Este documento describe la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Explica que la PCR permite amplificar fragmentos de ADN para identificar gérmenes. Detalla los pasos y reactivos de la PCR, incluyendo la extracción de ADN, separación de cadenas, unión de cebadores y replicación. También cubre los usos de la PCR en medicina como diagnóstico de enfermedades infecciosas y genéticas.

1. ESTUDIANTES:
• Katherine Ferrel Llenera
• Rodrigo Nilton Atausinchi Alvarez
• Chaska Alejandra Luna Hurtado
TEMA:
Reacción en cadena de la polimerasa
UNIVERSIDAD ANDINA
DEL CUSCO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

2. ¿Qué es el PCR?
 El PCR es una técnica de laboratorio que permite
amplificar pequeños fragmentos de ADN para identificar
gérmenes agresores que causan enfermedades

3. SU OBJETIVO:
 Es obtener un gran número de copias de un fragmento
de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría
basta partir de una única copia de ese fragmento
original, o molde

4. FUNDAMENTO E IMPORTANCIA
 Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de
los ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo
cual se emplean ciclos de altas y
bajas temperaturas alternadas para separar las hebras de
ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y,
a continuación, dejar que las hebras de ADN vuelvan a unirse
para poder duplicarlas nuevamente.
 El proceso de la PCR está automatizado mediante un aparato
llamado TERMOCICLADOR, que permite calentar y enfriar los
tubos de reacción para controlar la temperatura necesaria para
cada etapa de la reacción.

5. Reactivos
 Para realizar la técnica se necesitan:
 Los 4 desoxirribonucleótidos-trifosfato
 Dos cebadores o iniciadores
 Iones divalentes. Se suele usar magnesio (Mg2+)
 Iones monovalentes, como el potasio.
 Una solución tampón o buffer que mantiene el pH adecuado para el
funcionamiento de la ADN polimerasa.
 ADN polimerasa o mezcla de distintas polimerasas con temperatura
óptima alrededor de 70 °C
 ADN molde, que contiene la región de ADN que se va a amplificar.
 Termociclador, el aparato que mantiene la temperatura necesaria en
cada una de las etapas que conforman un ciclo.

6. ¿Como se realiza?
1. Se extrae de la muestra recogida el ADN que contenga. Esto
incluye células propio cuerpo, pero también material de cualquier
germen que haya
2. Se calienta la muestra hasta casi los 100°C para que las dos
cadenas de ADN se separen
3. Se añade a la muestra un cebador, esto es una secuencia de ADN
sintetizada en el propio laboratorio que se une a un ADN ya
conocido
4. Se enfría la muestra para que el cebador se una al ADN que se
estudia. Acto seguido empieza a funcionar una enzima llamada
DNA-polimerasa que duplica el ADN a estudio
5. Se repiten todos los pasos previos, cada vez q termine un ciclo se
obtendrá una duplicación de las cadenas de ADN previas
6. Con el ADN amplificado ya se pueden realizar estudios geneticos
de forma fácil y rapida

7. TIPOS DE PCR
PCR anidada: consigue
amplificar muestras
mínimas de ADN. Es
capaz de detectar
trazos mínimos
PCR in situ: permite la
detección de ADN en el
mismo lugar de la muestra
, sin tener que procesar
con técnicas de
laboratorio. Se suele
utilizar para biopsias o
raspados de cellas
PCR múltiple: con este
tipo se conciben detectar
varios trazos de ADN a la
vez y con una sola
muestra
PCR con transcriptasa inversa: en
este caso se utilizan cadenas de
ARN para detectar moldes de ADN.
Se utiliza la enzima transcriptasa
inversa , la misma que utiliza el
VIH
PCR cuantitativa: se añade un
componente fluorescente que
permite medir la luz . A mas luz
mas ADN detectado

8. Medicina
En medicina, la PCR se emplea fundamentalmente como herramienta de diagnosis
 Una de las principales aplicaciones de la PCR es hacer pruebas genéticas para
detectar mutaciones en el ADN que provoquen algún tipo de enfermedad.
 El diagnóstico de enfermedades hereditarias presentes en el genoma es un
proceso largo y complicado que puede acortarse significativamente gracias a la
PCR.
 Permite el genotipar la especie o especies que provocan un determinado
cuadro infeccioso: para ello, se amplifica una zona del genoma bacteriano
cuyo producto de PCR posea unas características de tamaño o temperatura de
fusión que permitan identificarlo de forma inequívoca.
 ambién se puede usar la PCR como parte de las pruebas realizadas cuando se
hace un trasplante de tejidos.
 La PCR también se puede usar en revisiones médicas rutinarias, como en los
servicios de donantes de sangre,

10. Se recomienda realizar una PCR en todas las situaciones en las
que se quiera detectar cadenas de ADN y amplificarlo, ya sea para
realizar estudios sobre él o para poder identificar su secuencia
exacta. Como por ejemplo, en las siguientes:
 Diagnóstico microbiológico: el método más fiable para identificar
un germen es aislarlo en un cultivo microbiológico, pero a veces no
es posible llevarlo a cabo, ya sea porque el método de cultivo es
difícil o porque sea demasiado caro.
 Sangre.
 Exudado faríngeo.
 Exudado vaginal.
 Exudado rectal o heces.
 Exudado uretral u orina.
 Biopsia (cutánea, de médula ósea, hepática, etcétera).
 Esputo.

11.  Detección de mutaciones genéticas: las enfermedades
genéticas están causadas por una mutación focal en una región del
ADN concreta. Estudiarlas directamente es muy difícil, por eso se opta
por multiplicar primero todo el ADN de la muestra y hacer estudios con
base más amplia.
 Estudios de medicina legal: su uso está muy extendido en este
campo y tiene multitud de aplicaciones. Las más frecuentes son la
identificación de cadáveres, el estudio de pruebas de escenas del
crimen, investigación de casos de abuso sexual, estudios de
paternidad, etcétera.
 Revisiones de VIH o hepatitis víricas: el VIH y los virus de la hepatitis
C y B se encuentran constantemente en la sangre de las personas
infectadas. Se deben estudiar sus niveles periódicamente para conocer
la gravedad de la enfermedad y para ello se utiliza la detección de ADN
con PCR