El estudio investiga la inmunidad parcial al parásito de la malaria en niños de 6 a 16 años en Zimbabwe, expuestos a bajos niveles de transmisión. A pesar de la exposición, el desarrollo de una inmunidad protectora real parece poco probable, lo que sugiere que la resistencia se logra solo con repetidas exposiciones. Se plantea la posibilidad de que el desarrollo de una resistencia en la población facilite la creación de una vacuna en el futuro.

1. Luisa Calderón
Maria Angélica Zapata
UPB - Facultad de Medicina
2017 - 1

2. I N T R O D U C T I O N

3. Two hosts: vertebrate host and insect host that is
the definitive one.
Protozoan parasite that causes malaria in humans.
It is transmitted by Anopheles mosquito that is the
female.
P L A S M O D I U M
F A L C I P A R U M

4. L I F E C Y C L E

5. M A L A R I A

6. M A L A R I A
Symptoms appear 15 days
after the bitten.
This disease can be
prevented but there is not
vaccine yet.
Artemisinin is one of the
most popular ways to prevent
malaria ➔ Tu Yougu, who
got a Nobel in 2015

7. I M M U N I T Y
Parcial immunity: Parasite
usually avoid the destruction
by the immune system.
Humoral immunity: Major
histocompatibility complex
(MHC).
Celular immunity: Decrease
of lymphocytes.

8. G E N E R A L
O B J E C T I V E
Investigate if transmission reducing immunity
develops in children exposed to low to moderate
level of malaria transmission.

9. M É T O D O S

10. Población y área de estudio
Población: 150 niños entre los 6 y
los 16 años.
Primaria Bandanyenje, Distrito
Makone, Zimbabwe.
Criterios de inclusión:
Voluntad para la toma de muestras.
Criterios de exclusión:
Malnutrición.
Estado físico deplorable.
Enfermedades no relacionadas con
la malaria o esquistosomiasis.

11. Recolección de pruebas:
1. Orina y heces durante los tres días (detección infección helmintos).
2. Prueba de sangre el tercer día para diagnóstico de malaria.
3. Aislamiento del plasma para análisis inmunológico.
Tratamiento para esquistosomiasis y malaria según pruebas de
heces y orina, ft sangre.

12. D I A G N Ó S T I C O D E
M A L A R I A P O R P. F a l c i p a r u m
Los RDT ➔ detección de antígenos específicos producidos por el
parásito en la sangre de los individuos infectados (inmunoensayo de
flujo lateral o inmunocromatografo)

13. D I A G N Ó S T I C O D E
M A L A R I A P O R P. F a l c i p a r u m
Placas de sangre gruesas y delgadas: Tinción Giemsa.
Placa gruesa: observación bajo el microscopio en búsqueda de
parásitos (neg). Double check: microscopista experto.
Diagnósticos confirmados =
tratamiento con Artemether +
Lumefantrine.

14. P C R A N I D A D A P A R A
D E T E C C I Ó N D E P. F a l c i p a r u m
Kit de extracción de DNA:
Quiagen.
Primers utilizados: Ambos para DNA de plasmodium:
PaF (Forward) 5´-GAACGAGATCTTAACCTGCTAA-3´
PaR (Reverse) 5´-TCAGCACAATCTGATGAATCAT-3´
Primers para secuencia específica para P. falciparum:
PfnF (Forward): 5´- ACATAGGTAACTATACATTTATTCAGT -3´
PfnF (Reverse): 5´- AGCATCAAAGATACAAATATAAGCA -3´

15. E L I S A
Anticuerpos para antígenos etapa
asexual eritrocítica.
Cultivo de P. falciparum (NF54)para
obtención de antígeno bruto en estudios
previos ➔ búsqueda de anticuerpos
contra antígenos de la etapa asexual
eritrocítica del parásito.
Anticuerpos para antígenos de la
etapa gametocítica.
Clonación de antígenos recombinates
Pfs48/45 y Pfs47 en e.coli con el vector
pET(K-).

16. E N S A Y O D E A L I M E N T A C I Ó N
D E M E M B R A N A
Pruebas positivas para ELISA
PFS48/45 fueron elegidas
aleatoriamente.
Evaluación de la reducción en la
transmisión: An.gambiae y An.stephensi.
25 – 30 mosquitos por muestra de
plasma.
Control negativo: plasma de
ciudadanos norteamericanos que
nunca viajaron a zonas endémicas de
malaria.
Control positivo: 20 muestras de un
estudio previo en Zambia.

17. R E S U L T A D O S

21. D I S C U S S I O N

22. A U T H O R S A I D Y E S / N O
Baird, 1998; Stone et al., 2016
All the study participants were
school age children between 6 and
16 years of age, showing unlikely
development of protective
immunity with requires repeated
exposure over a long time period.
✔
Chowdhury et al., 2009;
Outchkourov et al., 2012
Pf48/ 45 is a well established target
of malaria transmission blocking
immunity ✖
Achtman et al.; 2005; Baird,
1998; Langhorne et al.; 2008;
Stone et al., 206
It is believed that such
asymptomatic status is achieved in
adults who have had repeat
exposure to malaria resulting in
induction of partially protective
clinical immunity.
✔
Anthony et al. 2007. Drakeley
et al.; 1996; Escalante et al.,
2002; Juliano et al.; 2016
Polymorphism in the antigens
affecting immunogenicity and
functional effectiveness ✔

23. C O N C L U S I O N S

24. In this population, malaria is not a serious risk,
because they develop a kind of resistance, which is
only there if the person has been exposed constantly.
The fact that people can create a resistance can
make a pathway where it can be easier to fin a
vaccine for malaria.
Its very unlikely that isolated doses of recombinant
antigens wont trigger permanent immunity.
The antigen presentation isn't a guarantee of
developing immunity to the parasite.

25. M A P A
C O N C E P T U A L