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1. GENERO
STAPHYLOCOCCUS
MICROBIOLOGIA VETERINARIA
COCOS GRAM
POSITIVOS

2. Descripción
■ Los estafilococos son cocos esféricos, Gram positivos, de aproximadamente 1 µm de diámetro,
generalmente dispuestos en forma irregular como racimos de uvas.
■ Son catalasa positivos, inmóviles, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos.
■ Fermentan carbohidratos y producen pigmentos que varían desde el color blanco hasta el
amarillo o dorado.
■ Actualmente, el género Staphylococcus consta de 32 especies y 15 subespecies. Algunos
estafilococos forman parte de la microbiota normal de la piel y las mucosas de los mamíferos y
las aves; otros están asociados con procesos supurativos, infecciones óseas, genitourinarias,
de piel, de tejidos blandos y oportunistas, septicemias e intoxicaciones alimentarias.

3. • Familia: Micrococcaceae
• Genero: Micrococcus y Staphylococcus
• Especies:
S. aureus
S. Intermedius
S. hyicus
S. Saprophyticus
S. Epidermidis
M. luteus

4. Historia
■ En 1880, Louis Pasteur, a partir de un cultivo en caldo del pus de un furúnculo y
de una osteomielitis, describió pequeños puntos reunidos en parejas de dos
granos o asociados en pequeños cúmulos.
■ El nombre de Staphylococcus (del griego, sptaphylé, en racimo de uvas) en razón
de su aspecto microscópico.
■ A partir de 1884, Rosenbach hace un estudio detallado de estas bacterias y
describe las variedades de pigmentación dorada y blanca.
■ En el año 1957, la 7" edición del Manual de Determinaciones Bacteriológicas de
Bergey señala la prueba de coagulasa como fundamental para separar a los
estafilococos en dos grandes grupos: el de los estafilococos coagulasa positivos
(ECP) y los estafilococos coagulasa negativos (ECN).

5. Habitat
■ Los ECN adquieren cada vez mayor importancia, por su capacidad de desarrollar
resistencia a los antimicrobianos de uso convencional en la clínica veterinaria.
■ Son comensales de la piel y las mucosas, en especial digestivas y rinofaringe. Es el
microorganismo más extendido que existe y su difusión en la naturaleza es
extraordinaria.

6. Morfología
■ Los estafilococos son células esféricas, con un diámetro. 1um y
grampositivos.
■ En las tinciones directas de las muestras clínicas, se encuentran
aislados, en pares o formando pequeñas cadenas.
■ Cuando provienen de un cultivo en agar nutritivos cocos se disponen
en agrupaciones que recuerdan un racimos de uvas.
■ No forman esporas. No presentan flagelos y algunas presentan una
capa de polisacáridos extracelulares.

7. Características de cultivo
■ El género no presenta exigencias nutritivas.
■ En medio liquido luego de 24 horas de incubación a 37 "C, se desarrollan
produciendo turbidez homogénea con abundante depósito en el fondo del
tubo y a menudo aparece un crecimiento en forma de anillo superficie el
medio que se adhiere a las paredes del tubo.
■ En medios sólidos, forman colonias redondas de 1 a 2 mm de diámetro
■ de contornos netos y superficie lisa, opaca o mucoide.

8. Según las especies, las colonias pueden ser de color blanquecinas al tomar contacto con el
aire o la luz, pueden ser pigmenta,
S. aureus produce colonias doradas, debido a pigmentos carotenoide que se forman
durante su crecimiento, de ahí el nombre especie.
Estos pigmentos no se difunden al medio, y en medio líquidos y en anaerobiosis no se
producen.
Existen medios selectivos diferenciales para el cultivo de Chapman, con NaCl al 7,5%,
manitol y rojo fenal como indicador de pH, o el medio Baird-Parker, con emulsión de yema
de telurito de potasio, utilizado para el aislamiento de estafílocos
partir de alimentos.
En este último medio, las colonias de S. aureus aparecen negras, brillantes y convexas,
rodeadas de un halo.
Con agar sangre produce hemolisis beta.

9. CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS
Los estafilococos son catalasa positivos. Utilizan los hidratos de carbono tanto
por oxidación como por fermentación.
La temperatura óptima de crecimiento es de 37°C y el pH óptimo es de 7 a
7.5
Respiración Son aerobios o anaerobios facultativos.
PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE LOS ESTAFILOCOCOS
S. aureus es la especie que más se ha estudiado. Los han sido objeto de
estudio en la última década, tanto en medicina humana como en medicina
animal.

10. PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE LOS ESTAFILOCOCOS
S. aureus es la especie que más se ha estudiado. Los han sido objeto de estudio en la
última década, tanto en medicina humana como en medicina animal.
Capsula
La cápsula está constituida por polisacáridos unidos laxamente la pared celular. Se han
identificado 11 serotipos capsulares - S. aureus.
La mayor parte de los
aislamientos responsables de mastitis
bovina se asocian con los serotipos 5 y 8
La cápsula protege a las
bacterias de la fagocitosis
por los leucocitos
polimorfonucleares.

11. Cell-Associated Virulence Factors
Pared celular
El peptidoglucano de la pared celular es
importante en la patogenia de la infección.
Estimula la producción de interleuquina-I , de anticuerpos opsónicos en los
monocitos, la agregación de los leucocitos polimorfonuclerares
(responsable de la formación de abscesos), posee actividad parecida a las
endotoxinas, y activa al complemento.
La pared celular presenta
proteínas de superficie
y polisacáridos
• Capsule or slime layer (glycocalyx)
• Peptidoglycan (PG)
• Teichoic acid is covalently linked to PG and is species specific:
– S. aureus ribitol teichoic acid
(polysaccharide A)
– S. epidermidis glycerol teichoic acid
(polysaccharide B)
• Protein A is covalently linked to PG
• Clumping factor (bound coagulase)

12. Coagulasa y proteínas de superficie
La superficie externa contiene una proteína denominada factor de agregación o
coagulasa de unión, presente tanto en S. aureus como en S. hyicus.
Esta proteína se une al fibrinógeno por una reacción no enzimática y lo convierte en
fibrina insoluble, haciendo que los estafilococos se agreguen o formen grupos.
La detección in vitro da una reacción parecida a la aglutinación y permite evidenciar el
cumpling factor.
Existen otras proteínas de superficie relacionadas con la adherencia a los tejidos del
hospedador: las proteínas de unión colágeno, a la elastina y a la fibronectina.

13. Proteína A
La superficie de muchas cepas patógenas de S. aureus está cubierta de manera
uniforme con la proteina A.
Esta proteina, al combinarse con el fragmento F de las moléculas IgG (excepto IgG3),
produce agregación de cocos (impide la eliminación inmune mediada por anticuerpos) y
es capaz de activar el complemento.
Cada molécula de proteína A tiene cuatros sitios de unión al F.
La proteína A puede actuar como factor de colonización al adherirse a proteínas
involucradas en el proceso de hemostasis

14. Acidos teicoicos
Los polisacáridos más importantes son los ácidos teicoicos ligados al
peptidoglucano. Su fracción alcohólica es el ribitol en S. aureus y el glicerol
en S. epidermidis y en S. intermedius.
Los ácidos teicoicos, por sus uniones específicas a la fibronectina, median
en la colonización de los estafilococos a las superficies mucosas del
hospedador.
Cuando los ácidos teicoicos están unidos al peptidoglucano poseen
actividad inmunogénica.

15. S. aureus
PRODUCTOS CELULARES RELACIONADOS CON LA PATOGENICIDAD
S. aureus excreta varias proteínas con actividad biológica como enzimas y toxinas.
Enzimas
Coagulasa
Se considera que la presencia de coagulasa es indicador de patógeno potencialmente invasor.
La coagulasa soluble o libre es una proteína similar a una enzima que coagula el plasma oxalatado o citratado
del hombre o el conejo, por activación de una sustancia parecida a la protrombina (una globulina, factor de
reacción con la coagulasa).
La coagulasa puede depositar fibrina sobre la superficie de los estafilococos, alterando la capacidad fagocítica
de los macrófagos o su destrucción en el interior de éstos.
La determinación de la coagulasa libre se realiza colocando
en un tubo de hemólisis 0,5 mI de un cultivo de 24 horas en
caldo de estafilococs y 0,5 ml de plasma de conejo.
Se incuba a 37 °C-Lectura 4 y 24 Horas.

16. Catalasa
Los estafilococos producen catalasa, la cual convierte el
peróxido de hidrógeno tóxico en agua y oxigeno.
El peróxido se puede acumular durante el metabolismo
de la bacteria o después de la fagocitosis.
Hialuronidasa
La hialuronidasa hidroliza el ácido
hialurónico (mucopolisacaridos)-
Lipasas
Estas enzimas hidrolizan los lípidos.
Nucleasa
El papel en la patogenia de la infección
no se conoce con exactitud, pero se
considera que la termonucleasa o DNAsa
contribuye a la capacidad invasiva de los estafilococos.
Catalase
2H2O2  O2 + 2H2O
Streptococci vs. Staphylococci
• Coagulases (bound or free)
– Antigenic
• Hyaluronidase
– “spreading factor” of S. aureus
• Nuclease
– Cleaves DNA and RNA in S. aureus
• Protease
– Staphylokinase (fibrinolysin)
• Lipases
• Esterases
Virulence Factors
Extracellular Enzymes

17. Fibrinolisina
También denominada estafiloquinasa, es un activador del plasminógeno, disuelve las redes de fibrina,
aumentando la capacidad de invasión del microorganismo.
Beta-lactamasas
Las p-Iactamasas son codificadas por plásmidos transmisibles por mecanismos de transducción y
probablemente conjugación.
Las bacterias productoras de p-Iactamasas presentan resistencia frente a antibióticos p-Iactámicos
(penicilina G, ampicilina, ticarcilina, piperacilina y otros p-Iactámicos relacionados).

18. RESlSTENCIA
Dentro de las bacterias no esporuladas, son los más resistente en la desecación, sobre todo en los
exudados durante semanas se mantienen vivos a -30 °C en medios líquidos y a 60°C durante 30
minutos; también toleran las fluctuaciones de PH de 4 y 9, y las concentraciones de sal del 7,5%, que
se utilizan en los medios selectivos para su aislamiento.
ESTAFILOCOCOS COAGULASA NEGATIVOS
La identificación de los ECN, según Kloos y Schleifer, se realiza por las pruebas de oxidasa, sensibilidad
frente a novobiocina, deteccion de la enzima beta-galactosidasa y determinaciones como azúcares,
ureasa, fosfatasa alcalina, entre otras.
Algunas cepas de ECN producen slime o polisacárido extracelulares unido laxamente a las células.
Esta sustancia tiene capacidad adherencia, la cual facilita la colonización y su diseminación

19. CLASIFICACION SEROLOGICA, BACTERIOFAGICA o LISOTIPO
Los estafilococos pueden tipificarse por los antigenos presentes en su pared celular y capsular.
También presentan bacteriófagos que sirven para tipificarlos por su sensibilidad a ser lisados.
Este método de tipificación se utiliza para cepas de S. aureus de origen humano, bovino y aviar.
Estas clasificaciones se practican sólo en laboratorios de referencia para estudios epidemiológicos.
MODO DE INFECCION y TRANSMISION
Las infecciones pueden ser endógenas o exógenas, por inhalación, por contacto directo o por ingestión.
Portadores sanos que están infectados actúan como reservorio.

20. IMPORTANCIA DEL ESTUDIO DE LOS ESTAFILOCOCOS EN
VETERINARIA
■ Participan, en general, en los procesos purulentos, como osteomielitis, artritis, abscesos,
conjuntivitis, otitis, piómetra, infecciones urinarias, flemones.
■ Son responsables de enfermedades específicas; S. aureus es el principal agente etiológico
de la mastitis bovina y también de la botriomicosis equina (infección granulomatosa con
abscesos fistulosos del cordón espermático).
■ En perros y en gatos, S. intermedius causa diferentes infecciones: abscesos, piodermias,
otitis, conjuntivitis, mastitis, e infecta heridas.
■ S. hyicus produce epidermitis exudativa y poliartritis en cerdos.
■ En los animales, los ECN están evolucionando en la inducción de producción de patologías y
se encuentran involucrados con las mastitis subclínicas de las vaquillonas.
■ Las especies más frecuentes aisladas son: S. chromogenes, S, epidermidis, S.
saprophyticus, S. haemolyticus, S. carnosus, S. simulans y S. xylosus. En cabras, S. caprae,
S. chromogenes y S. epidermidis.

21. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
Muestras
Según la patología, las muestras pueden ser: frotis superficiales, pus, sangre, material aspirado de tráquea,
líquido cefalorraquídeo, orina, leche.
Pruebas para la caracterización del género
Una vez establecida la morfología, es decir la agrupación celular que presentan microscópicamente los cocos
grampositivos desarrollados en medio de cultivo, se determina:
1) La enzima catalasa que separa a los cocos que pueden estar presentes en una muestra clínica
2) Los criterios para diferenciar los géneros positivos a la catalasa
Pruebas para caracterización de las especies.
Una vez identifico el genero , las especies se caracteriza mediante pruebas.
Los criterios en ECN , coagulasa, morfología colonias, la pigmentación, resistencia a la novobiocina, oxidasa,
Voges Proskauer, ureasa, fosfatasa, beta-galactasidasa.
Pruebas Serologicas
Son de poco valor practico.

22. EPIDEMIOLOGIA
Todos los mamíferos poseen ECN en la piel, siendo frecuente la colonización transitoria
con S. aureus en los pliegues cutáneos húmedos.
Muchas infecciones pueden tener un origen endógeno (heridas, infecciones urinarias,
piodermias), otras se transmiten por contacto directo o por fomites (ropas, utensilios,
pezoneras contaminadas).
En la mastitis bovina, los estafilococos penetran en la glándula a través del canal del
pezón.
El manejo adecuado del rodeo lechero (equipo de ordeño que funcione correctamente;
desinfección de pezones después de cada ordeño; tratamiento de todos los cuartos
mamarios de las vacas al secado; tratamiento

23. TRATAMIENTO
Los estafilococos son ubicuos en la piel y es frecuente su introducción a través de las solución de
continuidad de la piel.
Una limpieza prolija de la herida y la aplicación de un antiséptico (solución de hexaclorofenol al 3%)
previene la infección.
El Estafilococo no es productor de betalactamasa
Es difícil erradicar los estafilococos patógenos de animales infectados, debido a que presentan la
capacidad de resistencia a la mayoría de los antimicrobianos.
La vancomicina es el antibiótico de elección

24. COCOS GRAM
POSITIVOS
GÉNERO Streptococcus

25. Cocos Gram Positivos
Aerobios o anaerobios faculativos Anaerobios
Racimos
Catalasa (+)
Glucosa
(-) (+)
Micrococcus Estafilococo
Coagulasa
(+) (-)
aureus capitis
cohnii
epidermitis
haemolyticus
hominis
hyicus
intermedius
saprophyticus…
Catalasa (-)
Duplas Cadenas
Sensible Soluble
optoquina bilis
(+)
S.pneumoniae
Streptococcus
Bilis Resistente
Fermenta esculina
SI NO
Enterococcus Otros Estreptococos
fecalis
faecium
avium
raffinosus
gallinarum
hirae…
Hemolisis
ß Grupo
S R anginosus…
S.pyogenes Otros…
bacitrac. Viridans
bovis. I,II

26. INTRODUCCIÓN
■ FAMILIA Streptococcaceae
■ COCOS GRAM + DE 0,5 A 2 MICRAS; DIVISIÓN EN UN PLANO (CADENAS)
■ INMÓVILES Y NO ESPORULADOS, ALGUNAS ESPECIES CAPSULADAS
■ ANAEROBIOS FACULTATIVOS
■ SON HABITANTES DE LA BOCA Y EL Y TRACTO RESPIRATORIO.
■ ALGUNAS ESPECIES SON PATOGENAS PARA EL HOMBRE Y LOS ANIMALES

27. TINCIÓN Y AGRUPACIÓN

28. AGRUPACIÓN

29. CARACTERÍSTICAS
■ CATALASA NEGATIVOS (DIFERENCIA CON Staphylococcus)
■ NO POSEEN CITOCROMOS, OXIDAN COMPUESTOS ORGÁNICOS
Y FERMENTAN AZÚCARES
■ MEDIOS ENRIQUECIDOS (SANGRE, SUERO) CRECEN MEJOR EN
MICROAEROFILIA

30. CÁPSULA

31. CLASIFICACIÓN
■ PIÓGENOS: ASOCIADOS A FORMACIÓN DE PUS
■ S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. suis, S. pyogenes, S. canis, S. equi, S.
bovis, S. equinus, S. uberis, etc.
■ ORALES: HABITAN EN CAVIDAD BUCAL Y VÍAS RESPIRATORIAS SUPERIORES
DE ANIMALES Y HOMBRE
■ S. salivarius, S. sanguis, S. mitis, etc.

32. HABITAT
■ Son saprofitos que se encuentran en el medio
ambiente.
■ Se hallan como residentes en la boca, el tracto
respiratorio, piel, mucosas del hombre y de los
animales.
■ Algunos tienen la característica de ser muy patógenos

33. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
■ MEDIOS ENRIQUECIDOS (SANGRE, SUERO)
■ MEDIOS SELECTIVOS (CRISTAL VIOLETA, SULFATO DE TALIO, etc.)
■ COLONIAS DE 0,5 A 2 mm, REGULARES, CONVEXAS, TRANSPARENTES U
OPACAS.
■ LAS CEPAS PRODUCTORAS DE CAPSULA SUELEN DAR COLONIAS DE TIPO
MUCOIDE

34. IDENTIFICACIÓN
■ PRUEBAS BIOQUÍMICAS Y SEROLÓGICAS
■ TOLERANCIA A NaCl Y SALES BILIARES
■ AGRUPACIÓN EN BASE A ANTÍGENOS DE PARED

35. ESPECIES DE IMPORTANCIA VETERINARIA
■ S. agalactiae: GRUPO B, CAUSANTE DE MASTITIS, PARÁSITO OBLIGADO DE GLÁNDULA
MAMARIA
■ S. dysgalactiae: GRUPO C, MASTITIS, POLIARTRITIS, etc.
■ S. uberis: NO AGRUPADO, SOBREVIVE EN AMBIENTE Y SOBRE ANIMAL

36. ESPECIES
■ S. equi subsp. equi: PAPERA EQUINA
■ S. equi subsp. equisimilis/zooepidemicus: EQUINOS: INFECCIONES
NEONATALES, ABSCESOS, ENDOMETRITIS, MASTITIS PORCINOS:
SEPTICEMIA, ARTRITIS, ENDOCARDITIS, INFERTILIDAD

37. ESPECIES
■ S. suis: GRUPO D, CAPSULADOS (34 SEROVARES DISTINTAS)
■ CERDOS: MENINGITIS, ENDOCARDITIS, NEUMONÍA, ARTRITIS,
SEPTICEMIA, etc.
■ HOMBRE: SEPTICEMIA, MENINGITIS, ENDOCARDITIS (ZOONOSIS)
■ ASOCIADA A MANIPULADORES DE CARNE Y MATARIFES

38. RESISTENCIA
■ SON MICROORGANISMOS MUY SENSIBLES A LAS VARIACIONES DE TEMPERATURA.
■ GENERALMENTE TODAS LAS ESPECIES MUEREN A 60°C DURANTE 30 MINUTOS.
■ SON SENSIBLES A LOS COMPUESTOS YODADOS Y FENOLICOS, ASI COMO A UNA
GRAN VARIEDAD DE ANTIMICROBIANOS

39. COCOS GRAM
POSITIVOS
GÉNERO Enterococcus

40. INTRODUCCIÓN
■ FAMILIA Enterococcaceae
■ COCOS GRAM + DE 0,6 A 2,5 MICRAS; SE AGRUPAN EN PARES O EN CORTAS
CADENAS
■ INMÓVILES O MOVILES POR ESCASOS FLAGELOS, ALGUNAS ESPECIES
CAPSULADAS, NO FORMAN ESPORAS
■ ANAEROBIOS FACULTATIVOS
■ SON AMPLIAMENTE DIFUNDIDOS EN LA NATURALEZA, PARTICULARMENTE EN
HECES, EN ALGUNOS CASOS PRODUCEN ENFERMEDADES PIOGENICAS

41. HABITAT
■ Son bacterias ubicuas presentes en el tracto intestinal,
respiratorio y genitourinario y en la piel del hombre y
de los animales.
■ Se encuentra también en agua dulce y salada, en el
suelo y vegetales
■ son comensales de la microbiota intestinal de los
mamíferos