1. CULTIVO Y AISLAMIENTO DE
ESTAFILOCOCOS DE MUESTRA DE
PIEL

2. 
OBJETIVO: Estudiar las características de los
microorganismos del grupo de los estafilococos, y su
relación con su patogenia en la piel.

3. CARACTERÍSTICAS
-
Células esférica casi de 1 um
-
En racimo
-
Colonias lisas, prominentes,brillantes
-
Gram +
-
Fermentan
carbohidratos
(glucosa, maltosa, sacarosa) con producción de
ácido láctico pero, no gas.

4. -
Producción de pigmentos
-
Crecimiento óptimo 37⁰C (mesófilos)
-
Catalasa +
-
De los estafilococos, S.aureus es el único que tiene
coagulasa-positiva.
-
El género Staphylococcus se compone actualmente de
33 especies.
-
No Produce esporas

5. 
Los Staphylococcus de importancia médica son:
a) S. aureus
b) S. epidermidis
c) S. saprophyticus

6. -Alfa: Produce una coloración verde
sobre y alrededor de la colonia
-Beta: Produce una hemolisis total de
los eritrocitos que rodean la colonia, y en
ocasiones de mayor tamaño (colonias
doradas).
-Gamma: Efectos sobre los eritrocitos,
son estreptococos no hemolíticos.
Toxinas
PATOGENIA
Enzimas
Coagulasa: actúa transformando el
fibrinógeno en fibrina
Lipasas: permiten colonizar aéreas en
la piel
Hialuronidasa: actúa sobre el ácido
hialuronico
Nucleasa: Actúa sobre el ADN
Enterotoxinas
Provocan intoxicación
y envenenamiento por
la ingestión de
alimentos
contaminados

7. TIPOS DE CULTIVO

Vogel Johnson Agar.
Medio utilizado para la rápida detección de estafilococos coagulasa
positivo fermentadores de manitol. Por inoculación directa: sembrar en
forma masiva.
Staphylococcus aureus
Colonias negras, rodeada de
una zona amarilla.
Staphylococcus
epidermidis
Negras, pequeñas, sin zona
amarilla alrededor.

8. 
S 110.
Para el aislamiento y diferenciación presuntiva de
estafilococos, en base a la producción de pigmentos, la fermentación
de manitol y la hidrólisis de gelatina, a partir de alimentos y otras
muestras.
Directa,
en
superficie,
por
estriado
o
por
extensión. Siembra directa, en superficie, por estriado o por
extensión.
Microorganismo
Pigmento Fermentaci
ón de
manitol
Hidrólisis
de la
gelatina
Prueba de
la
coagulasa
S. aureus
+
+
+
+
S. epidermidis
-
-
+
-

9. 
Agar sal manitol, muestra la fermentación de manitol de los
estafilococos.
+
Colonias se verán
amarillas rodeadas de
una zona del mismo
color.
-
Colonias rojas rodeadas
de una zona del mismo
color o purpura.

10. 
Agar sangre
El objetivo de la siembra es
el cultivo de muestras diversas para
obtener crecimiento bacteriano en colonias aisladas ( cultivo y
aislamiento), además del estudio de reacciones hemolíticas en una
amplia variedad de microorganismos.

11. IMPORTANCIA MÉDICA
Agente etiológico de un gran número de enfermedades en el
hombre
Todos los tejidos de la economía pueden ser colonizados e
infectados

12. 
Pueden desarrollar resistencia: La colonización es
un gran peligro

13. 
ENFERMEDADES
Impétigo
Forúnculo
Celulitis
Abscesos
 Ántrax estafilocócico
Pénfigo del recién nacido

14. OTROS APARATOS Y SISTEMAS
Aparato respiratorio:
Sinusitis, Otitis, Faringitis, neumonitis, abscesos
pleurales,
 Aparato Digestivo: Enterocolitis, Absesos en
hígado, peritonitis, intoxicación,
 SNC: Meningoencefalitis,
 Aparato genitourinario: Cistitis, prostatitis, nefritis
 Sistema cardiovascular:
Endocarditis, miocarditis, pericarditis
 Ojos y anexos: Conjuntivitis, foliculitis,
 Septisemias


15. PROCEDIMIENTO
1.
Dividir las cajas con medio de cultivo en dos, con un lápiz graso.
2.
En una de las secciones sembrar la cepa de Staphylococcus aureus
por estría cruzada, en cada una de las cajas de medio de cultivo.
3.
Con un hisopo estéril, tomar la muestra de piel, oprimiendo
suavemente.

16. MATERIAL
1 Gradilla
 1 Mechero
 1 Placa de agar sangre
 1 placa de agar sal manitol
 1 Placa de agar S-110
 1 Paquete de isopos
 1 Cepa Staphylococcus aureus
 Microscopio opcional y aceite de inmersión y
colorantes para tinción Gram


17. 4. Descargar la muestra en la otra sección
5. La prueba de la coagulasa se efectúa tomando una asada de la cepa
e inocular por suspensión en el tubo de plasma citratado, incubar a 37
⁰C durante 4, 8 y 24 hrs, observar la formación de coágulo. Si en este
tiempo no se ha formado reportar la prueba como negativa.

18. 6.
Para efectuar la prueba de la catalasa, tomar una asada de la cepa
y suspender en una gota de agua sobre un porta objetos,
adicionarle una a dos gotas de peróxido de hidrógeno y esperar la
formación inmediata de burbujas, de ser así reportar la prueba
como positiva.
7.
Hacer una tabla donde se indiquen todos los resultados
8.
Interpretar resultados

19. BIBLIOGRAFÍA


Pahissa, Albert, Infecciones producidas por Staphylococcus
aureus, Marge medica books;2009.
Romero Cabello R, Microbiología y parasitología
humanas, 3ra Ed., Edit. Médica Panamericana, México, 2007