marcado de la montura, para evitar que se abra el diafragma se
recomienda unas gotas de cemento para plásticos en el borde del diafragma y quedara en
operación normal.

MANTENIMIENTO PREVENTIVO Y CORRECTIVO EN BAÑO
MARIA
El baño de María es un equipo que se utiliza en el laboratorio
para realizar pruebas serológicas y procedimientos de
incubación, aglutinación, inactivación, biomédicos,
farmacéuticos y hasta industriales. Por lo general, se utilizan
con agua, pero también permiten trabajar con aceite. Los
rangos de temperatura en los cuales normalmente son
utilizados están entre la temperatura ambiente y los 60 °C.
También se pueden seleccionar temperaturas de 100 °C,
utilizando una tapa de características especiales. Los baños de
María son fabricados con cámaras cuya capacidad puede
seleccionarse entre los 2 y los 30 litros.
Esquema Baño María:

Principios de operación:
Los baños de María están constituidos por un tanque fabricado en
material inoxidable, el cual tiene montado en la parte inferior del
mismo un conjunto de resistencias eléctricas, mediante las cuales se
transfiere calor a un medio como agua o aceite, que se mantiene a
una temperatura preseleccionada a través de un dispositivo de control
termo par, termostato, termistor o similar, que permite seleccionar la
temperatura requerida por los diversos tipos de análisis o pruebas.
Dispone de un cuerpo externo donde se encuentran ubicados los
controles mencionados, el cual se fabrica en acero y se recubre
generalmente con pintura electrostática de alta adherencia y
resistencia a las condiciones ambientales propias de un laboratorio.
Las resistencias pueden ser las siguientes:
• De inmersión. Se caracterizan por estar instaladas dentro de un tubo
sellado. Están ubicadas en la parte inferior del recipiente y se
encuentran en contacto directo con el medio a calentar.
• Externas. Se encuentran ubicadas en la parte inferior pero son
externas al tanque; están protegidas por un material aislante que evita
pérdidas de calor. Este tipo de resistencias transfiere el calor al fondo
del tanque por medio de conducción térmica.

Uso del baño de María
Antes de usar el baño de María, se debe verificar que el mismo se
encuentra limpio y que se encuentran instalados los accesorios
que van a utilizarse. Los pasos que normalmente se siguen son
estos:
1. Llenar el baño de María con el fluido que habrá de utilizarse
para mantener uniforme la temperatura –agua o aceite–. Verificar
que, colocados los recipientes que van a calentarse, el nivel del
mismo se encuentre entre 4 y 5 cm del borde superior del tanque.
2. Instalar los instrumentos de control que, como termómetros y
agitadores, puedan ser requeridos. Utilizar los aditamentos de
montaje que, para el efecto, suministran los fabricantes. Verificar la
posición del bulbo del termómetro o de la sonda térmica, para
asegurar que las lecturas sean correctas.
3. Si se utiliza agua como fluido de calentamiento, verificar que la
misma sea limpia. Algunos fabricantes recomiendan añadir
productos que eviten la formación de algas.
4. Colocar el interruptor principal en la posición de encendido.
Algunos fabricantes han incorporado controles con
microprocesadores que inician rutinas de auto verificación, una vez
que se acciona el interruptor de encendido.

5. Seleccionar la temperatura de operación. Se utilizan el
botón de Menú y los botones para ajuste de parámetros.
6. Seleccionar la temperatura de corte, en aquellos baños
que disponen de este control. Este es un control de
seguridad que corta el suministro eléctrico, si se sobrepasa
la temperatura seleccionada. Esta se selecciona también a
través del botón de Menú y se controla con los botones de
ajuste de parámetros.
7. Evitar utilizar el baño de María con sustancias como las
que se indican a continuación:
a) Blanqueadores.
b) Líquidos con alto contenido de cloro.
c) Soluciones salinas débiles como cloruro de sodio, cloruro
de calcio o compuestos de cromo.
d) Concentraciones fuertes de cualquier ácido.
e) Concentraciones fuertes de cualquier sal.
f) Concentraciones débiles de ácidos hidroclórico,
hidrobrómico, hidroiódico, sulfúrico o crómico.
g) Agua desionizada, pues causa corrosión y también
perforaciones en el acero inoxidable.

Mantenimiento
Los baños de María son equipos que no son muy exigentes desde el punto de vista
de mantenimiento. Las rutinas recomendadas están principalmente enfocadas a la
limpieza de los componentes externos. A continuación, se señalan las rutinas más
comunes.
Lubricación
Frecuencia: Diaria
Esta actividad es para baños de María que disponen de unidad o sistema de
agitación. Lubricar el eje del motor eléctrico del agitador. Colocar una gota de aceite
mineral en el eje, para que se mantenga una buena condición de lubricación entre
los rodamientos del motor y el eje del mismo.
Limpieza

Frecuencia: Mensual
1. Apagar y desconectar el equipo. Esperar a que el mismo se enfríe
para evitar riesgos de quemaduras accidentales.
2. Extraer el fluido utilizado para el calentamiento. Si es agua, puede
verterse a un sifón. Si es aceite, recolectar en un recipiente con
capacidad –volumen– adecuada.
3. Retirar la rejilla de difusión térmica que se encuentra ubicada en el
fondo del tanque.
4. Limpiar el interior del tanque con un detergente suave. Si se
presentan indicios de corrosión, existen en el mercado sustancias
para limpiar el acero inoxidable. Frotar suavemente con esponjas
sintéticas o equivalentes. Evitar la utilización de lana de acero para
remover manchas de óxido, debido a que las mismas dejan partículas
de acero que podrían acelerar la corrosión.
5. Evitar doblar o golpear el tubo capilar del control de temperatura
que generalmente se encuentra ubicado en el fondo del tanque.
6. Limpiar con agua limpia el exterior y el interior del baño de María.

Usos y cuidados de balanzas
La diferencia entre una báscula y una
balanza no está muy bien definida, sin
embargo, podemos mencionar que las
balanzas tienen una resolución de al
menos 0.01 mg. Usualmente son utilizadas
en laboratorios. En cambio las básculas
están preparadas para pesar masa de
mayor magnitud.
Ambas requieren usos y cuidados
diferentes. Conocer estos puntos nos
ayudará a tener siempre mediciones
precisas y evitaremos la mayor parte de
los problemas que se nos presentan en
nuestro laboratorio o lugar de trabajo.

Uso adecuado de las Balanzas.
Los pasos básicos para realizar una medición en sus balanzas son los siguientes:
1.Las condiciones ambientales pueden llegar a afectar la medición en relación a la
magnitud de masa que se va a pesar. La temperatura de la habitación, suciedad en el
equipo, sobrecargas eléctricas e incluso la exposición a la luz solar. Para conocer las
condiciones óptimas de uso puedes consultar al fabricante del producto o a tu técnico
de calibración.
2.El flujo de aire por medio de ventiladores o aire acondicionado puede afectar las
mediciones, por lo que se recomienda que antes de iniciar una medición se debe
esperar alrededor de 10 a 15 minutos para que la balanza se estabilice.
3.La ubicación de la balanza debe ser en un lugar lo más lejano posible de hornos,
montacargas o de piezas móviles que puedan caer y golpear el dispositivo.
4.Es muy importante que se encuentre nivelada, la mayoría de las balanzas tienen
una burbuja de apoyo en caso de no tenerla, puede usar un nivel externo.
Normalmente la nivelación se hace por medio de las patas de la balanza. Procura no
mover la balanza de lugar ya que el movimiento puede dañar su mecanismo.
5.Para su limpieza puedes utilizar un paño limpio y seco, procura no usar disolventes
químicos. El paño no debe soltar pelusa y si lo que se encuentra en la balanza es
polvo, no lo soples ya que puede penetrar dentro del mecanismo. Utiliza siempre un
paño limpio y seco.

Calibración externa.
Una vez logradas las condiciones óptimas
desde el punto de vista ambiental y
estructural, se empezaría el proceso de
control metrológico.
Lo recomendable es hacer una calibración
inicial, para lo cual, la empresa puede
acudir a un proveedor de servicios
metrológicos o consultar al proveedor de
servicios.

Es importante tomar en cuenta que las
balanzas se calibran en el lugar donde se
encuentran instaladas para su uso, y el
resultado de la calibración de la balanza
será un informe o certificado que servirá
como punto de partida para el control
metrológico.
Se debe corroborar si los resultados de la
calibración concuerdan con las
especificaciones del fabricante o contra
alguna norma, parámetro o recomendación
ligada al proceso en el cual se está
usando.
Los puntos a calibrar en las balanzas son
seleccionados de acuerdo con la
capacidad máxima de estas y a su uso,
esto se encuentra establecido en la
recomendación internacional Nº 76 de la
Organización Internacional de Metrología
Legal (OIML). Cada país puede tener
distintas normas.

Procedimiento de pesaje:
1.Condiciones ambientales - Corrobore que las balanzas se encuentren
en un ámbito de temperatura y de humedad relativa recomendado por el
fabricante. Evite las variaciones de temperatura y humedad como la
exposición a la luz solar.
2.Preparación - Las balanzas deben colocarse en una mesa firme y
protegida de vibraciones. Encienda la balanza 30 minutos antes de iniciar
la medición. Asegúrese que todo el sistema esté ajustado a cero.
3.Calentamiento - Asegúrese nuevamente que las condiciones
ambientales sean las óptimas.
4.Pesaje - Coloque las piezas en el centro de la balanza, espere el
tiempo para estabilización del equipo para tomar la lectura. Puede
realizar una prueba de excentricidad realizando mediciones en los 5
puntos del plato.
Las balanzas se deben calibrar periódicamente, sobre todo la primera vez
que se pone en funcionamiento o cuando se cambia de lugar, y se debe
verificar después de nivelarlas y después de grandes cambios
de temperatura, humedad o presión atmosférica. Algunas poseen
mecanismo de calibración de forma automática y no es necesaria esta
operación.

Comprobaciones Internas.
Es importante realizar verificaciones internas
periódicamente, es muy recomendable utilizar una pesa
patrón calibrada. La frecuencia de las verificaciones
depende de la empresa y pueden variar dependiendo del
uso y del ambiente en el que se encuentre la balanza.
Es muy importante llevar a cabo un programa de
Calibracion y verificacion controlado. Recuerda que el
informe de calibración solo es una comparación entre las
masas patrón certificadas vs las mediciones de tu
balanza.
En caso de que se requiera el ajuste al equipo, tu tecnico
de calibracion lo puede realizar o te lo puede
recomendar.
En SIME Soluciones Integrales de Metrologia te
podemos apoyar con el proceso de calibración y
verificación de balanzas, básculas y masas patrón. Así
como guiarte en el ajuste de la mayoría de los equipos
de masa.

Definición de autoclave
Un autoclave es una máquina que
proporciona una método físico de
esterilización matando las bacterias, los
virus e incluso las esporas presentes en el
material dentro del contenedor mediante
vapor a presión. El autoclave esteriliza los
materiales calentándolos a una
temperatura determinada durante un
periodo de tiempo específico. El autoclave
también se conoce como esterilizador de
vapor que se utiliza habitualmente en los
centros sanitarios y en las industrias para
diversos fines. El autoclave se considera
un método de esterilización más eficaz, ya
que se basa en la esterilización por calor
húmedo.

La forma más sencilla de autoclave es el
tipo de olla a presión o los autoclaves de
mesa de laboratorio. A continuación
encontrarás una descripción detallada de
los diferentes componentes/partes de un
autoclave:
Piezas/componentes del autoclave

Cámara de presión
•La cámara de presión es el componente principal
de un autoclave de vapor, que consta de una
cámara interior y una carcasa exterior.
La cámara interior es de acero inoxidable o de bronce,
que se encuentra dentro de la cámara exterior hecha de
una carcasa de hierro.
Los autoclaves utilizados en los laboratorios sanitarios
tienen una carcasa exterior llena de vapor para reducir el
tiempo necesario para alcanzar la temperatura de
esterilización.
La cámara interior es el alojamiento donde se colocan los
materiales a esterilizar.
El tamaño de la cámara de presión varía de 100 L a 3000
L.

Tapa/Puerta
•El siguiente componente importante de un autoclave es la tapa o puerta del mismo.
•La finalidad de la tapa es aislar la atmósfera exterior y crear una condición de
esterilización dentro del autoclave.
•La tapa se hace hermética mediante abrazaderas de tornillo y una arandela de
amianto.
•La cubierta consta de varios componentes más, como :
Manómetro
•En la tapa del autoclave hay un manómetro que indica la presión creada en el
autoclave durante la esterilización.
•El manómetro es esencial, ya que garantiza la seguridad del autoclave y el estado
de funcionamiento.
Unidad de Liberación de Presión/Silbato
•En la tapa del autoclave hay un silbato igual al de la olla a presión.
•El silbato controla la presión dentro de la cámara liberando una cierta cantidad de
vapor a medida que sube.
Válvula de seguridad
En la tapa del autoclave hay una válvula de seguridad, que es crucial en los casos en que el
autoclave no funcione o la presión del interior aumente de forma incontrolada.
La válvula tiene una fina capa de goma que estalla por sí misma para liberar la presión y
evitar el peligro de explosión.

Generador de vapor/calentador eléctrico
•Debajo de la cámara hay un generador de vapor o caldera eléctrica que
utiliza un sistema de calefacción eléctrica para calentar el agua y generar
vapor en la cámara interior y exterior.
•El nivel de agua en la cámara interior es vital, porque si no hay suficiente
agua, es probable que el sistema de calefacción se queme.
•Además, si hay más agua de la necesaria, podría interferir con las
bandejas y otros componentes del interior de la cámara.
Generador de vacío (si procede)
•En algunos tipos de autoclave hay un generador de vacío separado que
extrae aire del interior de la cámara para crear un vacío dentro de la
misma.
•La presencia de algunas bolsas de aire en el interior de la cámara puede
favorecer el crecimiento de diversos microorganismos. Por eso la cámara
de vacío es un componente importante de un autoclave

Enfriador de agua residual
•Muchos autoclaves están equipados con un sistema para enfriar
el efluente antes de que entre en las tuberías de descarga.
•Este sistema evita que el agua hirviendo que sale del autoclave
dañe el tubo de desagüe.
Principio/funcionamiento del autoclave
•El autoclave funciona según el principio de esterilización por calor
húmedo, en el que se utiliza vapor a presión para esterilizar el
material dentro de la cámara.
•La alta presión aumenta el punto de ebullición del agua y, por
tanto, permite alcanzar una temperatura más alta para la
esterilización.
•El agua suele hervir a 100°C bajo una presión atmosférica normal
(760 mm Hg); sin embargo, el punto de ebullición del agua
aumenta si hay que aumentar la presión.

•Además, la alta presión facilita la rápida penetración del calor en las
partes más profundas del material, y la humedad del vapor hace que las
proteínas se coagulen, lo que provoca una pérdida irreversible de la
función y la actividad microbiana.
•Este principio se utiliza en un autoclave en el que el agua hierve a 121°C a
una presión de 15 psi o 775 mm Hg.
•Cuando este vapor entra en contacto con la superficie, mata a los
microbios liberando calor latente.
•El líquido condensado asegura la destrucción húmeda de los microbios.
•Una vez terminada la fase de esterilización (que depende del nivel de
contaminación del material en el interior), se libera la presión del interior de
la cámara mediante el silbato.
•A continuación, la presión dentro de la cámara se restablece a la presión
ambiente mientras los componentes del interior permanecen calientes
durante algún tiempo

Procedimiento de funcionamiento de un
autoclave
En general, un autoclave funciona a una temperatura de 121°C durante al
menos 30 minutos utilizando vapor saturado a una presión de al menos
15 psi. Para hacer funcionar un autoclave es necesario seguir los
siguientes pasos:
1.Antes de empezar a utilizar el autoclave, comprueba que no quedan
restos del ciclo anterior.
2.A continuación, se coloca una cantidad suficiente de agua dentro de la
cámara.
3.Ahora se colocan los materiales a esterilizar dentro de la cámara.
4.A continuación, se cierra la tapa, se aprietan los tornillos para garantizar
un cierre hermético y se enciende el calentador eléctrico.
5.Las válvulas de seguridad se ajustan para mantener la presión
necesaria en la cámara.

1.Una vez que el agua del interior de la cámara hierve, se deja que la mezcla
de aire y agua salga por el tubo de descarga para que se desplace el aire del
interior. Se puede asegurar el desplazamiento completo una vez que las
burbujas de agua dejen de salir del tubo.
2.A continuación se cierra el tubo de descarga y se deja que el vapor del
interior alcance los niveles deseados (15 libras en la mayoría de los casos).
3.Una vez alcanzada la presión, el silbato suena para eliminar el exceso de
presión de la cámara.
4.Tras el pitido, el autoclave funciona durante un periodo de retención, que en
la mayoría de los casos es de 15 minutos.
5.Ahora se apaga el calentador eléctrico y se deja que el autoclave se enfríe
hasta que el manómetro indique que la presión interior ha descendido a la
presión atmosférica.
6.A continuación se abre el tubo de descarga para que entre aire del exterior
en el autoclave.
7.Por último, se abre la tapa y se sacan los materiales esterilizados de la
cámara

Tipos de autoclave
Existen diferentes tipos de autoclaves en
el mercado, algunos de los cuales son los
siguientes
Tipo de autoclave/ Autoclaves de mesa de
laboratorio (tipo N)
Autoclave de desplazamiento por gravedad
Tipo de desplazamiento de presión positiva
(tipo B)
Tipo de desplazamiento de presión negativa
(tipo S)

Usos del autoclave
Los autoclaves son dispositivos importantes para la esterilización de
materiales que contienen agua, ya que no se pueden esterilizar con
calor seco. Además, los autoclaves se utilizan para otros fines.
Se utilizan para descontaminar residuos biológicos específicos y esterilizar
medios, instrumentos y artículos de laboratorio.
Se recomienda que los residuos médicos regulados que puedan contener
bacterias, virus y otros materiales biológicos se inactiven mediante autoclave
antes de su eliminación.
En los laboratorios médicos, los autoclaves se utilizan para esterilizar equipos
médicos, material de vidrio, material quirúrgico y residuos médicos.
Asimismo, los autoclaves se utilizan para esterilizar los medios de cultivo, los
recipientes autoclavables, los tubos de plástico y las puntas de pipeta.

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