1. Taller 2 Maracaibo, 4 de mayo de 2011 Cocos Gram Positivo Staphylococcus y Streptococcus Victor Urdaneta MaiteTrompiz Isabel Urdaneta StefanyTroconis MaríaUrdaneta

2. Cocos tipo morfológico de bacteria esférica (del griego kókkos, grano) Diplococo Estafilococo Estreptococo Tetracoco Estafilococos esféricas anaerobio facultativas de casi 1mm de diámetro dispuestas en grupos irregulares y son Gram positivas Son Staphylococcus Por ello se observan de color púrpura

3. Características de los Staphylococcus * Son inmóviles. * No presentan endosporas. * Presentes en la piel y en la mucosa del ser humano (Staphylococcus epidermidis). * Existen Staphylococccus capsulados que son algunas cepas del S. aureus. Amarillo intenso Blanco * Fermentan carbohidratos y producen pigmentos que van y * Producen catalasa que convierte el peróxido de hidrógeno (antígeno) * Producen coagulasa que los protege de la fagocitosis. * Causan hemolisis por acción de la toxina α y β. * Producen toxinas exfoliativas que provocan la descamación generalizada del síndrome de la piel escaldada. * El Staphylococcus aureuses resistente a la penicilina por la producción de β-lactamasa.

4. Especies de Staphylococcus

5. Pruebas diagnósticas de laboratorio Muestras Líquido cefalorraquídeo Esputo Pus Sangre Frotis Pus -No se pueden determinar si son patógenos o saprófitos -Solo se observa la forma, agrupación, comportamiento al Gram de los Staphylococcus Esputo Se observan las colonias típicas A las 18 hrs. de incubación Agarsangre Se observan hemólisis y producción de pigmentos Cultivo A los días Agarsal y manitol No tienen requerimientos nutricionales altos Para detectar el Staphylococcus aureus mixta

6. Gota de peróxido de hidrógeno Portaobjeto o Método 1: Prueba de la catalasa tubo de ensayo Solución de peróxido de hidrógeno Método 2: Agar inclinado Prueba de coagulasa - Caldo de cultivo Formación de coágulo 4 hrs. Plasma citratado 1:5 37° C - Colonias en crecimiento en Agar Prueba de la presencia de desoxirribunocleasa Se siembra Staphylococcus en una placa que contiene ADN y verde de metilo Si se forma un halo transparente alrededor de la siembra Se incuba por 18 hrs.

7. Estreptococos Streptococcus, griegostreptossignifica que se dobla o retuerce con facilidad Son cocos Gram positivos agrupados en cadena Son mas complejos que los Staphylococcus y se clasifican según el grado de hemólisis Se clasifican en: Producen hemólisis total de los glóbulos rojos observándose como un halo transparente alrededor de las colonias β-hemolíticos Se libera hemoglobina Streptococcuspyogenesrepresentan a la gran mayoría de los patógenos humanos son sensibles a la bacitracina Grupo Streptococcusagalactiaeforma parte de la flora natural de las vías urinarias femeninas en ocasiones son sensibles a la bacitracina Grupo Se puedenencontrar en la faringe y causar sinusitis, bacteriemia y endocarditis y se puedenconfundir con los estreptococos del grupo A Grupo y Streptococcus faecalisyStreptococcus faecium Enterococos Son inhibidos pero no destruidos por la penicilina Grupo Streptococcus bovisyStreptococcus equinus No enterococos Son destruidos por la penicilina Grupo , , Es difícil encontrarlos en enfermedades humanas y -

8. Producen hemólisis parcial de los glóbulos rojos (αhemolíticos) α-hemolíticos No produce constituyendo los δ hemolíticos Liberando pigmento verde Streptococcusviridans: constituyen la flora normal de las vías respiratorias y son importantes en el estado de salud de las mucosas pueden llegar a la sangre por lesiones traumáticas Streptococcussalivarius Streptococcusmitis Streptococcusmutans En caso de llegar a la cavidad bucal Por la producción de polisacáridos Streptococcus sanguis Grupo Son α-hemolíticos pero se comportan como enterococos *Poseendiferentecapacidadparaproducirhemólisis Grupo *Es raroencontrarlos en enfermedadeshumanas *Se conocen como Estreptococos lácticos porque cortan la leche *Se desarrollanbajocondicionesanaerobias Peptoestreptococo *Hemólisis variable *Se encuentran en la flora normal de intestino y vías urinarias femeninas

9. Enfermedades causadas por Streptococcus Streptococcusβ-hemolíticos Enfermedades por invasión del Streptococcus Piel Streptococcuspyogenes Erisipela Fiebre peuperal Útero Produce: Infecciones generalizadas Infecciones de heridas traumáticas o quirúrgicas Enfermedades por infección local del Streptococcus Faringitis estreptocócica, es la infecciónmascomún causada por el Streptococcus β-hemolíticos. Puede causar Pioderma estreptocócica Impétigo Erupciones cubiertas de costras

10. Endocarditisinfecciosa Endocarditisbacterianasubaguda Endocarditisbacterianaaguda Afectan las válvulas cardiacas normales o con deformaciones Afectan las válvulas cardiacas anormales causada por flora normal de que llega a la sangre por lesiones traumáticas

11. Pruebas diagnósticas de laboratorio β-hemolíticos α-hemolíticos Bilis esculina Sensibilidad a la bacitracina PYR Hidrólisis del PYR Sensibilidad a la optoquina Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado) Prueba de CAMP

12. β-hemolíticos Sensibilidad a la bacitracina Se usa para separar a los Streptococcuspyonegesde los demás β-hemolíticos Sembrar un gran inóculo en una placa de Agar sangre se coloca el disco de bacitracina Se incuba de 18-24hrs a 37° C Se forma un halo de inhibición de crecimiento de cualquier diámetro Hidrólisis del PYR (Pirridonilβ-naftilamida) Se usa para separar a los Streptococcuspyonegesy Enterococos de los demás β-hemolíticos Porque tienen la capacidad de hidrolizar el sustrato PYR gracias a la enzima L-piroglutamil Si hay un cambio de color

13. Prueba de CAMP CAMP ( Factor de monofosfato de adenina cíclica) Se usa para separar a los Streptococcusagalactiaede los demás β-hemolíticos Consiste en sembrar una estría de Staphylococcus productor de betalicina en Agar sangre Perpendicular a esta de 3-4mm de distancia una estría de Streptococcusβ-hemolíticos del grupo B Se incuba de 18-24hrs a 37° C Si hay una zona de potenciación de hemólisis en forma de punta de flecha

14. α y δ hemolíticos Separa los Streptococcus del grupo D de los demás grupos de Streptococcus Bilis esculina Sembrar el inoculo en tubos de Agar bilis esculina inclinado pero la concentración de la bilis el al 40% Si se torna negro el medio Sensibilidad a la optoquina Se usa para diferenciar el Streptococcusneumoniaede los demás αhemolíticos Estriarunaplaca de Agar sangre con una suspension de Mc Farland 0.5 Colocar un disco de optoquina Se incuba de 18-24hrs a 37° C Si hay un halo de inhibición mayores de 15mm es característicos del Streptococcusneumoniae

15. Prueba de tolerancia a la sal (Caldo salado) Separar los Enterococos capaces de crecer en caldo salado de otros Streptococcus del grupo D Se inocula el caldo salado con la cepa del Streptoccocus del grupo D a estudiar Se incuba de 18-24hrs a 35° C Si aparece turbidez con o sin acidificación del medio Se le agrega un indicador de pH Púrpura de bromocresol

16. Diferencias

17. Semejanzas Son bacterias Gram positivas Son anaerobias facultativas Son de forma esférica por eso reciben el nombre de cocos Obtienen energía mediante la fermentación de los carbohidratos Pueden ser diagnosticados mediante frotis y cultivos

18. Streptococcus pneumoniae(Neumococo) *Diplococos encapsulados *Se observan en cadenas cortas Permite tipificarlos con antisueros específicos Cápsula de polisacáridos Impide su reconocimiento por parte del hospedador, eludiendo su fagocitosis *Gram positivos * Son habitantes normales de las vías respiratorias superiores de los humanos Pueden causar: Neumonía, sinusitis, otitis, bronquitis, meningitis y otros procesos infecciosos Se observan con frecuencia en muestras Esputo Pus De cultivo joven

19. Identificación de laboratorio Lisis de los neumococos en minutos al añadir bilis de Buey (10%) o desoxicolato sódico (2%) a un caldo de cultivo o suspensión de microorganismos con pH neutro Sobre medio solido el crecimiento de ellos se inhibe alrededor de un disco de optoquina Virulencia casi uniforme en ratones cuando se inyectan vía intraperitoneal

20. Factores que disminuyen la resistencia al Neumococo 40-70% de los humanos son portadores del neumococo virulento en algún momento Dinámica circulatoria anormal Intoxicación alcohólica o con drogas Anormalidades del aparato respiratorio e infecciones virales Congestión pulmonar Deprime actividad fagocitaria acumulación anormal de moco Facilita la aspiración de materiales extraños Disminuye el reflejo de la tos Insuficiencia cardiaca

21. Patología Exudación de líquido fibrinoso edematoso a los alveolos seguidos por eritrocitos y leucocitos que producen consolidación en el pulmón Neumococos alcanzan el torrente sanguíneo por la vía de drenaje linfático de los pulmones. Células mononucleares fagocitan activamente los residuos y gradualmente se reabsorbe esta fase liquida Los fagocitos captan y digieren en su interior los neumococos. Bacteriemia

22. Pruebas diagnosticas de laboratorio: Se extrae sangre para cultivo y se recolecta esputo para demostrar la presencia de neumococos mediante frotis y cultivos. Examen de esputo : - Frotis con tinción de Gram - Prueba de tumefacción de cápsula: esputo fresco que se mezcla con antisuero Se observa tumefacción de la capsula o el exudado peritoneal también se usa (opcional) - Cultivos: esputo sobre agar sangre e incubado en CO2 con la técnica de la vela. Hemocultivo. - Meningitis neumónica: examen y cultivo del LCR

25. Neumolisina

27. NeumolisinaPatogenia Envejecimiento del sistema inmune Ausencia de anticuerpos anticapsulares Disminución en la producción de anticuerpos