Capitulo 14. bacilos gram positivos dr. gonzalez cabeza

1. ______________________________________________________ José González Cabeza.
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1. CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO Listeria
El género Listeria incluye bacilos Gram positivos cortos, no esporulados, que aparecen
solos o en cortas cadenas. Las colonias son pequeñas, lisas y de color gris. Las especies del género
Listeria crecen en un rango de temperatura de 1-45o
C, con una temperatura óptima entre 30 y
37o
C, y producen colonias pequeñas, lisas y de color grisáceo.
Tienen la capacidad de crecer en un rango de pH de 5.5-9.5 y a una concentración de NaCl
de hasta 10%. Su metabolismo es anaerobio facultativo. Las especies de Listeria presentan un
movimiento rotatorio de un extremo a otro a temperatura ambiente (22-25o
C), pero no a 37o
C. La
gran mayoría de los aislamientos son catalasa positiva y oxidasa negativa. La clasificación
antigénica se basa en la tipificación de los antígenos O y H. Actualmente se han descrito las
siguientes especies en el género Listeria:
L. grayi
L. innocua
L.ivanovii
L.monocytogenes
L. murrayi
L. seeligeri
L. welshimeri
Todas las especies de Listeria son de amplia distribución en la naturaleza y se encuentran
en suelos y plantas, así como también contaminando vegetales, aguas, carnes, mariscos,
productos lácteos, etc. Solamente la especie L. monocytones puede provocar infecciones en
seres humanos, mientras que L. monocytogenes y L. ivanovii se pueden aislar de animales. L.
monocytogenes produce principalmente septicemia, meningitis y encefalitis en adultos
ancianos o con algún tipo de compromiso inmunológíco con baja inmunidad celular, como
transplantes, linfomas y SIDA. En mujeres embarazadas producen bacteremia y aborto y en
neonatos provocovan prematuridad, granulomatosis infantisepticum y meningitis.
2. CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO Erysipelothrix
El género Erysipelothrix incluye bacilos Gram positivos, no esporulados, no móviles, que
tienden a formar filamentos largos en cultivos viejos. El género Erysipelothrix abarca las especies
E. rhusiopathiae y E. tonsillarum, de las cuales únicamente la primera se asocia a infecciones en
el ser humano, como infecciones en piel, endocarditis, septicemia y artritis.
La especie E. rhusiopathiae se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza y es
un importante patógeno en animales como ganado porcino, aunque puede ser flora normal en
muchas especies animales. Su transmisión al ser humano se produce mediante el contacto de
personas como veterinarios, carniceros, pescadores y otros con pescados, mariscos, carnes,
ganado porcino y aves de corral contaminados.

2. Cap. 14. Bacilos Gram Positivos _____________________________________________
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3. CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO Corynebacterium
El género Corynebacterium está constituido por un gran número de especies con gran
heterogeneidad genética y fenotípica, y se caracterizan por ser bacilos Gram positivos,
pleomóficos, no esporulados, no encapsulados, no móviles, que pueden presentar gránulos
metacromáticos visibles mediante tinción con azul de metileno. Las especies de Corynebacterium
son catalasa positiva. Las especies de Corynebacteriurn están ampliamente distribuidas en el
ambiente, pudiéndose encontrar en suelos y agua, como también constituyen parte importante
de la flora normal en piel y mucosas del ser humano y de animales.
La especie más importante es C. diphteriae, la cual es el agente responsable de la
difteria, una infección del tracto respiratorio superior con efectos sistémicos debido a la
producción de la toxina diftérica. La toxina diftérica se encuentra genéticamente codificada por
un bacteriófago temperado, por lo cual no todos los aislamientos de C. diphteriae son
toxigénicos. C. diphteríae también puede causar difteria cutánea en piel traumatizada.
4. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN PARA Listeria, Erysipelothrix y Corynebacterium
Cuadro 14.1. Características fenotípicas de los géneros Listeria, Erysipelothrix y Corynebacterium.
Característica Listeria Erysipelothrix Corynebacterium
Morfo1ogía microscópica¹ BG+, cortos,
individuales o en
cadenas
BG+, cortos y/o
largos-filamentosos
BG+, ligeramente
curvos, tipo “letra-
china”
Catalasa + — +
Ureasa — — V
Motilidad (25°C) + — —
Producción de ácido de glucosa + + +²
Producción de H2S — + —
NO3 → NO2 —³ — V
¹ BG+, bacilos Gram positivos.
² Algunas especies no utilizan la glucosa.
³ L. murrayi reduce nitratos.
Cuadro 14.2. Características fenotípicas de especies de Listeria.
Característica L. monocytogenes L. innocua L. ivanovii
Hemólisis β² + — ++
Reacción de CAMP
S. aureus (hemolisina β+) + — —
R. equi — — +
Producción de ácido a partir de:
Glucosa + + +
Lactosa V + +
Manitol — — —
Ramnosa + V —
Ribosa — — +
Sacarosa — V V

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Xilosa — — +
NO3 → NO2 — — —
¹ +,  90% de cepas positivas; —, 10% de cepas positivas; V, 11-89 % de cepas positivas
² Hemólisis completa; ++, hemólisis amplia; +, hemólisis a veces sólo por debajo de la colonia.
5. ACTIVIDADES PRÁCTICAS
Día 1.
• Entrega de cultivos.
Listeria monocytogenes
Listeria ivanovii
Listeria innocua
Erysipelothrix rhusiopathiae
Corynebacterium sp.
• Describir la morfología colonial.
• Realizar frotis y tinción de Gram.
• Describir la morfología microscópica.
• Realizar las pruebas de catalasa y oxidasa.
• Inocular con cada una de las bacterias los siguientes medios para pruebas de identificación
bioquímica:
Caldo púrpura de bromocresol conteniendo al 1% los siguientes carbohidratos: glucosa,
maltosa, ramnosa, sacarosa, lactosa, xilosa, manitol y ribosa.
Caldo nitratos.
Agar urea de Christensen.
Agar TSI.
• Incubar los medios indicados anteriormente a 35-37o
C por 18-24 horas.
• Inocular el agar movilidad e incubar a temperatura ambiente por 18-24 horas.
• Inocular una placa de agar sangre preparada con eritrocitos ovinos o bovinos mediante
estría para realizar la prueba de CAMP. Para realizar esta prueba, la placa debe ser
inoculada en el centro por estría con una especie de Listeria. Posteriormente se inoculan
por estría perpendicular a la primera una cepa de Staphylococcus aureus productora de la
toxina (esfingomielinasa) y una cepa de Rhodococcus equi, sin tocar los sitios donde se
inocularon las otras bacterias, tal y como se muestra en la siguiente figura. Posteriormente
las placas deben ser incubadas a 35-37°C por 18-24 horas.

4. Cap. 14. Bacilos Gram Positivos _____________________________________________
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Día 2.
• Realizar la lectura de las pruebas bioquímicas.
• Realizar la lectura de la prueba de CAMP. Observe la presencia de sinergismo en el
efecto hemolítico.
6. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es el fundamento de la prueba de CAMP? ¿Por qué la prueba de CAMP debe realizarse
en una placa de agar sangre ovina o bovina y no en una placa de agar sangre humana?.
2. ¿Qué característica específica se observó en la prueba de motilidad para Listeria?.
3. ¿Qué importancia tiene la prueba de TSI para la identificación de Erysipelothrix?
7. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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Edit. Prentice Hall. 10ª Edic. 1011 pp.
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Hill. 7ª Edic. 1141 pp.
Jawetz, E.; Melnick, J.; Adelberg, A. – 1997 - MICROBIOLOGÍA MÉDICA. Edit. Moderna. 18ª Edic.
México. 476 pp.
Joklik, W.; Willett, H.; Amos, B.; C. Wilfert – 1997 – ZINSSER, MICROBIOLOGÍA. Edit.
Panamericana. 20ª Edic. Bs.As. 1696 pp.
R. equi
Listeria
S. aureus

5. ______________________________________________________ José González Cabeza.
193
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MacFaddin – 2003 - PRUEBAS BIOQUÍMICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS DE
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