1. Determinación voltamétrica de ácido ascórbico sobre
electrodos de pasta de carbono
Introducción
Se realizó la determinación de ácido ascórbico en un suplemento vitamínico (Redoxon).
El ácido ascórbico puede oxidarse a ácido dehidroascórbico electroquímicamente, con lo
que se puede medir la cantidad de ácido ascórbico en una muestra mediante un método
electroanalítico, en este caso se hizo mediante un método voltamperométrico.
Para realizar esta determinación se realizaron varios ensayos para determinar las
condiciones más óptimas en las cuales se puede llevar a cabo la determinación
electroquímica.
Se utilizaron dos tipos de sistemas electródicos, uno compuesto principalmente por un
electrodo de trabajo de pasta de carbono realizado in situ, y otro compuesto por un sistema
de electrodos serigrafiados comercial.
Procedimiento
Se realizaron varios ensayos con un electrodo de pasta de carbono preparado in situ como
electrodo de trabajo. En este caso se usó, como electrodo auxiliar, un electrodo de platino y
como referencia, un electrodo de plata/cloruro de plata. Los ensayos con estos electrodos
fueron hechos en una celdilla de 20ml de volumen.
Otros ensayos se hicieron con electrodos serigrafiados DropSens, donde los electrodos
auxiliar y de trabajo son de carbono y el de referencia es de plata.
En ambos casos, se utilizó un potenciostato µAutolab.
La disolución buffer utilizada para fijar el pH en las medidas fue una Britton­Robbinson
(0.1M en ácido acético y fosfórico), a partir de la cual se hicieron las demás disoluciones
del pH adecuado, excepto la de pH 1 para la cual se utilizó una disolución de ácido
sulfúrico 0.1M.
Las disoluciones de ácido ascórbico que se usaron en las medidas fueron realizadas a partir
de una disolución 1x10ˉ2 M en ácido sulfúrico.
● Estudio del efecto del pH
Este estudio se realizó con electrodo de pasta de carbono. Se utilizó una concentración en
la celda constante de ácido ascórbico de 1x10ˉ4 M, y se fue variando el pH del medio en
cada una de las medidas. Se hicieron medidas para pH 1, 3, 5, y 7.
Este ensayo se hizo mediante una voltametría cíclica, variando el potencial desde un
potencial inicial de 0V hasta un potencial final de 1V. La velocidad de barrido utilizada fue
de 50mV/s.

2. ● Estudio del efecto de la velocidad de barrido
Se realizó este ensayo usando una disolución de concentración conocida en ácido ascórbico
de 1x10ˉ5 M, en un medio de pH óptimo determinado en el estudio anterior.
Se llevaron a cabo medidas de la corriente de pico mediante voltametría cíclica, observando
como se comportaba esa corriente variando la velocidad de barrido en estos valores: 10, 25,
50, 75, 100mV/s. Se utilizó los mismos valores para el potencial inicial y final que en el
ensayo anterior, utilizando el sistema con electrodo de pasta de carbono.
● Estudio de la amplitud de pulso
Este estudio se hizo con el mismo sistema electródico y mismo potencial final e inicial, pero
utilizando una diferente técnica como es la voltamperometría de pulso diferencial y
midiendo en este caso, tanto la corriente de pico, como la anchura a la semialtura del pico.
La concentración de ácido ascórbico utilizada fue de 1x10ˉ4 M y el pH del medio, el
determinado en el primer estudio. Se utilizó la velocidad de barrido óptima determinada en
el estudio anterior.
En este caso, el parámetro variable era la amplitud del pulso diferencial, se tomaron
medidas para cada una de estas amplitudes: 10, 25, 50, 75 y 100 mV .
● Calibrado con electrodo de pasta de carbono
El calibrado se realizó también mediante voltamperometría de pulso diferencial, utilizando
concentraciones en aumento de ácido ascórbico en la celda. Las concentraciones reales
utilizadas para el calibrado con el sistema de electrodo de pasta de carbono fueron de:
1x10ˉ6, 4.76x10ˉ6, 9.09x10ˉ6, 4.52x10ˉ5, 9.02x10ˉ5, 4.35x10ˉ4 y 8.34x10ˉ4M.
La señal de medida utilizada fue la corriente de pico.
Cómo parámetros (pH, velocidad de barrido, amplitud del pulso) se utilizaron los
determinados como óptimos en los estudios anteriores. El potencial de inicio y el final
fueron los mismos (0 y 1V respectivamente).
● Calibrado con electrodo serigrafiado de carbono
Para hacer el calibrado se prepararon disoluciones de medida de las siguientes
concentraciones de ácido ascórbico: 1x10­6, 3x10­6, 5x10­6, 7x10­6, 1x10­5, 3x10­5, 5x10­5,
7x10­5, 1x10­4, 3x10­4, 5x10­4, 7x10­4, 1x10­3M. Estas disoluciones se prepararon en tubos
eppendorf en medio del pH óptimo.
Este calibrado se hizo utilizando las mismas condiciones que el anterior excepto que el
potencial inicial fue de ­0.25V , ya que el electrodo de referencia es distinto.
Con estas condiciones se realizó un estudio de reproducibilidad intraelectródica, realizando

3. la medida de la misma disolución de ácido ascórbico de 3x10­4M, utilizando diferentes
electrodos serigrafiados.
● Medida de la muestra en electrodo serigrafiado de carbono
Para la preparación de la muestra se disolvió una pastilla del complejo vitamínico en 500ml
de agua destilada. Se hizo una dilución de esta disolución, llevando 1ml de la anterior a
100ml con la buffer al pH óptimo ya determinado.
Esta disolución de medida se midió en un electrodo serigrafiado, utilizando las mismas
condiciones que en el caso del calibrado.
● Adiciones estándar en electrodo serigrafiado de carbono
Se hizo una nueva medida de la muestra en electrodo serigrafiado pero esta vez usando el
método de las adiciones estándar, con las mismas condiciones que en la anterior medida de
la muestra.
Las concentraciones añadidas de ácido ascórbico a partir de la disolución de la muestra,
fueron de: 0, 2x10­4, 4x10­4, 6x10­4, 8x10­4, 1x10­3M, utilizando la misma cantidad de
muestra (10µl) en cada una de las disoluciones y llevando a un volumen igual (1ml) con la
disolución buffer de pH óptimo.
● Adiciones estándar en electrodo de pasta de carbono
Se hizo la medida de la muestra sobre electrodo de pasta de carbono también por medio
del método de adiciones estándar, usando las mismas condiciones que para la realización
del calibrado sobre este electrodo.
Las concentraciones añadidas de ácido ascórbico sobre la celda fueron de: 0, 1.94x10­4,
3.81x10­4, 5.60x10­4, 7.34x10­4, 9.01x10­4M.
Efecto pH en i pico
Resultados y discusión 7.4
6.9
Estudio del efecto del pH
6.4
i pico (uA)
pH Ep (V) ip (µA) 5.9
1 0.713 7.230 5.4
3 0.594 64.60
4.9
5 0.472 5.260 0 1 2 3 4 5 6 7 8
pH
7 0.524 5.000
Efecto pH en E pico
0.75
Como se puede observar en las gráficas, tanto
0.70
la corriente de pico como el potencial de pico
0.65
del proceso de oxidación del ácido ascórbico
0.60
E pico (V)
disminuyen según se aumenta el pH.
0.55
0.50
0.45
0.40
0 1 2 3 4 5 6 7 8
pH

4. Las condiciones más óptimas serían mayor valor para la corriente de pico (mejor
sensibilidad) y menor valor para el potencial de pico, ya que se evitarían posibles
interferencias a potenciales altos (mejor selectividad).
Se eligió un pH óptimo de 5, ya que la corriente de pico no disminuye en gran medida y se
tiene un valor bajo de potencial de pico.
Estudio de la velocidad de barrido
¿Proceso de difusión?
Vel. barrido Ep (V) ip (µA) raiz(vel.
0.600
(mV/s) barrido)
0.500
10 0.446 0.274 3.16
0.400
25 0.449 0.273 5.00
i pico (uA)
0.300
50 0.501 0.346 7.07 0.200
75 0.573 ­ 8.66 0.100
100 0.501 0.484 10.00 0.000
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
raiz vel. barrido
La corriente de pico presenta el mismo
comportamiento frente a la velocidad de barrido ¿Proceso de adsorción?
como frente a la raíz de la velocidad de barrido.
0.600
Este comportamiento es prácticamente lineal,
0.500
por lo que no se puede comprobar que el proceso
sigue la difusión en lugar de la adsorción sobre 0.400
i pico (uA)
el electrodo, aunque se conoce que sigue un 0.300
proceso de difusión. 0.200
0.100
Por otra parte, según se aumenta la velocidad de
barrido, aumenta la corriente de pico, pero se 0.000
0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0
obtenían mayores interferencias con velocidades velocidad barrido (mV/s)
altas, por lo que se eligió para hacer los
siguientes ensayos, una velocidad óptime de 50 mV/s.
Estudio de la amplitud del pulso
Amplitud vs intensidad pico
1.2
E (mV) ip (µA) Ep (V) W1/2 (V)
1.0
10 0.134 0.347 0.191 0.8
25 0.260 0.307 0.176
Aip (uA)
0.6
50 0.566 0.302 0.176 0.4
0.2
75 0.859 0.287 0.181
0.0
100 1.139 0.277 0.188 0 20 40 60 80 100 120
AE (mV)
Al aumentar la amplitud del pulso en la Amplitud vs anchura a la semialtura
voltamperometría de pulso diferencial, la corriente 0.195
de pico aumenta. 0.190
Teniendo en cuenta la variación de la anchura a la
0.185
semialtura según varía la amplitud, se debería elegir
w1/2 (V)
la amplitud que obtuviera menor valor de la anchura 0.180
0.175
0.170
0.165
0 20 40 60 80 100 120
AE (mV)

5. a la semilatura y mayor corriente de pico, ya que se obtendría una mejor selectividad y una
mayor sensibilidad, respectivamente.
Se eligió un valor óptimo de 75 mV de amplitud de pulso.
Calibrado con electrodo de pasta de carbono
[ascórbico] (M) ip (µA) Calibrado pasta de carbono
10.000
1x10­6 0.057 9.000
9.09x10­6 0.253 8.000
7.000
4.53x10­5 0.560 6.000
Aip (uA)
5.000
9.02x10­5 1.044 4.000
4.35x10­4 5.454 3.000
2.000
8.34x10­4 8.813 1.000
0.000
0.00E+00 2.00E-04 4.00E-04 6.00E-04 8.00E-04 1.00E-03
ip = 10737 + 0.165∙[ascórbico] [ac, ascorbico] (M)
r = 0.996
Se obtiene una recta con una buena linealidad en aproximadamente 3 órdenes de
magnitud.
Calibrado con electrodo serigrafiados
[ascórbico] (M) ip (µA) Calibrado con serigrafiado
1x10­6 0.076 18.000
16.000
3x10­6 0.091 f(x) = 22990.502x - 0.268
14.000 R² = 0.997
5x10­6 0.097 12.000
7x10 ­6
0.109 10.000
Aip (uA)
1x10­5 0.135 8.000
6.000
5x10­5 0.527
4.000
7x10­5 0.946 2.000
1x10 ­4
1.476 0.000
0.00E+00 2.00E-04 4.00E-04 6.00E-04
3x10­4 6.379 [ac. ascorbico] (M)
5x10­4 11.450
7x10­4 15.910
ip = 22990.5 – 0.268∙[ascórbico]
r = 0.998
Igualmente que en el caso anterior se obtiene una buena linealidad en casi 3 órdenes de

6. magnitud.
Reproducibilidad intraelectródica
[ascorbico] (M) señal
Se obtiene un reproducibilidad intraelectródica del 4.0 %, con Medida 1 3,556
dos medidas de la misma concentración en dos electrodos Medida 2 3,362
serigrafiados distintos.
Determinación de ácido ascórbico sobre electrodo serigrafiado
ip (µA) mg ascórbico
en muestra
Muestra 1 3.398 1404
Muestra 2 2.613 1103
Muestra 3 3.152 1309
Con los datos obtenidos en la determinación se obtuvo un cantidad media de ácido
ascórbico en la tableta del complejo vitamínico de: 1272 ± 15 mg.
Adiciones estándar con electrodo serigrafiado
[ascórbico]ad (M) ip (µA)
0 6.26
2x10 ­4
6.40
4x10 ­4
7.57
6x10 ­4
4.71
8x10­4 3.98
1x10­3 ­
Se obtuvieron unos datos no esperados según se iba aumentando la concentración de ácido
ascórbico.
Esto fue así porque hubo un error en los cálculos de la concentración y en realidad no se
añadieron esas concentraciones sino que se añadieron concentraciones dos órdenes de
magnitud menores (~10­6), por lo que se obtuvo una corriente de pico que no aumentaba
apenas.
No se pudo obtener la concentración de la muestra, debido a este error.

7. Adiciones estándar con electrodo de pasta de carbono
[ascórbico]ad (M) ip (µA)
0 4.48
2x10­4 26.39
4x10­4 47.85
6x10­4 51.97
8x10­4 56.43
1x10­3 60.15
En este caso, mientras que las concentraciones añadidas fueron las correctas, se obtuvo en
las tres últimas medidas dos picos en el voltamperograma debido a que el ácido ascórbico
había evolucionado en otra especie.
Por esta razón los datos obtenidos fueron erróneos, ya que no se obtuvo la señal total que
se obtendría si sólo hubiera ácido ascórbico en la celda. Por consiguiente no pudo
determinarse la concentración de ácido ascórbico en la muestra.