Este documento proporciona información sobre técnicas para el cultivo de bacterias, incluyendo descripciones de características macroscópicas y microscópicas observadas en medios líquidos, semisólidos y sólidos. Explica métodos de siembra como el estriado por cuadrante, inoculación con hisopo y características morfológicas de colonias. También incluye detalles sobre requerimientos de oxígeno, tinción bacteriana y formatos para la descripción de cepas bacterianas.

1. Tema 3 Cultivo de bacterias
Microbiología Experimental
Preparo: Micro Exp
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Dudas y sugerencias Inbox de Micro Exp

2. INOCULACIÓN DE MEDIO LÍQUIDO

3. Evaluación de crecimiento en medio líquido
Superficie
Anillo
Película
Sedimento
Características de crecimiento
Floculento Turbio

4. PELICULA

5. SEDIMENTO
1. Escaso
2. Abundante
3. Nulo
Floculenta Grumosa
CONSISTENCIA:
CANTIDAD:
Viscosa
(Al golpear el tubo
se levantan hilos de
sedimento)
(Se forman grumos
de sedimentos)
(Se forman bloques
o flóculos de
sedimentos)
Granular
(Se forman granos
pequeños de
sedimentos
(parecido a arena))

6. TURBIDEZ (OPACIDAD)
Sin turbidez
Ligeramente
turbio
Muy turbio Nula
Permanente Transitoria
Después de agitar
t1
t2
Se vuelve a
sedimentar
No vuelve a
sedimentar
Nivel de turbidez

7. Requerimientos de oxígeno
Becton, Dickinson and Company (2003).
Medio Thioglicolato fluido. Disponible en
https://legacy.bd.com/europe/regulatory/
assets/ifu/hb/ce/ba/es-ba-257144.pdf
0.075% de agar
Anaerobio
aerotolerante
Anaerobio
obligado
Anaerobio
facultativo
Aerobio
obligado
Anaerobio
obligado
Se adiciona un
poco de agar
para mantener
los patrones de
crecimiento
después de
incubación

8. INOCULACIÓN EN MEDIO SEMISÓLIDO

9. Evaluación de movilidad
Móvil Móvil
Inmóvil

10. INOCULACIÓN EN MEDIO SÓLIDO/
TUBO INCLINADO
Estría ondulada
Estría
ondulada
Estría
recta

11. INOCULACIÓN EN MEDIO SÓLIDO/
CAJA DE PETRI O PLACA DE AGAR-
AGOTAMIENTO POR ESTRIADO
Estría ondulada/
continua
Estríado por cuadrante
simple
Estriado por cuadrante
radial
5

12. INOCULACIÓN SUPERFICIAL MASIVA CON
HISOPO
Inoculación superficial con hisopo
5

13. CARACTERÍSTICAS DE LA ESTRÍA
Filiforme
Ondulada
(Equinulada)
Perlada
Rizoide
Arborescente Difusa

14. CARACTERÍSTICAS MORFOCOLONIALES
ENTERO/SUAVE IRREGULAR LOBULADO DENTADA RIZOIDE
BORDE
ELEVACIÓN
CONVEXA UMBONADA
PLANA ELEVADA CRATERIFORME
FORMA
ACUMINADA
CIRCULAR AMEBOIDE FUSIFORME FILAMENTOSA RIZOIDE
PUNTIFORME
TAMAÑO
Grandes
Puede expresarse en mm (e.g. <2mm, >2mm, etc)
PUNTIFORME
ONDULADO
(plegadas)
(papilares)

15. TEXTURA
MUCOIDE/VISCOSA
SECA/DURA CREMOSA/BUTIRÁCEA/
SUAVE
MEMBRANOSA

16. OLOR
• Fétido.
• Tierra mojada.
• Amoniacal.
• Yeso.

17. COLOR
IRIDICENTE OPACO TRANSLÚCIDO
PROPIEDADES ANTE LA LUZ

18. PIGMENTOS
DIFUSIBLES
(HIDROSOLUBLES)
NO DIFUSIBLES
(LIPOSOLUBLES)
GAMA DE COLORES:INCOLORA, BLANQUECINA, VIOLETA, VERDE, ROJA, ETC.

19. DESCRIPCIONES MORFOCOLONIALES
Colonias cremosas, opacas,
anaranjadas, circulares con
borde
Colonias translúcidas, marrones,
circulares con borde ondulado
Colonias suaves, opacas,
amarillo canario, circulares con
borde entero
Colonias suaves, puntiformes
opacas, doradas, circulares con
borde entero
Colonias grandes, opacas, blancas,
circulares con borde entero
Colonias secas, opacas, blancas,
filamentosas con borde rizoide
Colonias secas, opacas, blancas,
umbonadas con borde irregular
Colonias secas, opacas, blancas,
ameboides, crateriformes con
borde ondulado

20. DESCRIBE LAS COLONIAS

21. DESCRIBE LAS COLONIAS

22. DESCRIBE LAS COLONIAS

23. DESCRIBE LAS COLONIAS

24. FORMATO PARA CARACTERIZACIÓN DE
CRECIMIENTO BACTERIANO
CEPA:
CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
MEDIO LÍQUIDO MORFOLOGÍA Y AGRUPACIÓN
Desarrollo superficial
Sedimento: Cantidad y consistencia
Turbidez
Opacidad despues de agitar
Descripción de forma y posible agrupación, en el caso de no presentar
agrupación característica, se debe indicar: "sin agrupación
característica
MEDIO SEMISÓLIDO
Movilidad: TINCIÓN DE GRAM
MEDIO SÓLIDO
Características de la estría: (En agar inclinado) Resultado de la tinción de Gram: Gram (+)/(-)
Morfocoloniales
Tamaño
Forma
Elevación
Borde
Textura:
Olor:
Color (:

25. INCUBACIÓN
• Debe realizarse a las condiciones óptimas de
crecimiento.
• RECUERDA QUE SIEMPRE DEBE DEFINIRSE:
TEMPERATURA, TIEMPO Y REQUERIMIENTOS DE
OXÍGENO.
• Por ejemplo:
Para el caso de bacterias mesófilas aerobias.
• Incubación a 37°C/24 h en aerobiosis (atmósfera
abierta)
Para el caso de actinobacterias aerobias.
• Incubación a 37°C/3-5 días en aerobiosis
(atmósfera abierta)
Para el caso de bacterias mesófilas anaerobias
• Incubación a 37°C/18-48 h en anaerobiosis.
Estas condiciones muchas veces son reportadas dentro
de las hojas de formulación del medio de cultivo

26. EJERCICIO:
DESCRIBE LAS
CARÁCTERÍSTICAS DEL
MICROORGANISMO A y
B

27. REALIZA LA DESCRIPCIÓN DE LA SIGUIENTE
COLONIAS INOCULADAS EN MEDIO LÍQUIDO

28. Medio líquido
Microorganismo A Microorganismo B
t=1 t=2 t=1 t=2

29. REALIZA LA DESCRIPCIÓN DE LA SIGUIENTE
COLONIAS INOCULADAS EN MEDIO SÓLIDO

30. • Microorganismo A • Microorganismo B

31. REALIZA LA DESCRIPCIÓN DEL CRECIMIENTO EN LA
ESTRÍA RECTA DE LOS SIGUIENTES
MICROORGANISMOS

32. MICROORGANISMO
A
MICROORGANISMO
B

33. REALIZA LA DESCRIPCIÓN DEL CRECIMIENTO EN
MEDIO SEMISÓLIDO

34. MICROORGANISMO
A
MICROORGANISMO
B

35. REALIZA LA DESCRIPCIÓN DE LA TINCIÓN

36. TINCIONES DIFERENCIALES
Microorganismo A: Tinción de
Ziehl-Neelsen Microorganismo B Tinción de Gram

37. REALIZA LA DESCRIPCIÓN
CEPA:
CARACTERÍSTICAS MACROSCÓPICAS CARACTERÍSTICAS MICROSCÓPICAS
MEDIO LÍQUIDO MORFOLOGÍA Y AGRUPACIÓN
Desarrollo superficial
Sedimento: Cantidad y consistencia
Turbidez
Opacidad despues de agitar
Descripción de forma y posible agrupación, en el caso de no presentar
agrupación característica, se debe indicar: "sin agrupación
característica
MEDIO SEMISÓLIDO
Movilidad: TINCIÓN DE GRAM
MEDIO SÓLIDO
Características de la estría: (En agar inclinado) Resultado de la tinción de Gram: Gram (+)/(-)
Morfocoloniales
Tamaño
Forma
Elevación
Superficie
Borde
Olor:

38. EJERCICIOS GRUPALES

39. CULTIVO 1
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar BHI
(Estriado por
Cuadrante radial)

40. CULTIVO 2
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar BHI
(Estriado por
Cuadrante radial)

41. CULTIVO 3
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar BHI
(Estriado por
Cuadrante radial)

42. CULTIVO 4
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar
sangre
(Estriado por
Cuadrante
radial)

43. CULTIVO 5
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar
(Estriado por
Cuadrante
radial)

44. CULTIVO 6
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar
(Estriado por
Cuadrante
radial)

45. CULTIVO 7
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar
sangre
(Estriado por
Cuadrante
radial)

46. CULTIVO 8
Caldo BHI Medio SIM
(Agar semisólido)
Agar inclinado BHI
(Agar sólido)
Tinción de
Gram
Placa de agar
(Estriado por
Cuadrante
radial)

47. https://www.scienceprofonline.com/microbiology/use-
of-liquid-nutrient-broth-media-for-growing-bacteria-
2.html

48. Los cultivos anteriores pertenecen a los
siguientes microorganismos
1.Staphylococcus aureus
2. Pseudomonas aeruginosa
3. Escherichia coli
4. Bacillus cereus
5. Streptomyces griseus
6. Vibrio cholerae
7. Listeria monocitogenes
8. Serratia marcescens
A partir de las características
macroscópicas y microscópicas de
los cultivos puros, indica a los
laboratoristas a que
microrganismo pertenece cada
cultivo

49. Indique los requerimientos de oxigeno en
medio tioglicolato fluido
A B C D
E

50. INFIERE EL MÉTODO DE SIEMBRA
1. Estriado por cuadrante radial
2. Inoculación masiva con hisopo
3. Estriado por cuadrante simple
4. Estría ondulada

51. INFIERE EL MÉTODO DE SIEMBRA
1. Estriado por cuadrante radial
2. Inoculación superficial masiva
con hisopo
3. Siembra por vertido en placa
4. Estría ondulada

52. MATERIAL DE CONSULTA ADICIONAL
TÉCNICAS DE SIEMBRA
DESCRIPCIÓN BACTERIANA
1. Características morfocoloniales
• https://www.youtube.com/watch?v=d0Pn2IaaYkk
1. Presentaciones técnicas de
siembra de bacterias
• https://www.youtube.com/watch?v
=0TIoar2eH6o
2. Siembra en caldo
• https://www.youtube.com/watch?v
=VO6XAd56AuM
3. Siembra por picadura
• https://www.youtube.com/watch?v
=TqJ-RxBG4Y8
4. Siembra por estría en tubo
• https://www.youtube.com/watch?v
=DuKXV7UZ8h4
5. Siembra extensión superficial
• https://www.youtube.com/watch?v
=ChzRUbFPujc
6. Siembra por vertido en placa
• https://www.youtube.com/watch?v
=fg8oY300cvk
7. Siembra por estriado en caja
• https://www.youtube.com/watch?v
=W6xpPJZIb1E
8. Siembra masiva con hisopo
• https://www.youtube.com/watch?v
=i6nR9UYW0e0