1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE ENTRE RÍOS
Facultad de Ciencias de la Alimentación
Ingeniería en Alimentos
Trabajo Práctico Nº3
Citología II: Observación microscópica de células eucariotas y procariotas
Objetivos: ofrecer adiestramiento en microscopía óptica, mediante la observación
de células procariotas y eucariotas de la mucosa bucal, diferenciando tamaños,
presencia de núcleo, movilidad celular y características del citoplasma.
Observación microscópica de células eucariotas y procariotas de la mucosa bucal
Fundamento:
La preparación nos muestra una visión parecida a un mosaico formado por células
planas, poligonales, más o menos irregulares; abundan las células aisladas, en cuyas
caras se perciben los trazos de inserción de unas células con otras que forman el
tejido epitelial, que constituye la mucosa
El azul de metileno tiñe intensamente el núcleo y con menos color el citoplasma; éste
presenta un cierto aspecto de alteración y suele ser algo granuloso. Deben
desestimarse las zonas pocas o demasiado teñidas, y los apelotonamientos de células
unas encimas de otras, etc. Enfocar las células aisladas con mayor aumento.
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Microscopio de contraste de fases: es un microscopio óptico modificado que
permite contrastar sustancias de diferente grosor o densidad. Se utiliza para
visualizar estructuras celulares sin necesidad de utilizar colorantes, alterndo
estructuras celulares y/o matando microorganismos. Mediante un condensador y un
objetivo especial se controla la iluminación de tal manera que vaya en diferentes
rutas a través de las distintas partes de una célula. El resultado es una imagen con
diferentes grados de brillo y oscuridad. Con este método, el material menos denso
aparece brillante, mientras que las partes de la célula que tienen una densidad
cercana al H2O (citoplasma ) aparecen oscuras.
Materiales:
• Microscopio
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Cubeta de tinción
• Mechero
• Gotero
• Azul de metileno
• Aguja o ansa con mango
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Experiencias a realizar:
1. Observar células de la mucosa bucal y diferenciar en ellas algunas
estructuras.
• Raspar suavemente con una espátula de madera o un isopo la cara interna del
carrillo.
• Limpiar el producto obtenido,
• con un ansa o aguja con mango de Kohle.
• Depositarla junto con una gotita de agua sobre el portaobjetos.
• Hacer una extensión frotando con la aguja sobre el portaobjetos.
• Sosteniendo el portaobjetos por los bordes, pasarlo varias veces por la llama
del mechero, sin que llegue a quemar, para lograr la fijación por calor del
material que se quiere observar al vidrio del portaobjeto.
• Colocar el porta-objetos sobre el soporte de tinción encima de la cubeta.
• Agregar unas gotas de azul de metileno, dejando actuar el colorante 2 ó 3
minutos.
• Volcar el colorante sobrante y lavar la preparación hasta que no suelte color.
• Secar completamente el portaobjetos pasándolo por encima de la llama del
mechero.
• Colocar una gota de aceite de inmersión y observar al microscopio.
• Repetir procedimiento con una muestra, sin realizar tinción para observar en
microscopio de contraste de fases
• Graficar y describir lo observado en cada caso
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Cuestionario
¿Cuáles son las ventajas de la Microscopía de contraste de fases?
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