ppt para la preparacion del primer practico de microbiologia labs 1 y 2

1. 1º Practico de
Microbiología
Nicolas Mora

2. EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Sthapylococcus Epidermidis Endocarditis subagudas
Sthapylococcus aureus Shock tóxico, osteomielitis maxilar
Micrococcus Sp. Infecciones en amígdalas
FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
CocoCoco
Gram +Gram +
RacimoRacimo

3. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
CocoCoco
Gram +Gram +
CadenasCadenas
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Streptococcus mutans Inicio de placa cariogénica
Streptococcus agalactiae meningitis
Streptococcus salivarius Caries dentales, sepsis

4. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
CocoCoco
Gram +Gram +
TétradasTétradas
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Micococcus tetragenus Absesos en partes blandas
Micrococcus sp Infecciones en Amigdalas

5. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
Bacilos pleomorficosBacilos pleomorficos
Gram +Gram +
Empalizada letra ChicaEmpalizada letra Chica
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Corynebacterium sp Abceso pulmonar, endocarditis bacteriana
Listeria sp Gastroenteritis, meningitis

6. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
Bacilos finosBacilos finos
Gram +Gram +
Aisladas, diplo, cadenas,Aisladas, diplo, cadenas,
empalizadasempalizadas
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Listeria sp Gastroenteritis, meningitis
Clostridium perfringes Micronecrosis y gangrena gaseosa

7. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
BaciloBacilo
Gram +Gram +
CadenasCadenas
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Bacillus rothia Caries dentales

8. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
CocoCoco
Gram -Gram -
Diplo arriñonadoDiplo arriñonado
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Neisseria gonorrhoeae lesiones blanquecinas amarillentas en paladar, lengua, encia

9. FORMASFORMAS
LEVADURIFORMESLEVADURIFORMES
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Candida albicans Candidiasis, neumonitis

10. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
BacilosBacilos
Gram -Gram -
AisladosAislados
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Pseudomonas aeroginosa piocianosis

11. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
BacilosBacilos
Gram -Gram -
Aislado,Aislado,
diplo.diplo.
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Klebsiella pneumoniae infeccion en la mastoides

12. FORMA:FORMA:
TINCION:TINCION:
AGRUPACIÓN:AGRUPACIÓN:
BacilosBacilos
Gram -Gram -
AisladosAislados
EJEMPLOS PATOLOGÍAS
Echerichia coli sepsis bacteriana

13. BAAR Ziehl NielsenBAAR Ziehl Nielsen
(Bacilos Acido Alcohol Resistentes(Bacilos Acido Alcohol Resistentes

14. Realización de Técnica de Gram
1. Se toma una muestra por ejemplo una gota de saliva con una asa
estéril y la montamos sobre un portaobjeto limpio.
2. Se fija la muestra al porta objetos para que el lavado y la aplicación
de colorantes no la arrastre, entonces se pasa sobre fuego a tal altura
que la llama no queme nuestras manos y por ende tampoco las
bacterias.
3. Luego se tiñe con cristal violeta, que aparte de dar coloración, inhibe
las bacterias gram (+), se aplica este colorante durante 1 minuto y
luego se lava.
4. Después del lavado se aplica Lugol, que va fijar el cristal violeta a la
muestra. También se aplica durante 1 minuto y vuelvo a lavar la
muestra.
5. Lugo por 20 segundos le aplico alcohol acetato, con el fin de
decolorar las bacterias gram (-) que hasta acá eran de color violeta y
gracias al alcohol se vuelven incoloras y vuelvo a lavar.
6. Por ultimo por 30 segundos aplico safranina, que le dará contraste a
la muestra.

15. Factores de Virulencia

16. Agar Sangre ( 5% a 10%)
α-hemólisis α-hemólisis : degradación parcial de la hemoglobina.(halo opaco)
β-hemólisis: degradación total de la hemoglobina.(halo transparente)
γ-hemólisis: no hay degradación.(sin halo)
Colonia
bacteriana
β-hemólisis
(transparente)
Agar sangre
α-hemólisis
(opaco)
γ-hemólisis
(sin halo)
*En este medio crecen bacterias no exigentes y la mayoría de las
exigentes. En este caso se sembraron bacterias hemolíticas.
*Con esto sabemos si la bacteria es capaz de romper la membrana de
los glóbulos rojos o no.

17. Micrococo en
agar sangre
Serratia
Esta bacteria tiene esta
pigmentación roja
naturalmente.
candida

18. Placas Petri en Agar Sangre
D= Desarrollo
S/D= Sin desarrollo
D
S/D
D

19. Placas Petri en Agar Nutritivo (es un agar básico)
D= Desarrollo
S/D= Sin desarrollo
DS/D
D

20. Petris en Agar Chocolate
D D
S/D
D= Desarrollo
S/D= Sin desarrollo

21. Medio de cultivo
Mconkey.
En este medio normalmente
crecen bacterias no
exigentes, es un medio
básico o corriente.
En este caso crecen
solamente bacilos Gram (-),
ya que es un medio selectivo
y diferencial gracias al cristal
violeta (que le da la
coloración al medio e inhibe a
los gram (+)) y a las sales
biliares respectivamente.

22. Medio de cultivo Mconkey.
Acá tenemos una prueba para ver si estas bacterias, Scherichia coli y la
klebsiella pneumonae, son lactosa (+) o (-).
A ambas placas se le agrega
Lactosa y luego rojo neutro:
• si la bacteria es lactosa (+): las
colonias se tiñeran de rojo, ya
que el medio se ha vuelto mas
ácido.
•Si la bacteria es lactosa (-): las
colonias permanecerán incoloras
y el medio no sufrirá cambios de
pH.
Lactosa (+)
Lactosa (-)

23. Medio de Cultivo Brind Parker
Brind
Parker
colonia
colonia
S. epidermidis: esta bacteria es Lipasa
(-), ya que al poseer un halo totalmente
transparente nos indica que hay
proteolisis, por ende la bacteria tiene
proteasas, no hay lipasas.
proteolisis
S. aureus: esta bacteria es lipasa (+) ya
que tiene un halo opaco y hacia el exterior
un halo transparente, el halo opaco
corresponde a lipasa o lecitinasa y el
transparente a la proteolisis de las
proteasas.
* Este medio es un medio enriquecido tiene yema de huevo lo que lo
torna de un color amarillo opaco en el crecerán bacterias no exigentes y
algunas exigentes.

24. DNAsa
El medio tiene ADN lo que pasa es que si
esta bacteria tiene esta enzima va a degradar
el ADN, si no la tiene el ADN va a
permanecer en el medio.
Al medio que tiene ADN a las 24 horas le
agrego HCl, este ADN va precipitar como un
precipitado blanco. Si yo tengo una bacteria
que tiene ADNasa lo que va a pasar es que
alrededor no hay ADN porque lo degrado de
la enzima, por lo tanto no hay ADN para ser
precipitado por el HCl y este queda
transparente, si fuera ADNasa (-) al agregar
el HCl se vería blanco, turbio alrededor de la
colonia.
DNAsa (+)
DNAsa (-)

25. Coagulasa
En un tubo se coloca plasma citratado de conejo y
se le agrega cultivo puro de una cepa en estudio y
se incuba. Si la bacteria tiene la enzima
coagulasa, va a coagular este plasma, si no la
tiene no coagula. Entonces en el tubo donde la
sangre se coagula, se encuentran bacterias
coagulasa (+).
Este método se usa para los staphylococcus para
saber que especie es , porque hasta hace unos
tiempos se consideraba que el único patógeno era
el S. aureus este es coagulasa (+), no es el único ,
hay otros mas que se encuentran en el hocico de
los animales.
Si la bacteria posee la coagulasa, transforma el
fibrinogeno que posee el plasma en fibrina por eso
forma el coagulo.
Esta prueba se pude hacer en tubos como en
laminas, en las laminas vamos a ver grumos,
aglutinación cuando es coagulasa (+)
Coagulasa (+)
Coagulasa (-)

26. CatalasaActúa sobre el H2O2 (peroxido de hidrogeno).
Se siembra en un tubo o lamina, en un medio que no tiene glóbulos rojos, la bacteria
que queremos ver si produce la catalasa y se le agrega agua oxigenada , si tiene la
enzima va a descomponer el agua oxigenada en O2 y H2O y lo que vamos a observar es
el O2 en forma de burbuja. Si es negativa no hay producción de burbuja.

27. Factores Químicos o Físicos

28. En este laboratorio, para hacerles
recuerdo, vimos una serie de tubos, cada
uno con características diferentes,
(diferentes niveles de PH o de salinidad o
de oxigeno, etc.), para ver en cual de
estas condiciones ciertas bacterias podían
desarrollarse mejor. A mayor desarrollo de
bacterias mayor opacidad en el fluido del
tubo. (miren la foto, en el del medio hay
mayor desarrollo).
También vimos unas placas Petri, si
veíamos colonias la bacteria crecía en esa
condición y si no hay colonias no crecía.
( las colonias estaban dadas por estrías en
el gel).

29. Agar
agar
Agar
nutritivo
Agar
sangre
clasificación tipo
E. coli No Si Si Bacteria no
exigente
Bacilo gram (-)
S. Aureus No Si Si Bacteria no
exigente
Coco racimo
S. Pyogenes No No Si Bacteria
exigente
Coco gram (+)
Vibrio No Si Si Bacteria no
exigente
Bacilo gram (-)
Prevotella no no no Bacteria
exigente
Nutrientes
*el agar nutritivo es un agar básico no enriquecido.

30. Niveles de oxigeno
21% 14-17% 2-8% clasificación
S:aureus si Si Si Aerobia facultativa
N gonorrea No Si No Microaerofila
L.perfungins No No Si Anaerobia
Micrococcus
luteus
Si No No Aerobia
treponemas No No No Anaerobia estricta
(-0.5%)

31. Niveles de Ph
4 - 6 6 - 7 8 - 9 clasificación
Lactobacilo
acidofilo
+ - - acidófila
Vibrio
parahemolitico
- - + basófila
Streptococcus
neumonian
- + - Neutrófila

32. Salinidad
NaCl 0 0.9 4.5 1.5 clasificación
S.aureus + + + + No Halófilo o
facultativo
E. coli + + - - No halófilo
Vibrio
fisheri
- - + - Halófilo

33. Control de
microorganismos

34. Bueno como recordaran en este laboratorio teníamos que medir los
diametros de los halos producidos por antibióticos sobre algunas bacterias
(halos de inhibición), según lo que median se evaluaba en una tabla adjunta
si era sensible o resistente al antibiótico.
También vimos desinfectogramas, algo similar pero con desinfectantes, acá
también mediamos halos pero no es necesario, basta con observar si hay
existencia de halo o no, si hay halo la bacteria es sensible y si no lo hay es
resistente.

35. Agar Miller Hinton
Antibiótico Sensible
(menor o igual a)
CIP Ceprofloxacina 21 mm
SAM Ampicilina 15 mm
Pl Penicilina 20 mm
EM Eritromicina 13 mm
CXM Ceproxacimo? 18 mm

36. Éxito!