este documento habla sobre los problemas que pueden causar ciertos medicamentos como recubrimiento pulpar directo.

1. Universidad de Ciencias y Artes
de Chiapas
Facultad de Odontología y Salud Pública.
Especialidad en Endodoncia.
C.DAlonzo Mejía Dan

2. Un recubrimiento pulpar es la utilización de un
material para sellar las comunicaciones entre la
cavidad oral y la pulpa dental.

3. Hidróxido de Calcio MTA
Pobre Sellado Excelente sellado
Alta solubilidad Hidrofílico
Inestabilidad Mecánica Adaptación mediante instrumental
especial.
Reabsorbible No Reabsorbible
Irritante, produce necrosis por
licuefacción y zona e coagulación.
Promueve diferenciación y
proliferación de células pulpares.

4. Objetivo
• En este estudio In Vitro se evaluarán los posibles
efectos citotóxicos de siete diferentes materiales
para recubrimiento pulpar comerciales en
odontoblastos de ratones.

5. Materiales y Métodos

6. • Células Odontoblásticas (Departamento de Cariología, Ciencias
Restaurativas, Endodoncia; Universidad de Michigan Escuela de
Odontología, EE. UU.)
10% Suero fetal bovino
2% Glutamina
2% Piruvato de sodio
1% Anfotercina
1% Penicilina/Esteptomicina
37°C-5% CO2
Las células se separaron usando una solución de
tripsina y EDTA durante 2 minutos a 37 ° C,
y resuspendida en DMEM.
4 hrs a 37°C

7. Prueba de Citotoxicidad
• Membrana Transwell de policarboxilato poro
0.3mm
• Recubrimiento pulpar de 300 μL
• Incubadas 37°C al %% de CO2 (24,48 y 72hrs)
• Medio de cultivo tisular (Control Negativo)
• Dilución de H2O2 durante 72hrs (Control Positivo)

8. Azul Alamar
• La prueba de vitalidad con el reactivo Azul Alamar actúa como
un indicador de la salud celular, determinando la reducción y
así poder medir cuantitativamente la capacidad proliferativa
de las células.
• Relación 1:10 durante 2-4hrs 37°C
• -24hrs -48hrs -72hrs
• Los resultados se leyeron con un Espectofotómetro (595nm)

9. • Se evaluaron las células a las 72 horas mediante el estudio
MTT.
• La prueba MTT se realiza en base a un colorímetro que medirá
cualitativamente la actividad enzimática en la mitocondria.
• La célula adquiere un color azul/púrpura.
• El análisis se realiza observando cada muestra con un microscopio
espectofotometrico a una long de onda de 570nm.

10. Microscopio de Exploración Lasser
Confocal. (CLSM)
Colorante Fluorescente
PSVue480
• Apóptosis Celular
• La pérdida de asimetría de
la membrana plasmática
Después de 2 horas, la solución de PSVue lavada con solución tamponada.
Se adicionó colorante Hoechst 33342, afín a ADN para células viables.
Después de 15 minutos, las imágenes se obtuvieron utilizando CLSM

11. Resultados de Citotoxicidad
• Biocompatibilidad

12. Análisis Estadístico
• A las 24hrs y 48hrs no hay diferencia significativa entre Biodentine, ProRoot MTA y
MTA Angelus.
• A las 72hrs hay una disminución de células vitales por parte del ProRoot MTA y
MTA Angelus en comparación al Biodentine que no mostró disminución.
• Calcicur, Calcimol LC y TheraCal LC mostró resultados similares después de 24 horas
• La cantidad de células vitales variaba significativamente después de 48 horas para
Calcicur y para TheraCal LC.
• Se mostró resultados similares después de 72 horas para Calcimol LC y TheraCal
LC, mientras Calcicur mantuvo una mayor cantidad de células vitales.
• Después 24 y 48 horas no hay diferencias significativas entre Dycal y el control
positivo.
• Después de 72 horas se registró una menor biocompatibilidad para el control
positivo.

13. • Células viables y replicación celular

14. Resultados de Microscopía Lasser
Confocal (CLSM).
A. Control Positivo
B. Control Negativo
C. Dycal
D. Calcicur
E. Calcimol LC
F. Theracal LC
G. ProRoot MTA
H. MTA Angelus
I. Biodentine

15. Discusión
• Se siguen desarrollando nuevos materiales de recubrimiento
los cuales tienen como meta no ser tóxicos, irritantes
alergénicos o carcinógenos como recubrimiento pulpar.
• Los materiales de recubrimiento pulpar actúan como barrera
para proteger la vitalidad de la totalidad tejido pulpar
cubriendo el tejido expuesto y prevenir así tratamientos
endodónticos.

16. • Se muestra que, a pesar de saber que todos los materiales se
encuentran disponibles, no todos son biocompatibles, salvo el
Biodentine.
• El Dycal demostró tener menores niveles de vitalidad pulpar y
mayor citotoxicidad.
• Calcicur, Calcimol LC mostraron una reducción en el
porcentaje de viabilidad celular después de 72 hrs, lo que
sugiere una diferente tasa de biocompatibilidad a largo plazo.
• Biodentine- MTA

17. • Hidróxido de calcio es importante para proteger la pulpa de
los efectos térmicos, mecánicos, y estímulos microbiológicos,
debido a su acción antibacteriana y su propiedad de estimular
la formación y reparación de dentina.
• Sin embargo, el puente dentinario formado por el CaOH
presenta múltiples defectos e inclusiones celulares en puentes
después de la cobertura de pulpa.
• Debido a la alcalinidad de su pH, el hidróxido de calcio induce
la formación de una capa de necrosis por coagulación, cuando
entra contacto directo con la pulpa dental.

18. Conclusiones
• Estudios como este son importantes para encontrar materiales
dentales con mayor biocompatibilidad, los materiales con base de
CaOH mostraron mayor citotoxicidad en odontoblastos, estos
estudios se limitan a un modelo in vitro puesto que un modelo in vivo
podrían causar irritaciones potenciales y daños celulares.
• El Biodentine causó efecto citotóxico similar al de MTA y que puede
ser considerada una alternativa al MTA en el tratamiento de
protección pulpar que difiere de los materiales basados ​​en hidróxido
de calcio, que exhiben una citotoxicidad más alta.