El documento describe el uso del compuesto 2,2 difenil-1-pricrilhidracilo (DPPH) para medir la capacidad antioxidante de sustancias. DPPH es un polvo cristalino estable de radicales libres que se usa comúnmente en ensayos antioxidantes. El documento explica fórmulas para calcular el porcentaje de actividad antioxidante, inhibición y captación de radicales libres usando las lecturas de absorbancia del DPPH y las muestras en un espectrofotómetro.

1. Universidad Técnica de Machala
Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud
Carrera de Bioquímica y Farmacia
Análisis de Medicamentos
Nombre: Jessica Gabriela Zúñiga Pineda
Fecha: 17 de Enero del 2019
Curso: 9no semestre “B”
Docente: Dr. Carlos Alberto García González
DIARIO N° 23
TEMA: Patrones de calidad. Normalización, campos de normalización.
2,2 difenil-1-pricrilhidracilo (DPPH•)
DPPH es una
abreviatura
común para el
compuesto
químico
orgánico 2,2-
difenil-1-
picrilhidrazilo.
Es un polvo
cristalino de
color oscuro
compuesto por
moléculas
estables de
radicales
libres.
DPPH tiene
dos
aplicaciones
principales,
ambas en
investigación
de laboratorio:
una es un
monitor de
reacciones
químicas que
involucran
radicales, más
notablemente
es un ensayo
antioxidante
común,
y otra es un
estándar de la
posición y la
intensidad de
las señales de
resonancia
paramagnética
electrónica.
DPPH tiene varias formas
cristalinas que difieren por la
simetría de la red y el punto de
fusión. El polvo comercial es una
mezcla de fases que se funde a ~
130 ° C.

2. REACTIVOS
El 2,2 difenil-1-pricrilhidracilo (DPPH•) se lee en el espectrofotómetro a una longitud
de onda de 515 nm. La mezcla se dejó reaccionar en oscuridad por 30 minutos.
FÓRMULAS
%AA = 100 - ((LM - LBM) x 100) /LDPPH
En Donde:
 %AA: Porcentaje de actividad antioxidante
 LM: Lectura de la absorbancia de la muestra
 LBM: Lectura de la absorbancia del blanco de la muestra
 LDPPH: Lectura de la absorbancia del DPPH
% de inhibición= (Abs. Muestra × 10) / Abs. DPPH
Donde:
 Abs. Muestra: es la absorbancia de la muestra de café
 Abs. DPPH: es la absorbancia de la solución DPPH control
%Inh=[(Ac/Am)/Ac]*100
Donde:
 Ac: Absorbancia del control
 Am: Absorbancia de la muestra
CAPACIDAD ANTIOXIDANTE= [1-(A2-A3)/A1]*100
% CAPTACIÓN DE RADICAL LIBRE
DONDE:
 A1: Absorbancia del patrón de referencia.
 A2: Absorbancia de la muestra.
 A3: Absorbancia del blanco de investigación.
metanol etanol acido tanico hidroquinona DPPH