Este documento describe los protocolos para realizar experimentos sobre la fotosíntesis y cromatografía de pigmentos vegetales. Los objetivos son determinar la presencia de pigmentos en hojas y flores usando cromatografía, y demostrar la formación de carbohidratos durante la fotosíntesis mediante la detección de almidón. Se detallan los materiales, reactivos y metodologías requeridas para estos experimentos, incluyendo el uso de hojas de plantas, soluciones químicas, microscopios y otros equipos.

1. Disolvente (1.8 ml de
Éter, 0.2 ml de acetona y
2 ml de agua).
4 ml de acetona.
10 ml de alcohol al 96%
10 ml Lugol al 1%
Soluciones
3 ml solución de
bicarbonato al 5%
MATERIALES EQUIPOS E
INSUMOS
Microscopio
Baño de María
10 tubos de ensayo
1 caja de Petri
1 mortero y pistilo
2 pipetas de 10 ml
1 pinza de madera
1 pinza metálica
2 capilares
Clips
Regla
Porta objetos
Cubre objetos
Guantes
1 papel de filtro
Algodón
1 papel milimetrado
Hojas verdes de espinaca
Pétalos de geranio rojo
Elodea y agua de acuario
Hojas frescas de geranio expuestas a
la luz
Hojas de planta de geranio que han
permanecido en oscuridad por
completo.
Fuente de luz (una toma con enchufe
y un bombillo de 100 w)
Cinta de enmascarar
Tapabocas
FOTOSINTESIS
REACTIVOS
Determinar la
presencia de
pigmentos vegetales
en hojas y flores.
Separa pigmentos
vegetales por medio
de cromatografía de
reparto.
Demostrar la formación
de carbohidratos
durante la fotosíntesis.
OBJETIVOS

2. NECESIDAD DE LUZ
Y CO2
CROMATOGRAFIA
DE REPARTO
Ocho días antes del inicio de estas experiencias,
cuando la planta reciba poca luz. Cubra una de sus
hojas con cartulina negra, dejando un recuadro
expuesto a la luz. El día de la practica, arranque las
hojas que están en la cartulina y otra cualquiera de la
misma planta, en el momento de la practica.
Enrolle las hojas y colóquelas en tubos de ensayo
marcados. Adicione alcohol de 96° hasta que queden
cubiertas. Para hacer las hojas mas permeables al
Lugol, lleve los tubos de ensayo, con las hojas, al baño
María por 30 minutos. Las hojas deben volverse
translucidas.
Saque las hojas con las pinzas metálicas y colóquelas,
cada una por separado, en una caja de Petri.
Agregue Lugol en cada hoja hasta que queden
cubiertas y espere por 5 minutos. Si hay almidón se
desarrollarla un color oscuro. Observe la distribución
del almidón en el recuadro expuesto a la luz con
relación a la parte cubierta. ¿a que se debe la
presencia o ausencia del almidón en las hojas?
Prepare una placa con una muestra de cada una,
obsérvelas en el microscopio y compare. ¿Qué
diferencia encuentra en cada una de ellas?
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Corte un cm de las
terminaciones de elodea en
sentido diagonal. Coloque en
una rama de elodea un tubo de
ensayo con una solución que
contenga tres ml de
bicarbonato de sodio al 5% y 1
ml de agua de acuario.
En otro tubo de ensayo con 4
ml de agua hervida fría, coloque
otra rama de elodea cortada en
diagonal.
Coloque los dos tubos frente a
una fuerte luz a una distancia
de 50 cm y espere 5 minutos.
Cuente el numero de burbujas
de O2 que se liberan de las
ramas de elodea.
Repita el conteo a distancias de
20 cm, 10 cm, 5 cm de la fuente
de luz.
En papel milimetrado grafique
los datos obtenidos registrando
en el eje X el numero de
burbujas por minuto y en el eje
Y la distancia.
Observe la tendencia de la
línea y analice. ¿Qué sucede
con la producción de oxigeno
en cada caso?
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6.
Obtenga una tira de papel filtro con
extremo en punta, como el de la
figura, que pueda entrar fácilmente
en un tubo de ensayo.
Macere en un mortero una hoja de
espinaca y agregue de ml de
acetona. a) 2cm del extremo de la
punta del papel filtro coloque, con
un capilar, en un mismo punto tres
veces el extracto de espinaca. deje
secar entre aplicación y aplicación.
En un tubo de ensayo coloque 2 ml
de disolvente (1.8 ml de éter, 0.2 ml
de acetona), mas 2 ml de agua.
Introduzca la tira de papel en el tubo
de ensayo que contiene el
disolvente y colóquela de tal modo
que esta mezcla solo cubra hasta un
cm del extremo del papel filtro.
Asegure el extremo superior de la
tira con el clip en la boca del tubo de
ensayo.
Coloque en el tubo un tapón de
algodón y espere 0 minutos
exactamente.
Repita el mismo procedimiento con
los pétalos de geranio rojo.
Mida la distancia total recorrida por
el disolvente y la recorrida por cada
pigmento. Debe considerar que los
extractos obtenidos a partir de
espinaca y pétalos de geranio son
los patrones de recorrido.
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METODOLOGIA
PRESENCIA DE ALMIDON EN UNA
HOJA