En términos generales biotecnología se puede definir como el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre.
En términos generales biotecnología se puede definir como el uso de organismos vivos o de compuestos obtenidos de organismos vivos para obtener productos de valor para el hombre.
Reporte 2 Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estu...1231712
Por medio de esta práctica aprendimos a utilizar los distintos medios de cultivo y sus diferentes nutrimentos y funciones ya que en algunos crecen determinadas bacterias impidiendo el crecimiento y desarrollo de otras, también utilizamos la incubadora para acelerar el crecimiento de bacterias deseadas las cuales las obtuvimos de heces fecales.
Se llevaron a cabo anotaciones en cuadernos y bitácoras que fueron de la mano con la práctica conforme avanzábamos en ella.
Por ultimo logramos cumplir el objetivo que fue detectar la morfología de colonias y bacterias al igual que aprender técnicas y métodos básicos para la preparación de medios de cultivo en los cuales se desarrollaron nuestras bacterias.
Reporte 2 Técnicas básicas para el cultivo de microorganismos: siembra y estu...1231712
Por medio de esta práctica aprendimos a utilizar los distintos medios de cultivo y sus diferentes nutrimentos y funciones ya que en algunos crecen determinadas bacterias impidiendo el crecimiento y desarrollo de otras, también utilizamos la incubadora para acelerar el crecimiento de bacterias deseadas las cuales las obtuvimos de heces fecales.
Se llevaron a cabo anotaciones en cuadernos y bitácoras que fueron de la mano con la práctica conforme avanzábamos en ella.
Por ultimo logramos cumplir el objetivo que fue detectar la morfología de colonias y bacterias al igual que aprender técnicas y métodos básicos para la preparación de medios de cultivo en los cuales se desarrollaron nuestras bacterias.
Un biosensor ambiental es un sistema analítico
que acopla un elemento biológico sensible con
un transductor para obtener una detección
rápida, proporcional, precisa y sensible de
sustancias individuales o combinadas presentes
en el ambiente. El objetivo de este trabajo fue
conocer el uso actual y las perspectivas de
aplicación de los biosensores y su aplicación en
el medio ambiente.En este sentido, es importante mencionar que en
el Perú no se localizó ningún grupo de
investigación asociado al uso de biosensores
ambientales.
Los cuatro grupos que actualmente investigan
biosensores están orientados a las áreas de salud y
detección de compuestos puros, utilizan enzimas
como elemento biológico y sensores ópticos como
sistema de detección. Dos de estos grupos aplican
nanotecnología para dar estabilidad al elemento
biológico y así obtener una mejor respuesta de
detección.
La investigación con biosensores no está
catalogada como prioritaria, sin embargo, el
deterioro ambiental existente representa una
excelente oportunidad para el desarrollo y
aplicación de biosensores ambientales. Por ejemplo,
el uso de células completas (ciliados edáficos
nativos) acopladas a un potenciómetro para
detectar contaminantes en suelo (plaguicidas).En todo el mundo, la liberación controlada o incontrolada de
contaminantes ambientales, por ejemplo, elementos tóxicos
pesados, antibióticos y plaguicidas al medio ambiente es
una preocupación grave, Por tanto, es urgente diseñar
nuevos prototipos para detectar su presencia en
ecosistemas terrestres y acuáticos.
La baja concentración de la muestra y la falta de
selectividad y sensibilidad de los métodos tradicionales se
encuentran entre los obstáculos importantes de los métodos
convencionales. Además, los métodos convencionales
requieren un pretratamiento de muestras prolongado y
especializado, que puede traducirse potencialmente en
procesos que consumen mucho tiempo.Biorreceptor
Receptor biológico que detecta
específicamente una sustancia
aprovechando la especificidad de las
interacciones Biomoleculares.
• Enzimas
• Microorganismos
• Tejidos y organelos
• Inmunorreceptores
• Quimiorreceptore
El análisis de cianobacterias se ha vuelto una parte crucial en la gestión de recursos hídricos y en la preservación de la salud ambiental. Las cianobacterias, también conocidas como algas verde-azuladas, son organismos fotosintéticos unicelulares que pueden proliferar en cuerpos de agua dulce, salada y en ambientes terrestres.
En esta presentación se responde al siguiente planteamiento: ¿Cuál modelo matemático sirve para caracterizar un crecimiento celular sostenido de las microalgas en diversos tipos y escalas de fotobiorreactores, así como en diferentes condiciones ambientales?
Similar a Determinacion de biomasa_microbiana (20)
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DETERMINACIÓN DE LA BIOMASA MICROBIANA
DETERMINACIÓN DE
LA BIOMASA
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I. INTRODUCCIÓN
Biomasa es un termino general que se refiere a los
M’os presentes en un sistema.
Cantidad
células personas
masa de
seres vivos
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I. INTRODUCCIÓN
La determinación de la biomasa es una de las
variables más importantes de un bioproceso
su determinación nos
lleva a la comprensión de
la eficiencia del mismo.
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I. INTRODUCCIÓN
Es una
variable
clave para
establecer:
Consumo
de
nutrientes
Calculo de
balance de
masas de
cualquier
proceso
biológico.
Tasas de
producción
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I. INTRODUCCIÓN
• Existen 2 métodos principales de estudiar
poblaciones microbianas en la naturaleza:
MÉTODO DIRECTO
MÉTODO INDIRECTO
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Observación de los
organismos
En el microscopio
óptico
Conteo del número
de M’os
A. MÉTODO DIRECTO
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• Requiere de preparaciones puras sin ningún tipo
de partículas que puedan interferir en los
resultados y:
Se refiere básicamente a la medida de la masa
celular.
A. MÉTODO DIRECTO
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A. MÉTODO DIRECTO
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• La cantidad total de biomasa presente en una
muestra puede medirse:
En términos de peso seco por unidad de
volumen.
PESO SECO
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PESO SECO
Los componentes volátiles de las células pueden perderse en el
secado.
La muestra seca puede recobrar humedad durante el
pesado.
DESVENTAJAS
Se puede determinar M’os activos y no, material inerte,
materia orgánica y polímeros extracelulares.
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• Se obtiene a partir de una muestra en
suspensión que es pesada luego de la
separación de las células por filtración o
centrifugación.
PESO HÚMEDO
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MICROBIANA
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PESO HÚMEDO
Técnica útil para
grandes volúmenes
de muestra
El diluyente queda
atrapado en el
espacio intercelular
y contribuye al peso
total de la masa.
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MÉTODOS
INDIRECTOS
Actividad
metabólica
Consumo de un
nutriente
característico
Métodos
turbidimétricos
Espectrofotométricos
Nefelométricos
Determinación
nitrógeno total
B. MÉTODOS INDIRECTOS
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ECOLOGÍA
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B. MÉTODOS INDIRECTOS
Medidas de turbidez
Los métodos turbidimétricos de análisis
tienen como fundamento:
La formación de partículas de pequeño
tamaño que causan la dispersión de la luz
cuando una fuente de radiación incide
sobre dichas partículas.
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El grado de dispersión de
la luz (o turbidez de la
solución) es proporcional
al número de partículas
que se encuentran a su
paso, lo cual depende de
la cantidad de analito
presente en la muestra.
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Medidas de turbidez
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• Se trata de una serie de patrones de turbidez
previamente calibrados.
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Escala de Mc Farland
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• Se basa en la capacidad de:
1% de
Cl2Ba
Cantidades
crecientes
de SO4H2
al 1%
Precipitado
de BaSO4
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Escala de Mc Farland
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Su utilidad es la de
poder elaborar
suspensiones
bacterianas,
Ajustadas a un
patrón y valorar su
concentración
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Escala de Mc Farland
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• Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su
aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza
(contaminantes, biomoléculas, etc.) y,
Estado de agregación (sólido, líquido, gas).
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Espectrofotometría
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• Las principales ventajas de la
espectrofotometría son:
Sensibilidad relativa elevada.
Facilidad para realizar mediciones rápidas.
Grado de especificidad relativamente elevado.
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Espectrofotometría
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• Los espectros de absorción se miden mediante
un instrumento denominado espectrofotómetro.
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Espectrofotometría
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• El espectrofotómetro, mide la absorbancia, A,
que se define por:
T= transmitancia
D.O. = A = -logT/100
Mide la densidad óptica (D.O.), es decir la absorbancia.
B. MÉTODOS INDIRECTOS
Espectrofotometría
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II. OBJETIVOS
• Lograr determinar la biomasa Microbiana, a
través de diversos métodos.
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Métodos directos: determinación del peso
húmedo y peso seco
Materiales:
Levadura de panificación “Fleishmann”
Agua destilada
Pipetas de 5ml
Tubos de ensayo
Balanza analítica
Centrifuga
Estufa
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Métodos directos: determinación del peso
húmedo y peso seco
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Peso Seco:
Tomar muestras de 5 mL de la solución inicial y
colocar en 3 tubos de ensayos previamente pesados.
Luego llevar los tubos a la centrifuga y hacerlo girar
a 4 000 rpm, por un tiempo de 10 minutos.
Luego pesar cada tubo de ensayo en la balanza
analítica y anotar los pesos.
Posteriormente, llevar los tubos a estufa, a una Tº de
105 ºC por un tiempo promedio de 3 horas.
Pasado el tiempo anotar, los pesos y luego obtener
un promedio. (Anexo 1).
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
Por ultimo expresar los datos en la siguiente
formula.
Fuente: Arnáiz,C,Determinación De La Biomasa En Procesos Biológicos. Sevilla
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Peso Húmedo:
Tomar muestras de 5 mL de la solución inicial y
colocar en 3 tubos de ensayos previamente
pesados.
Llevar los tubos a la centrifuga, donde se hacen
girar a 4 000 r.p.m., por un tiempo de 10
minutos.
Luego pesar cada tubo de ensayo en la balanza
analítica, anotamos los pesos y luego promediar
(Anexo 1).
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
Por ultimo expresar los datos en la siguiente
formula.
Fuente: Arnáiz,C,Determinación De La Biomasa En Procesos Biológicos. Sevilla
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Figura 01: Metodología de peso seco y húmedo
Fuente: Google Imágenes
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Métodos indirectos: determinación de turbidez a través
de la Escala de McFarland y espectrofotometría
Materiales:
cepa de E. coli
Agar Nutritivo
Solución Salina 0.85%
BaCl2 1%
H2SO4 1%
Agua destilada estéril
Tubos de ensayo
Pipetas
Espectrofotómetro
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Métodos indirectos: determinación de
turbidez a través de la Escala de McFarland
y espectrofotometría
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Nefelométria de McFarland:
Agregar los reactivos a los tubos rotulados de
manera apropiada (1 a 10) en las cantidades que
se indican a continuación:
Estándares de sulfato de bario
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
BaCl2 1%(ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0
H2SO4 1%(ml) 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.3 9.2 9.1 9
Densidad aprox. De
células (x108/ml
3 6 9 12 15 18 21 24 27 30
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
Sellar los tubos y rotular. El precipitado de BaSO4
suspendido corresponde aproximadamente a la
densidad de células homogéneas de
Escherichia coli por mililitro.
Luego, se toma una alícuota de la muestra de
bacterias.
Se inocula en un tubo contenido de solución
salina fisiológica (0,85%) y se procede a
comparar el tubo con los de la escala estándar y
obtener los resultados de la densidad.
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Figura 02: Escala de Mc Farland
Fuente: Google Imágenes
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
• Espectrofotometría:
En el espectrofotómetro establecer la
absorbancia a 546 nm de longitud de onda, de
cada uno de los tubos de la escala de
MacFarland.
Con estos datos, teniendo en cuenta las
concentraciones celulares correspondientes a
cada tubo y mediante el uso de un papel
milimetrado semilogarítmico establezca una
curva patrón de número de bacterias con relación
a la absorbancia.
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
Prepare diluciones seriadas de la muestra
biológica en SSF. Para ello, utilice los tubos de
15x125mm y las pipetas estériles. Realice las
siguientes diluciones: 10-1, 10-2,10-3,10-4,y 10-5.
Establezca la absorbancia de las diluciones y a
través de la curva patrón determine el número de
bacterias presentes en cada dilución y teniendo
en cuenta el factor de dilución del tubo trabajado,
establezca el número de bacterias por mililitro.
Promediando estos datos, determine el número
de bacterias presente en la muestra.
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Figura 03: Espectrofótometro
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III. MATERIALES Y MÉTODOS
Adicional a esto realice una siembra
incorporación de las muestras en una placa con
agar nutritivo, incubarlas a 37ºC por horas;
realice un recuento y compare si los resultados
obtenidos concuerdan con lo esperado.
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Figura 04: siembra por incorporación
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