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Taller ‘Capacitación en Técnicas de Propagación
Vegetal’
Actividad 3. Propagación sexual: semillas y
germinación
Eduardo Tambussi
Capacitación en técnicas de propagación vegetal. Cronograma 2022
Horario de clases: 14 a 17 hs.
Actividad 1. Martes 1 de noviembre. Alejandra Carbone
Fundamentos y estructuras para la propagación vegetal.
Actividad 2. Jueves 3 de noviembre. Virginia Luquez
Ciclos ontogénicos de las plantas.
Actividad 3. Martes 8 de noviembre. Juan José Guiamet
El control de la floración. Inducción y diferenciación floral.
Actividad 4. Jueves 10 de noviembre Eduardo Tambussi
Propagación sexual: semillas.
Actividad 5. Martes 15 de noviembre. Daniel Gimenez
Propagación Asexual: Multiplicación por medio de estacas.
Actividad 6. Jueves 17 de noviembre. Gustavo Gergoff
Propagación Asexual: Acodos y sus formas naturales.
Actividad 7. Martes 22 de noviembre. Marcelo Gauna y Verónica Ayelén Aguirre
Propagación de especies nativas.
Ciclo biológico de las plantas con semilla
Roles de la semilla…
- Reproducción (sexual)
- Estado de resistencia
- Dispersión (diáspora)
¿ Qué es una ‘semilla’?
Es un óvulo maduro y fecundado conteniendo:
-Embrión
-Sustancia de reserva (endosperma, perisperma
o cotiledones)
-Cubierta protectora (testa)
Embrión
Representa a la nueva generación, luego
de la unión sexual de las gametas
- Eje embrional (originarán el vástago y la raíz)
- Cotiledones (1 en monocot., 2 en dicot., varios en coníferas)
Embrión
Embrión
Sustancias
de reserva
Sustancias
de reserva
cebada, trigo, avena
proteínas
Lípidos
Carbohidratos
soja
proteínas
Lípidos
Carbohidratos
maní
proteínas
Lípidos
Carbohidratos
Características de la semilla
- Poseen un bajo contenido porcentual de agua (en el orden del 5- 10%)
- El crecimiento del embrión se halla detenido
Semillas ortodoxas
(la mayoría de las
plantas de cultivo)
Semillas recalcitrantes
(= NO ortodoxas)
(v.g. algunos árboles tropicales,
palta, mango, café, Fagus etc.)
Semillas recalcitrantes
- NO toleran la deshidratación (> 25%) y bajas temperaturas
- Corta longevidad
Semillas ortodoxas
- Toleran la desecación y bajas temperaturas
- Más o menos longevas (según los casos)
Germinación:
es el restablecimiento del crecimiento del embrión
(previamente en reposo)
Tiempo
Fase 1 Fase 2 Fase 3
Emergencia
de la
radícula
Peso
Fresco
Fase
‘estacionaria’
Fases de la germinación-postgerminación
Emergencia radícula
Emergencia de la radícula
Emergencia de la radícula
Emergencia de la radícula
Tipos de emergencia de plántula ( ≠ germinación)
Embrión
Reposo
(= detención del crecimiento)
Germinación
(= reestablecimiento del crecimiento)
factores externos (ambientales)
y/o internos
Tipos de Reposo
(según si el factor es externo o interno)
Quiescencia
El factor que determina el reposo es externo
(v.g. agua, temperatura, O2)
Dormición
El factor que determina el reposo es interno
(v.g. inhibidores, cubiertas duras)
Algunos conceptos en relación a las semillas…
Viabilidad
Está relacionada con la capacidad del embrión de
formar una planta nueva
Longevidad
Es el tiempo de ‘almacenamiento’ de las
semillas en el cual permanecen viables
Viabilidad ¿Cómo se determina?
Germinación de
embriones aislados
(v.g. casos de dormición
impuesta por la testa)
Prueba topográfica
del tetrazolium
Germinación
‘estándar’
(si no hay dormición)
Determinación de la Viabilidad:
prueba topográfica
del tetrazolium (TZ): fundamento
Incoloro (oxidado) Rojo (reducido)
‘Formazano’
Cloruro de trifenil tetrazolium (TZ)
Determinación de la Viabilidad:
prueba topográfica
del tetrazolium (TZ)
1. Se remueven cubiertas duras
2. Se embeben las semillas
3. Se cortan las semillas para exponer al embrión
4. Se incuban en la solución de TZ (solución 0.1 a 1 %, una a varias horas)
5. Se observan los embriones (lupa)
6. La interpretación de viabilidad depende de la especie
Ventajas
- Relativamente rápido (pueden analizarse muchas muestras)
- Adecuada evaluación de la capacidad germinativa potencial
- En bancos de germoplasma, se puede detectar deterioro
aún antes que en el poder germinativo
Desventajas
- La interpretación es (en parte) subjetiva y requiere experiencia
- Laborioso
- Puede no detectar cambios menores (v.g. infección fúngica)
Algunos conceptos en relación a las semillas…
Viabilidad
Está relacionada con la capacidad del embrión de
formar una planta nueva
Longevidad
Es el tiempo de ‘almacenamiento’ de las
semillas en el cual permanecen viables
Algunos factores que influyen en la longevidad de
semillas…
‘Reglas de Harrington’ (longevidad de
semillas)
- La longevidad se duplica por cada 1%
de disminución de la humedad de la
semilla (entre 5 y 15 %)
- La longevidad se duplica por cada 5º C
de disminución de la temperatura de
almacenamiento (entre 0 y 50 º C)
Una semilla se puede deteriorar en tres
aspectos:
- Pérdida de vigor
- Pérdida de la capacidad de una
germinación normal
- Pérdida de viabilidad
Un caso curioso de longevidad en semillas
de ‘achira’ (Canna sp)
estudiado en el INFIVE…(550 años…)
Tipos de Reposo
(según si el factor es externo o interno)
Quiescencia
El factor que determina el reposo es externo
(v.g. agua, temperatura, O2)
Dormición
El factor que determina el reposo es interno
(v.g. inhibidores, cubiertas duras,
embriones inmaduros etc.)
Tipos de Reposo
(según si el factor es externo o interno)
Quiescencia
El factor que determina el reposo es externo
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Dormición
El factor que determina el reposo es interno
(v.g. inhibidores, cubiertas duras,
embriones inmaduros etc.)
¿ Porqué una semilla (viable) no germina?
(aún en condiciones de humedad, temperatura adecuadas…)
Dormición
‘No estaba muerto, estaba descansando’
‘Ausencia de germinación en semillas viables, cuando las condiciones
son favorables para la misma’ (Harper 1959)
‘…es una condición interna de la semilla que impide su germinación
bajo condiciones hídricas, gaseosas y térmicas adecuadas’ (Benech-
Arnold 2000)
Dormición: tipos según la causa
1. Presencia de cubiertas duras y/o impermeables
(impiden la protrusión de la radícula o la imbibición, respectivamente)
(= dormición física)
2. Presencia de inhibidores de naturaleza química
(v.g. balance hormonal GA: ABA, otros inhibidores hidrosolubles etc.)
(= dormición fisiológica)
Viviparismo en semillas
La semilla germina
prematuramente en el fruto
(incluso en la planta madre):
puede ser una
anormalidad (deficientes en
ABA)
o ser natural (mangles)
Mangle rojo (Rhyzophora mangle)
3. Embriones inmaduros: no han completado aún su
diferenciación como para poder germinar
(ej. Ginkgo biloba, orquídeas)
(= dormición morfológica)
Dormición: tipos según el grado
1. Dormición ‘Superficial’ (v.g. requieren nula o corta
estratificación, o bien ‘post-maduración en seco)
2. Intermedia (v.g. 1-3 meses estratificación)
3. Dormición profunda (v.g. 2-5 meses estratificación)
Dormición: tipos según el momento en que se
adquiere
1. Dormición Primaria: es la condición que poseen las semillas
cuando se dispersan de la planta madre. No germinan aún en
condiciones óptimas.
2. Dormición Secundaria: es adquirida con posterioridad si las
condiciones no son favorables
Factores que afectan la germinación
I. Temperatura
II. Agua
III. Gases
IV. Luz
La luz y la germinación: semillas fotoblásticas (‘fotodormancia’)
Semillas fotoblásticas: aquellas en que la luz promueve
la germinación (fotoblastismo positivo) o bien la inhibe (fotoblastismo
negativo)
Experimentos con semillas de lechuga cv. ‘Grand Rapids’
(fotoblásticas positivas): descubrimiento del fitocromo
Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo
a. En semillas pequeñas (escasas reservas)
= re-aseguro de emergencia de la plántula
Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo
b. En especies ‘pioneras’ (ej. selvas, bosques)
=
Colonización de ‘claros’ (= ‘gaps’)
Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo
c. En malezas
=
Germinan cuando el suelo es disturbado
Tratamientos para romper
la dormición en semillas
I. Escarificación
(cubiertas duras o impermeables)
Es un tratamiento que permite la entrada de agua en
semillas con cubierta dura
La escarificación puede ser:
1. Física (‘raspado’, ‘lijado’ = abrasión)
2. Química (tratamiento con ácido sulfúrico)
3. Altas temperaturas (35 ºC en arena seca, o H2O caliente a 80-100 ºC…)
Tratamientos para romper
la dormición en semillas
Escarificación física
a. Por corte
b. Abrasión
Tratamientos para romper
la dormición en semillas
II. Estratificación
- Es un tratamiento en el que se someten las semillas (humedecidas)
a períodos a una temperatura determinada (comúnmente, bajas Tº
aunque no siempre…)
- Puede estar relacionada a la ruptura de la dormición fisiológica
(ej inhibidores) o morfológica (embriones inmaduros)
La temperatura y tiempo de exposición (1 a 4 meses en muchos casos)
de la estratificación depende de la especie
¿Qué ocurre durante la estratificación?
-  niveles y/o la sensibilidad al ABA
-  niveles de GAs (posteriormente al período de frío)
Tratamientos para romper
la dormición en semillas
III. Post-maduración (‘after-ripening’)
-Almacenamiento de semilla en seco a temperatura ambiente (en
semillas con dormición fisiológica superficial..)
No se conocen totalmente qué procesos están implicados
(probablemente , disminución de ABA, aumento de giberelinas, eliminación de inhibidores
etc…)
IV. Otros tratamientos para promover/mejorar la
germinación
Lavado previo en soluciones de hipoclorito de sodio (‘lavandina’) para
prevenir la formación de hongos
Tratamiento con giberelinas (rompe la
dormición)
Lavado por inmersión (eliminación de
inhibidores)
Lavado por lixiviación (eliminación de
inhibidores)
Alternancia de temperaturas
Tratamiento con nitratos (KNO3)
MEDIDAS DE GERMINACIÓN
3 Parámetros importantes:
I. Porcentaje
II. Velocidad (=tasa)
III. Uniformidad
MEDIDAS DE GERMINACIÓN
I. Porcentaje de Germinación (‘poder germinativo’)
Es el número de semillas que germinan de una población (lote),
expresado como porcentaje
II. Velocidad o tasa de Germinación
(‘energía germinativa’)
Es el tiempo que tarda en germinar el 50 %
de las semillas de una población (=lote)
III. Uniformidad de la Germinación
Estima cuán cerca en el tiempo germinan
las semillas de una población o lote
Puede definirse como el tiempo entre T75 y T25
A manera de repaso…
Un lote de semillas no germinan: ¿qué
puede estar sucediendo y cómo
intentar resolverlo?
Semilla ‘seca’
SI NO
¿Germinación con
imbibición y
temperatura
adecuadas?
SI
¿Posee cubierta seminal dura o
impermeable?
¿Germina con
escarificación? NO
Requerimientos de
almacenamiento en
frío-húmedo?
(estratificación)
SI
NO
Requerimientos de
almacenamiento en
frío-húmedo?
(estratificación)
Al intentar germinar semillas de una especie de la que
no hay información…
Semillas con cubiertas duras y/o dispersadas por
animales (aves, mamíferos): ¿escarificación?
Semillas muy pequeñas:
¿¿fotoblásticas??
Semillas que suelen pasar un período frío en
condiciones naturales antes de germinar:
¿requerimientos de estratificación?
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de almacenamiento?

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Curso Propagación Germinación Basica 2022

  • 1. Taller ‘Capacitación en Técnicas de Propagación Vegetal’ Actividad 3. Propagación sexual: semillas y germinación Eduardo Tambussi
  • 2. Capacitación en técnicas de propagación vegetal. Cronograma 2022 Horario de clases: 14 a 17 hs. Actividad 1. Martes 1 de noviembre. Alejandra Carbone Fundamentos y estructuras para la propagación vegetal. Actividad 2. Jueves 3 de noviembre. Virginia Luquez Ciclos ontogénicos de las plantas. Actividad 3. Martes 8 de noviembre. Juan José Guiamet El control de la floración. Inducción y diferenciación floral. Actividad 4. Jueves 10 de noviembre Eduardo Tambussi Propagación sexual: semillas. Actividad 5. Martes 15 de noviembre. Daniel Gimenez Propagación Asexual: Multiplicación por medio de estacas. Actividad 6. Jueves 17 de noviembre. Gustavo Gergoff Propagación Asexual: Acodos y sus formas naturales. Actividad 7. Martes 22 de noviembre. Marcelo Gauna y Verónica Ayelén Aguirre Propagación de especies nativas.
  • 3. Ciclo biológico de las plantas con semilla
  • 4. Roles de la semilla… - Reproducción (sexual) - Estado de resistencia - Dispersión (diáspora)
  • 5. ¿ Qué es una ‘semilla’? Es un óvulo maduro y fecundado conteniendo: -Embrión -Sustancia de reserva (endosperma, perisperma o cotiledones) -Cubierta protectora (testa)
  • 6.
  • 7. Embrión Representa a la nueva generación, luego de la unión sexual de las gametas - Eje embrional (originarán el vástago y la raíz) - Cotiledones (1 en monocot., 2 en dicot., varios en coníferas)
  • 10.
  • 12. Sustancias de reserva cebada, trigo, avena proteínas Lípidos Carbohidratos soja proteínas Lípidos Carbohidratos maní proteínas Lípidos Carbohidratos
  • 13. Características de la semilla - Poseen un bajo contenido porcentual de agua (en el orden del 5- 10%) - El crecimiento del embrión se halla detenido
  • 14.
  • 15.
  • 16. Semillas ortodoxas (la mayoría de las plantas de cultivo)
  • 17. Semillas recalcitrantes (= NO ortodoxas) (v.g. algunos árboles tropicales, palta, mango, café, Fagus etc.)
  • 18. Semillas recalcitrantes - NO toleran la deshidratación (> 25%) y bajas temperaturas - Corta longevidad Semillas ortodoxas - Toleran la desecación y bajas temperaturas - Más o menos longevas (según los casos)
  • 19. Germinación: es el restablecimiento del crecimiento del embrión (previamente en reposo)
  • 20. Tiempo Fase 1 Fase 2 Fase 3 Emergencia de la radícula Peso Fresco Fase ‘estacionaria’ Fases de la germinación-postgerminación
  • 21.
  • 23. Emergencia de la radícula
  • 24. Emergencia de la radícula
  • 25. Emergencia de la radícula
  • 26. Tipos de emergencia de plántula ( ≠ germinación)
  • 27. Embrión Reposo (= detención del crecimiento) Germinación (= reestablecimiento del crecimiento) factores externos (ambientales) y/o internos
  • 28. Tipos de Reposo (según si el factor es externo o interno) Quiescencia El factor que determina el reposo es externo (v.g. agua, temperatura, O2) Dormición El factor que determina el reposo es interno (v.g. inhibidores, cubiertas duras)
  • 29. Algunos conceptos en relación a las semillas… Viabilidad Está relacionada con la capacidad del embrión de formar una planta nueva Longevidad Es el tiempo de ‘almacenamiento’ de las semillas en el cual permanecen viables
  • 30. Viabilidad ¿Cómo se determina? Germinación de embriones aislados (v.g. casos de dormición impuesta por la testa) Prueba topográfica del tetrazolium Germinación ‘estándar’ (si no hay dormición)
  • 31. Determinación de la Viabilidad: prueba topográfica del tetrazolium (TZ): fundamento Incoloro (oxidado) Rojo (reducido) ‘Formazano’ Cloruro de trifenil tetrazolium (TZ)
  • 32. Determinación de la Viabilidad: prueba topográfica del tetrazolium (TZ) 1. Se remueven cubiertas duras 2. Se embeben las semillas 3. Se cortan las semillas para exponer al embrión 4. Se incuban en la solución de TZ (solución 0.1 a 1 %, una a varias horas) 5. Se observan los embriones (lupa) 6. La interpretación de viabilidad depende de la especie
  • 33.
  • 34. Ventajas - Relativamente rápido (pueden analizarse muchas muestras) - Adecuada evaluación de la capacidad germinativa potencial - En bancos de germoplasma, se puede detectar deterioro aún antes que en el poder germinativo Desventajas - La interpretación es (en parte) subjetiva y requiere experiencia - Laborioso - Puede no detectar cambios menores (v.g. infección fúngica)
  • 35.
  • 36. Algunos conceptos en relación a las semillas… Viabilidad Está relacionada con la capacidad del embrión de formar una planta nueva Longevidad Es el tiempo de ‘almacenamiento’ de las semillas en el cual permanecen viables
  • 37. Algunos factores que influyen en la longevidad de semillas…
  • 38. ‘Reglas de Harrington’ (longevidad de semillas) - La longevidad se duplica por cada 1% de disminución de la humedad de la semilla (entre 5 y 15 %) - La longevidad se duplica por cada 5º C de disminución de la temperatura de almacenamiento (entre 0 y 50 º C)
  • 39. Una semilla se puede deteriorar en tres aspectos: - Pérdida de vigor - Pérdida de la capacidad de una germinación normal - Pérdida de viabilidad
  • 40. Un caso curioso de longevidad en semillas de ‘achira’ (Canna sp) estudiado en el INFIVE…(550 años…)
  • 41. Tipos de Reposo (según si el factor es externo o interno) Quiescencia El factor que determina el reposo es externo (v.g. agua, temperatura, O2) Dormición El factor que determina el reposo es interno (v.g. inhibidores, cubiertas duras, embriones inmaduros etc.)
  • 42. Tipos de Reposo (según si el factor es externo o interno) Quiescencia El factor que determina el reposo es externo (v.g. agua, temperatura, O2) Dormición El factor que determina el reposo es interno (v.g. inhibidores, cubiertas duras, embriones inmaduros etc.)
  • 43. ¿ Porqué una semilla (viable) no germina? (aún en condiciones de humedad, temperatura adecuadas…) Dormición ‘No estaba muerto, estaba descansando’ ‘Ausencia de germinación en semillas viables, cuando las condiciones son favorables para la misma’ (Harper 1959) ‘…es una condición interna de la semilla que impide su germinación bajo condiciones hídricas, gaseosas y térmicas adecuadas’ (Benech- Arnold 2000)
  • 44. Dormición: tipos según la causa 1. Presencia de cubiertas duras y/o impermeables (impiden la protrusión de la radícula o la imbibición, respectivamente) (= dormición física)
  • 45. 2. Presencia de inhibidores de naturaleza química (v.g. balance hormonal GA: ABA, otros inhibidores hidrosolubles etc.) (= dormición fisiológica)
  • 46. Viviparismo en semillas La semilla germina prematuramente en el fruto (incluso en la planta madre): puede ser una anormalidad (deficientes en ABA) o ser natural (mangles) Mangle rojo (Rhyzophora mangle)
  • 47.
  • 48. 3. Embriones inmaduros: no han completado aún su diferenciación como para poder germinar (ej. Ginkgo biloba, orquídeas) (= dormición morfológica)
  • 49. Dormición: tipos según el grado 1. Dormición ‘Superficial’ (v.g. requieren nula o corta estratificación, o bien ‘post-maduración en seco) 2. Intermedia (v.g. 1-3 meses estratificación) 3. Dormición profunda (v.g. 2-5 meses estratificación)
  • 50. Dormición: tipos según el momento en que se adquiere 1. Dormición Primaria: es la condición que poseen las semillas cuando se dispersan de la planta madre. No germinan aún en condiciones óptimas. 2. Dormición Secundaria: es adquirida con posterioridad si las condiciones no son favorables
  • 51.
  • 52. Factores que afectan la germinación I. Temperatura II. Agua III. Gases IV. Luz
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  • 55.
  • 56. La luz y la germinación: semillas fotoblásticas (‘fotodormancia’) Semillas fotoblásticas: aquellas en que la luz promueve la germinación (fotoblastismo positivo) o bien la inhibe (fotoblastismo negativo)
  • 57.
  • 58. Experimentos con semillas de lechuga cv. ‘Grand Rapids’ (fotoblásticas positivas): descubrimiento del fitocromo
  • 59. Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo a. En semillas pequeñas (escasas reservas) = re-aseguro de emergencia de la plántula
  • 60. Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo b. En especies ‘pioneras’ (ej. selvas, bosques) = Colonización de ‘claros’ (= ‘gaps’)
  • 61. Relevancia ecológica del fotoblastismo positivo c. En malezas = Germinan cuando el suelo es disturbado
  • 62. Tratamientos para romper la dormición en semillas I. Escarificación (cubiertas duras o impermeables) Es un tratamiento que permite la entrada de agua en semillas con cubierta dura La escarificación puede ser: 1. Física (‘raspado’, ‘lijado’ = abrasión) 2. Química (tratamiento con ácido sulfúrico) 3. Altas temperaturas (35 ºC en arena seca, o H2O caliente a 80-100 ºC…)
  • 63. Tratamientos para romper la dormición en semillas Escarificación física a. Por corte b. Abrasión
  • 64. Tratamientos para romper la dormición en semillas II. Estratificación - Es un tratamiento en el que se someten las semillas (humedecidas) a períodos a una temperatura determinada (comúnmente, bajas Tº aunque no siempre…) - Puede estar relacionada a la ruptura de la dormición fisiológica (ej inhibidores) o morfológica (embriones inmaduros) La temperatura y tiempo de exposición (1 a 4 meses en muchos casos) de la estratificación depende de la especie
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  • 67.
  • 68. ¿Qué ocurre durante la estratificación? -  niveles y/o la sensibilidad al ABA -  niveles de GAs (posteriormente al período de frío)
  • 69. Tratamientos para romper la dormición en semillas III. Post-maduración (‘after-ripening’) -Almacenamiento de semilla en seco a temperatura ambiente (en semillas con dormición fisiológica superficial..) No se conocen totalmente qué procesos están implicados (probablemente , disminución de ABA, aumento de giberelinas, eliminación de inhibidores etc…)
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  • 71. IV. Otros tratamientos para promover/mejorar la germinación Lavado previo en soluciones de hipoclorito de sodio (‘lavandina’) para prevenir la formación de hongos Tratamiento con giberelinas (rompe la dormición) Lavado por inmersión (eliminación de inhibidores) Lavado por lixiviación (eliminación de inhibidores) Alternancia de temperaturas Tratamiento con nitratos (KNO3)
  • 72. MEDIDAS DE GERMINACIÓN 3 Parámetros importantes: I. Porcentaje II. Velocidad (=tasa) III. Uniformidad
  • 73. MEDIDAS DE GERMINACIÓN I. Porcentaje de Germinación (‘poder germinativo’) Es el número de semillas que germinan de una población (lote), expresado como porcentaje
  • 74. II. Velocidad o tasa de Germinación (‘energía germinativa’) Es el tiempo que tarda en germinar el 50 % de las semillas de una población (=lote)
  • 75. III. Uniformidad de la Germinación Estima cuán cerca en el tiempo germinan las semillas de una población o lote Puede definirse como el tiempo entre T75 y T25
  • 76. A manera de repaso… Un lote de semillas no germinan: ¿qué puede estar sucediendo y cómo intentar resolverlo?
  • 77. Semilla ‘seca’ SI NO ¿Germinación con imbibición y temperatura adecuadas? SI ¿Posee cubierta seminal dura o impermeable? ¿Germina con escarificación? NO Requerimientos de almacenamiento en frío-húmedo? (estratificación) SI NO Requerimientos de almacenamiento en frío-húmedo? (estratificación)
  • 78. Al intentar germinar semillas de una especie de la que no hay información… Semillas con cubiertas duras y/o dispersadas por animales (aves, mamíferos): ¿escarificación? Semillas muy pequeñas: ¿¿fotoblásticas?? Semillas que suelen pasar un período frío en condiciones naturales antes de germinar: ¿requerimientos de estratificación? Semillas que pierden la viabilidad rápidamente: ¿especie recalcitrante con requerimientos especiales de almacenamiento?