Practica 5

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Lidia Elizabeth Guzman Heras
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N° 5
Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 23 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 30 de Junio del 2014
PRÁCTICA N° 5
Título de la Práctica: Intoxicación por cloroformo.
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Intraperitonial
Tiempos:
o Inicio de la práctica: 08:24am
o Hora de administración del toxico al cobayo: 08:34 am
o Deceso del animal: 09:02 am (28 minutos)
o Inicio de la destilación: 10:15 am
o Finalización de la destilación: 10:45 am
o Final de la práctica: 12:45 am
 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por cloroformo.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
toxico.
3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de
identificación.

 MATERIALES
o Jeringa de 5 cc
o Varilla
o Espátula
o Probeta
o Campana
o Panema
o Bureta
o Soporte universal
o Cinta plástica
o Lámpara de alcohol
o Fosforo
o Pinzas
o Cocineta
o Porta tubo
o Tabla de disección
o Cronómetro
o Equipo de disección
o Bisturí
o Vasos de precipitación 200 y
500 ml.
o Erlenmeyer
o Equipo de destilación.
o Tubos de ensayo
o Pipetas
o Guantes de látex
o Mascarilla
o Mandil
o Gorro
o Zapatones en caso de usar
sandalias
 SUSTANCIAS
 Cloroformo.
 Acido tartárico.
 Nitrato de plata.
 Ácido clorhídrico.
 Potasa alcohólica.
 Percloruro de hierro.
 Beta naftol.
 Timol.
 Resorcinol.
 Clorhidrato de piperacina.
 Cristal de yodo.

 PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.
2. Colocamos el cobayo en el panema.
3. Tener todos los materiales a utilizar listos.
4. Administramos al cobayo, 5 ml de cloroformo por vía intraperitoneal y
anotamos el tiempo.
5. Observamos los efectos que produce en el cobayo.
6. Después de 17 minutos pasado la primera dosis, inyectamos 5 ml más del toxico
y con esto se llegó a la muerte del animal.
7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bisturí.
8. Observamos el estado de las vísceras.
9. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras
(picadas lo más finas posibles).
10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación.
11. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth),
asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado.
12. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara
de alcohol esto con movimiento circular durante 30 minutos (el destilado fue
recibido en NaOH).
13. Con el destilado procedimos a realizar las reacciones de identificación del
cloroformo en medios biológicos.
14. Una vez terminada la práctica se limpia todo el material y el área utilizada.
 REACCIONES DE RECONICIMIENTO
1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se
inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y
que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto
originando un precipitado de cloruro de plata.
2. REACCIÓN DE DUMAS.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene
cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan
formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ----- ClK + HCO2K + H 2 O
Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en
caliente.
A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.
3. REACCIÓN DE LUSTGARTEN.- al calentar la muestra con unos miligramos
de beta naftol y solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un
trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro;
con resorcinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.
4. REACCIÓN DE ROSEBOOM.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la
solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de
piperacina; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta
inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.
 GRÁFICOS:
Animal de experimentación
cobayo
Extraer las vísceras del
cobayoInyectar 10 ml el toxico
(cloroformo)
Preparar el equipo de
destilación
Triturar las vísceras
Observar los síntomas del
cobayo luego de la
administración del toxico
Obtener el destilado para
realizar el análisis
Colocar al cobayo en la tabla
de disección
1
4
852
7
3
6

 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
REACCIÓN:
Reacción positivo característico precipitado de AgNO3
REACCIÓN DE DUMAS.
Reacción positivo característico color rojo
Reacción positivo característico precipitado de cloruro
de plata
Antes
Antes
Después
Después
En frìo En caliente
Antes Después

REACCIÓN DE LUSTGARTEN
Reacción positivo característico se observó el color azul.
Reacción positivo característico se observó el
color amarillo.
Reacción positivo característico se observó el color
rojo - violaceo.
Después
Antes
Antes Después
Antes Después

REACCIÓN DE ROSEBOOM
Reacción positivo no se observó la coloración
amarillo-rojiza.
 OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar el toxico (cloroformo) por vía intraperitoneal el
cobayo presentó respiración agitada, a los 5 minutos depresión del SNC, perdida de la
actividad motora, lagrimeo, convulsiones y a los 7 minutos presento hipoxia y
finalmente a los 28 minutos murió.
 CONCLUSION
Al término de esta práctica podemos darnos cuenta que el cloroformo es muy tóxico, al
observar la rápida acción de depresión del SNC, perdida de movilidad, además de las
convulsiones y la hipoxia que llevaron a la muerte del animal en un periodo de 28
minutos con una dosis de 10 ml de toxico administrada en 2 volúmenes de 5 ml y
finalmente mediante las reacciones de identificación constatamos la presencia de
cloroformo en el destilado de las vísceras.
 RECOMENDACIONES
 Realizar la asepsia del área a trabajar.
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así
intoxicaciones.
 Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y
que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del
toxico.
DespuésAntes

 CUESTIONARIO
¿QUE ES EL CLOROFORMO?
El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de
fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o
del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y
ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no
inflamable, incoloro, de olor penetrante, dulzón y cítrico.
¿CUAL ES EL EFECTO DEL CLOROFORMO EN LA SALUD?
Inhalación: Actúa como anestésico relativamente potente. Irrita el tracto respiratorio y
produce efectos en el sistema nervioso central, incluyendo dolor de cabeza,
somnolencia, mareos. La exposición a altas concentraciones puede resultar en
inconsciencia e inclusive muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes sanguíneos.
La exposición prolongada puede llevar a la muerte debido a una frecuencia cardíaca
irregular y desórdenes renales y hepáticos.
Ingestión: Causa quemaduras severas de boca y garganta, dolor pectoral y vómitos.
Grandes cantidades pueden causar síntomas similares a los de la inhalación.
Contacto con la Piel: Causa irritación cutánea causando enrojecimiento y dolor.
Elimina los aceites naturales. Puede ser absorbido a través de la piel.
Contacto con los Ojos: Los vapores causan dolor e irritación ocular. Las salpicaduras
pueden causar severa irritación y posible daño ocular.
Exposición Crónica: La exposición prolongada o repetida a los vapores puede causar
daño al sistema nervioso central, corazón, hígado y riñones. El contacto con el líquido
elimina las grasas y puede causar irritación crónica de la piel con grietas y resequedad y
la correspondiente dermatitis. Se sospecha que el cloroformo es un carcinógeno en
humanos.
¿CUALES SON LAS MEDIDAS DE PREACUSION ANTE EL CLOROFORMO?
 Tener un límite de Exposición Aérea
 Un Sistema de Ventilación adecuado: Se recomienda un sistema de escape local
y/o general para las exposiciones de empleados debajo de los Límites de
Exposición Aérea. En general, se prefiere la ventilación de extractor local
debido a que puede controlar las emisiones del contaminante en su fuente
impidiendo dispersión del mismo al lugar general de trabajo.
 Protegerse la piel lo más que se pueda para evitar contacto con el toxico. Usen
vestimenta protectora impermeables, incluyendo botas, guantes, ropa de
laboratorio, delantal o monos para evitar contacto con la piel.

 Protección para los Ojos: Utilice gafas protectoras contra productos químicos
y/o un protector de cara completo donde el contacto sea posible. Mantener en el
de trabajo un área instalación destinada al lavado, remojo y enjuague rápido de
los ojos.
¿CUÁL ES LA TOXICOLOGIA DEL CLOROFORMO?
Datos Toxicológicos: Cloroformo: LD50 oral en ratas: 908 mg/kg; LD50 piel de
conejos: > 20 gm/kg; LC50 inhalación en ratas: 47702 mg/m3/4H; irritation data: piel
de conejos 10 mg/24H abierta leve; Ojo de conejos: 20 mg/24H moderada; Ha sido
investigado como tumorígeno, mutagénico y causante de efectos reproductivos.
Toxicidad Reproductiva: Se han observado defectos al nacimiento en ratas y ratones
expuestos a la inhalación de cloroformo a concentraciones en el aire mayores de 100
ppm. La ingestión de cloroformo por animales de laboratorio gestantes, ha causado
fetotoxicidad pero no defectos al nacimiento y sólo a niveles que causan severos efectos
en la madre.
¿HAY ALGÚN EXAMEN MÉDICO QUE DETERMINE SI HE ESTADO
EXPUESTO AL CLOROFORMO?
Pese a que se puede medir la cantidad de cloroformo en el aire que usted exhala, en la
sangre, en la orina y en los tejidos del cuerpo, no contamos con pruebas fiables que
determinen cuánta exposición de cloroformo ha habido, o si usted experimentará efectos
nocivos en la salud. La medición del cloroformo en los líquidos y los tejidos del
organismo puede ayudar a determinar si usted ha estado en contacto con grandes
cantidades de cloroformo. Sin embargo, estas pruebas solo son de utilidad si se realizan
poco después de que ha habido exposición, debido a que el cloroformo sale rápidamente
del cuerpo.
Las pruebas de sangre para medir la cantidad de enzimas del hígado pueden ayudar a
saber si el hígado presenta daños, pero no se puede determinar si éstos fueron causados
por el cloroformo.
¿EN DONDE SE PUEDE ENCONTRAR EL CLOROFORMO?
Agua: En el medio acuático, el cloroformo se descompone con extrema lentitud.
Debido a su gran volatilidad escapa en forma de gas de los cuerpos de agua
superficiales.
Aire: Debido a su alto grado de volatilidad, el cloroformo llega a la atmósfera, donde se
acumula en pequeñas cantidades. Se descompone por fotólisis.
Degradación, productos de la descomposición: En presencia de agentes oxidantes, el
cloroformo se descompone formando fosgeno y ácido hidroclórico.
Cadena alimentaria: El cloroformo se encuentra en todas partes y, por lo tanto,
también ha sido hallado en los alimentos. El agua potable contiene, en ciertas ocasiones,
grandes concentraciones de cloroformo resultante de la cloración del agua.

USOS
Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:
 En química se utiliza en la separación orgánica.
 En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión.
 Se utiliza en síntesis orgánica.
 Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente).
 En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.
 Como anestésico.
 BIBLIOGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico.
Madrid. España
 WEBGRAFÍA
http://www.dorwil.com.ar/msds/Cloroformo.pdf
http://cloroformo.org/usos/
http://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs6.html
 AUTORIA
Bioq. Farm. Carlos García MSc.
 FIRMAS DE LOS INTEGRANTES
__________________ __________________
Elizabeth Guzmán Geovanny Ramón
_________________________
Gisela Fernández

GLOSARIO
CARCINÓGENO: Cualquier sustancia o agente capaz de desencadenar un cáncer en
las células sanas; no necesariamente tiene que ser un agente que provoque mutación en
el material genético de las células.
FETOTOXICIDAD: Alteración del proceso de desarrollo fetal causado por la
exposición materna a agentes como radiación, virus, gases, drogas o fármacos. Sus
efectos incluyen malformaciones, defectos de crecimiento o muerte fetal.
GESTANTE: Estado de embarazo o gestación. Estado fisiológico de la mujer que se
inicia con la fecundación y termina con el parto.
SOMNOLENCIA: Se refiere a sentirse anormalmente soñoliento durante el día. Las
personas que son soñolientas pueden quedarse dormidas en situaciones o momentos
inapropiados.
TUMORÍGENO: Este adjetivo se aplica a cualquier sustancia que cause formación de
tumores.
ANEXOS:

Practica 5

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