3. Two hosts: vertebrate host and insect host that is
the definitive one.
Protozoan parasite that causes malaria in humans.
It is transmitted by Anopheles mosquito that is the
female.
P L A S M O D I U M
F A L C I P A R U M
6. M A L A R I A
Symptoms appear 15 days
after the bitten.
This disease can be
prevented but there is not
vaccine yet.
Artemisinin is one of the
most popular ways to prevent
malaria ➔ Tu Yougu, who
got a Nobel in 2015
7. I M M U N I T Y
Parcial immunity: Parasite
usually avoid the destruction
by the immune system.
Humoral immunity: Major
histocompatibility complex
(MHC).
Celular immunity: Decrease
of lymphocytes.
8. G E N E R A L
O B J E C T I V E
Investigate if transmission reducing immunity
develops in children exposed to low to moderate
level of malaria transmission.
10. Población y área de estudio
Población: 150 niños entre los 6 y
los 16 años.
Primaria Bandanyenje, Distrito
Makone, Zimbabwe.
Criterios de inclusión:
Voluntad para la toma de muestras.
Criterios de exclusión:
Malnutrición.
Estado físico deplorable.
Enfermedades no relacionadas con
la malaria o esquistosomiasis.
11. Recolección de pruebas:
1. Orina y heces durante los tres días (detección infección helmintos).
2. Prueba de sangre el tercer día para diagnóstico de malaria.
3. Aislamiento del plasma para análisis inmunológico.
Tratamiento para esquistosomiasis y malaria según pruebas de
heces y orina, ft sangre.
12. D I A G N Ó S T I C O D E
M A L A R I A P O R P. F a l c i p a r u m
Los RDT ➔ detección de antígenos específicos producidos por el
parásito en la sangre de los individuos infectados (inmunoensayo de
flujo lateral o inmunocromatografo)
13. D I A G N Ó S T I C O D E
M A L A R I A P O R P. F a l c i p a r u m
Placas de sangre gruesas y delgadas: Tinción Giemsa.
Placa gruesa: observación bajo el microscopio en búsqueda de
parásitos (neg). Double check: microscopista experto.
Diagnósticos confirmados =
tratamiento con Artemether +
Lumefantrine.
14. P C R A N I D A D A P A R A
D E T E C C I Ó N D E P. F a l c i p a r u m
Kit de extracción de DNA:
Quiagen.
Primers utilizados: Ambos para DNA de plasmodium:
PaF (Forward) 5´-GAACGAGATCTTAACCTGCTAA-3´
PaR (Reverse) 5´-TCAGCACAATCTGATGAATCAT-3´
Primers para secuencia específica para P. falciparum:
PfnF (Forward): 5´- ACATAGGTAACTATACATTTATTCAGT -3´
PfnF (Reverse): 5´- AGCATCAAAGATACAAATATAAGCA -3´
15. E L I S A
Anticuerpos para antígenos etapa
asexual eritrocítica.
Cultivo de P. falciparum (NF54)para
obtención de antígeno bruto en estudios
previos ➔ búsqueda de anticuerpos
contra antígenos de la etapa asexual
eritrocítica del parásito.
Anticuerpos para antígenos de la
etapa gametocítica.
Clonación de antígenos recombinates
Pfs48/45 y Pfs47 en e.coli con el vector
pET(K-).
16. E N S A Y O D E A L I M E N T A C I Ó N
D E M E M B R A N A
Pruebas positivas para ELISA
PFS48/45 fueron elegidas
aleatoriamente.
Evaluación de la reducción en la
transmisión: An.gambiae y An.stephensi.
25 – 30 mosquitos por muestra de
plasma.
Control negativo: plasma de
ciudadanos norteamericanos que
nunca viajaron a zonas endémicas de
malaria.
Control positivo: 20 muestras de un
estudio previo en Zambia.
22. A U T H O R S A I D Y E S / N O
Baird, 1998; Stone et al., 2016
All the study participants were
school age children between 6 and
16 years of age, showing unlikely
development of protective
immunity with requires repeated
exposure over a long time period.
✔
Chowdhury et al., 2009;
Outchkourov et al., 2012
Pf48/ 45 is a well established target
of malaria transmission blocking
immunity ✖
Achtman et al.; 2005; Baird,
1998; Langhorne et al.; 2008;
Stone et al., 206
It is believed that such
asymptomatic status is achieved in
adults who have had repeat
exposure to malaria resulting in
induction of partially protective
clinical immunity.
✔
Anthony et al. 2007. Drakeley
et al.; 1996; Escalante et al.,
2002; Juliano et al.; 2016
Polymorphism in the antigens
affecting immunogenicity and
functional effectiveness ✔
24. In this population, malaria is not a serious risk,
because they develop a kind of resistance, which is
only there if the person has been exposed constantly.
The fact that people can create a resistance can
make a pathway where it can be easier to fin a
vaccine for malaria.
Its very unlikely that isolated doses of recombinant
antigens wont trigger permanent immunity.
The antigen presentation isn't a guarantee of
developing immunity to the parasite.