El documento describe el estudio de la médula ósea. La médula ósea es el sitio de formación de las células sanguíneas y existe en dos formas, roja y amarilla. Se detallan los procedimientos para obtener muestras de médula ósea mediante aspiración o biopsia, así como los parámetros para su evaluación microscópica. También se incluyen tablas con los recuentos diferenciales normales de células en la médula ósea en diferentes edades.
2. MEDULA OSEA
1era MO primitiva aparece en el feto
en el 2do mes de vida intrauterina
Función: hematopoyesis, es decir
la producción de 3 tipos de
células de la sangre como células
rojas o hematíes, células blancas
o leucocitos y plaquetas.
Tejido conectivo especializado
Adulto: 1.300 – 1500 g.
3. HEMATOPOYESIS
Es el proceso de formación,
desarrollo y maduración de
los elementos de la sangre.
Las células madre son las responsables de formar todas las
células y derivados celulares que circulan por la sangre.
Las células sanguíneas son degradadas
por el bazo y los macrófagos del hígado
HEMATOPOYESIS FETAL
Y EMBRIONARIA
1er mes aparecen cel. Sanguíneas
en el mesénquima del saco vitelino
6ta. Semana : hígado
Mitad de la vida fetal : bazo
Finales de la vida fetal :
medula ósea
HEMATOPOYESIS
POSNATAL
4. ASPECTO
MACROSCOPICO MO
Hematopoyéticamente activa
El color rojo viene del contenido de los E. y la Hb
En los RN, toda la cavidad medular es roja
Predomina en la infancia
Hematopoyéticamente inactiva
El color amarillo viene de la presencia de abun
células adiposas ( alto contenido de carotenos)
Predomina en los adultos
MO ROJA
MO AMARILLO
6
5. MEDULA OSEA
Es el sitio de
formación y
maduración
de las células
sanguíneas
Es el mismo tanto
para la MO ROJA
como para la MO
AMARILLA
Compuesto
sinusoides
Incluye células
hematopoyéticas
Columnas irregulares entre los
vasos
6.
7. MEDULA OSEA
sexo edad
Estado
fisiológico
localización
El estudio semicuantitativo y cualitativo
del estado de la Hematopoyesis, varia:
Sangre periférica Celularidad de la medula
(hemograma medular)
Rto. Completo de
células sanguíneas
Plaquetario
reticulocitos
Debe realizarse el mismo día
del estudio de la medula
Expresa según la relación
entre el Vol CH y el Vol
total del espacio medular
Datos deben
incorporarse
al informe
8. No hay regla fija e inamovible que determinen cual es el
paciente que requerirá un examen de medula ósea
INDICACIONES PARA UN
ESTUDIO DE MEDULA OSEA
El examen de medula ósea no se precisa en los
casos de anemia cuya etiología es evidente
índices eritrocitarios
otras pruebas de lab
niveles bajos de Hierro
y ferritina en suero
anemia ferropenica
y los niveles bajos de
vitamina B12 Y Folatos
anemia megaloblastica
Cada caso debe evaluarse a la luz de toda información
clínica y de laboratorio para determinar si este
procedimiento invasivo es necesario. Ejm
9. anomalías de varias líneas
celulares en sangre periférica
INDICACIONES PARA UN
ESTUDIO DE MEDULA OSEA
Pacientes pancitopenicos,
Excepto en quienes reciben
tratamiento supresor
Presencia de Blastos circulantes
Excepto en los lactantes y en los
RN que presentan una infección
Estadificar el linfoma de Hodgkin,
el linfoma no de Hodgkin y el
Carcinoma
Citopenias: en ocasiones revelara
la presencia de leucemia u otra
neoplasia hematologica.
E
X
A
M
E
N
D
E
M
E
D
U
L
A
Ó
S
E
A
10. INDICACIONES PARA UN
ESTUDIO DE MEDULA OSEA
Anemias microcitica : la evaluación de las reserva de He+
y de los sideroblastos permite clasificar la anemia
Anemias macrociticas : Proceso megaloblastico o no
Anemias normociticas (o macrociticas ) sin un aumento en
el índice de produccion de reticulocitos , la medula se
evalua para detectar las anomalias cuantitavtivas y
cualitativas de la eritropoyesis ejm aplasia celular pura de la
serie roja o mielodisplasia
Anormalidades Ig.: Puede confirmarse el Dx de mieloma de
celulas plasmáticas o macroglobulinemia si se detectan
infiltraciones anormales de celulas plasmaticas o linfocitos
E
X
A
M
E
N
D
E
M
E
D
U
L
A
Ó
S
E
A
Problema medular hay
presencia de:
Normocitos o Macrocitos.
•Siendo las anemias por
enfermedades crónicas, las forma
mas común de Anemia Normocitica
11. Parámetros de evaluación para la
descripción del aspirado de medula ósea
MEDULA OSEA
1.-Indices
2.-Extendido de sangre periférica
(frotis(Celularidad))
3.-Biopsia en cilindro
4.-Aspirado seco
5.- Apariencia de la sangre
Aspirada
6.-Resistencia ósea
7.-CC de Hierro
8.- Numero de Sideroblastos
9.- relación
mieloideeritroide(M/E)
10.- maduración de la serie
mieloide,
11.- maduración de la serie
eritroide,
12.- porcentaje de eosinófilos,
basófilos y células cebadas,
13.- número de megacariocitos,
14.- presencia de otras células
como linfocitos, células
plasmáticas, histiocitos, etc.,
15.- anormalidades del estroma:
granulomas, fibrosis, necrosis, etc.,
16.- contenido de hemosiderina,
17.- anormalidades de los vasos
sanguíneos,
18.- anormalidades óseas.
14. se puede obtener por:
aspiración a través de una Aguja
biopsia por trepanación percutánea
BIOPSIA Y ASPIRADO DE LA MO
ADULTOS
NIÑOS Y NEONATOS
En la Tibia
ADULTOS
Cresta ilíaca
Esternón
Espina ilíaca anterior o posterior.
Huesos largos
Rojo: Hiperplasia
eritroblastica
Oleoso: aplasia
medular
Negruzco:
melanoma
metastatizado
Blanco: hiperplasia
medular
ASPECTOS DEL ASPIRADO
15. Deben ser gruesas
(acero inoxidable)
longitud: 7-8 cm (provistas de
un fiador que se ajuste
perfectamente y un
dispositivo de seguridad
ajustable.)
AGUJAS DE PUNCIÓN MEDULAR
1. Agujas de Rosenthal
2. Agujas de Jamshidi
Guantes quirúrgicos
Laminas portaobjetos
Jeringa de 10ml – 20 ml.
Yodo povidona
Lidocaína al 2%,
líquido de transporte de biopsia
(formol al 10%)
MATERIALES PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MO
16. Decubito lateral o esternal
PUNCION: Parte dorsal del íleon
Decubito supino
PUNCION: linea media de la
esternebra
decubito lateral
PUNCION: superficie plana
adyacente a la tuberosidad dorsal
Decúbito lateral
PUNCION: unión costocondral,
en dirección ascendente al
eje longitudinal
Decubito lateral
PUNCION: fosa trocanterica (cara
medial)
CRESTA ILIACA
ZONAS DE PUNCION PARA MO
COLOCACION DEL PACIENTE
COSTILLA
ESTERNON HUMERO
FEMUR
17. PROCEDIMIENTO
El paciente se coloca en decúbito lateral
derecho o izquierdo
Limpiar la piel con yodo povidona
Infiltrar: piel, tejido subcutáneo, musculo y
periostio con lidocaína al 2%, en cantidad de 2 a
5 ml
Introducir la aguja (3-5 mm en el hueso)
Retirar fijador
conectar una jeringa de 10 o 20 ml y aspirar el
contenido medular para realizar las extensiones
Realizar las extensiones sin demora (máximo 30 '')
Informar al pct y fam.de la técnica
que se le va a realizar, el familiar
firmara la solicitud para poder
realizar el procedimiento
TOMA DE MUESTRA
ASPIRADO DE MO
18. EXTENCIONES DE MEDULA:
Pueden realizarse de forma similar a un extendido
de sangre.
Las partículas grises de la M.O se ven a simple vista
Son el mejor material para la preparación de
buenas extensiones y sirven de indicadores para el
examen microscópico de los frotis teñidos
EXTENSIONES DIRECTAS:
Se coloca una gota de medula sobre un porta
objeto a poca distancia de uno de los
extremos.
Con un esparcidor se realiza una extensión de
3cm a 5 cm no + de 2cm de anchura,
arrastrando las partículas pero sin aplastarlas
IMPRESIONES:
Se recoge una o mas partículas
visibles con una pipeta capilar,
con la punta rota de un depresor
de madera y se lleva
inmediatamente a un portaobjetos
adhiriéndolas mediante un ligero
movimiento de unción.
PREPARACIONES APLASTADAS:
colocar una gota en el portaobjeto cerca de uno de sus extremos.
Se coloca otro portaobjetos cuidadosamente sobre el primero.
Se ejerce una ligera presión para aplastar las partículas y se separan ambos
portaobjetos deslizando uno sobre otro en dirección paralela a sus superficies.
A medida que se extiende el material, la aparición de grasa en forma de huecos
irregulares en la extensión garantiza que se ha obtenido medula y no sangre
Preparación del material aspirado para el examen
19. BIOPSIA DE M.O POR TREPANACION
utilizando un movimiento de
rotación hacia delante y hacia
atrás para extraer un trozo de
tejido.
Una muestra típica tiene
alrededor de 1,9 cm L. por 0.15
a 0.14 cm de D y pesa unos 150
mg
Se obtiene insertando la aguja
de biopsia en el hueso
20. Es útil para
evaluar:
• Linfomas Hodgkin y no
Hodgkin
• Mieloma Múltiple
• Tumores metastásicos
• Amiloide y Granulomas
Enfermedades
que producen
lesiones Focales
en M.O. Tales
como:
La Biopsia en cilindro o por trepanación
Es obligatoria para la denominada
“punción seca” Esto puede ser
resultado de una hipocelularidad
verdadera
(Anemia Aplásica)
un proceso de Fibrosis
un exceso de células que “Tamponan”
la cavidad de la Médula (Leucemia )
que impide tomar una muestra
21. TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS DE BIOPSIA DE M.O POR TREPANACIÓN
La biopsia se fijan en una solución de acético de senker durante 6
a 18 horas.
Un tiempo excesivo con el fijador produce fragilidad histica
El tejido se procesa habitualmente para su inhibición en parafina se
hacen cortes de 4um y se tiñe habitualmente con (H&E)
Las tinciones periódicas de Giemsa y de acido de Schiff son
frecuentemente útiles .
22. Para observar espiculas oseas, que se
tiñen de color azul oscuro o púrpura
Se busca presencia de
megacariocitos y células anormales
para determinar si la MO es
OBSERVACIÓN DE LAS EXTENSIONES DE M.O
Baja resolución (10x)
A continuación se seleccionan
áreas en las extensiones donde
las células de la medula
o Hipocelularidad
o Normocelularidad
o Hipercelular
no aparecen diluidas con
células sanguíneas
están separadas
suficientemente extendidas
para permitir una identificación
optima.
Estas áreas están generalmente justo
por detrás de las partículas de
medula en extensión directa
o cerca de las partículas en las
extensiones aplastadas
23. OBSERVACIÓN DE LAS EXTENSIONES DE M.O
Identificar todas las etapas de
maduración de las células
mieloides
eritroides.
Realizar Rto dif. utilizando las
categorías de células
Eritroides
Mieloides
Linfoides
plasmáticas y «otras»,
anotando simultáneamente
cualquier anomalía
morfológica.
Valorar el contenido férrico de los
macrófagos y buscar los gránulos de
hierro en las células eritroides en una
extension teñida con el colorante de
Perls
Alta resolución (40 x ,100x inmersión)
Esto se consigue más fácilmente
comenzando con los
eritrocitos maduros y
retrocediendo hasta las células
más inmaduras
Repetir el proceso para la serie
mieloide comenzando con los
neutrófilos maduros.
En condiciones normales por lo
general se encuentran muchos
tipos celulares ,como el patrón
de distribución puede ser
irregular es preferible contar de
300 a 500 celulas nucleadas
24. CELULARIDAD DE
LA M.O
Se expresa como la
relación del volumen de
células hematopoyéticas
con el volumen total del
espacio medular (células
mas grasas y otros
elementos del estroma)
varia con la edad
el promedio de Células en:
vertebras 75%, esternon60% cresta iliaca 50% costillas 30%.
% hipercelular % hipocelular
el lugar
por ejm a los 50 a.
EDAD PROMEDIO DE
CELULARIDAD
(%)
INTERVALO DE
VARIACION
(%)
RECIEN NACIDO 100 80-100
1-3 MESES 80 80-100
NIÑOS >DE 1 AÑO 80 60-90
10 AÑOS 80 60-90
20 AÑOS 65 50-90
30 AÑOS 60 30-85
40 AÑOS 55 30-80
50 – 60 AÑOS 50 20-80
70 AÑOS 40 20-65
80 AÑOS 30 15-45
26. TINCION WRIGHT
FROTIS DE SANGRE PERIFERICA
MEDULA OSEA
Azul de metileno Eosina
Componentes
celulares ácidos
Componentes
celulares básicos
Núcleo
(nucléolo)
cromatina
Citoplasma
(ribosoma)
granulaciones
Hb
TINCION TIPO
ROMANOSWSKY
MIELO PEROXIDASA (MXP)
LMA de la L.
LINFOBLASTICA AGUDA
Es una enzima que
se encuentra en los
gránulos primarios
FUNDAMENTO
Cuando se encuentra el
peróxido de hidrogeno,
la MPO oxida los
sustratos de tinción lo
que crea una coloración
negra a marrón rojiza.
Neutrófilos
Eosinofilos
+ en serie mieloide
- negativa en serie monocítica
27. SUDAN NEGRO B
Diferenciar LMA de la LLA
Patrón de tinción es
bastante parecido a la MPX
Tiñe lípidos
gránulos primarios
y secundarios de los
neutrófilos.
Esteroles
grasas neutras
fosfolípidos
y depende de la
solubilidad de la
coloración en la
partícula lipídicas
FOSFATASA ALCALINA (FAL)
diferenciar la LMC de una
reacción leucemoide, en
infecciones graves
Es una enzima
que se
encuentra en
los gránulos
secundarios
de los
neutrófilos
El sustrato es el naftol
fosfato y es
hidrolizado por la
enzima en presencia
del pH alcalino
FUNDAMENTO
28. FUNDAMENTO
• El ac. Peryodico oxida al glucógeno,
mucoproteinas y otros carbohidratos.
Estos reaccionan con el
reactivo incoloro de Schiff
Formando un precipitado
rojo brillante
ACIDO PERYODICO DE SHIFF (PAS)
29. REACCION DE AZUL DE
PRUSIA O PERLS
Dx de anemia carenciales y
síndromes mielodisplasicos
El He+ de deposito se
encuentra en el interior
de las células
En la acción del Ac.
clorhídrico para liberar
iones férricos, que
reaccionan con el
ferrocianuro de K dando
un precipitado azul
verdosos de ferrocianuro
férrico
30-60% DE SIDEROBLASTOS CON 1 A4
GRANULOS EN LA SUPERFICIE
en forma de agregados de
hemosiderina en los eritroblastos
(sideroblastos)
algunos eritrocitos (siderocitos)
Macrofagos de MO, HIGADO, BAZO
detectable por la reacción de perls
FUNDAMENTO
Un # > indica disfunción del metabolismo del He+
Anemia refractaria sideroblastica (mitocondrias
NORMAL