SlideShare una empresa de Scribd logo
1 de 23
PRUEBAS BIOQUÍMICAS Dra. Natalia Izurieta Cergneux PRÁCTICA No. 5 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA
PRUEBAS BIOQUÍMICAS La identificación definitiva de una especie requiere de pruebas bioquímicas.  Permiten conocer las actividades metabólicas y enzimáticas de los microorganismos.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS Identificar los productos finales de los procesos metabólicos  Se debe conocer: 	1.- Cambios que se producen 	2.- Reacciones químicas que ocurren 	3.- Enzimas que intervienen 	4.- Productos intermedios 	5.- Secuencias de las reacciones bioquímicas
PRUEBAS BIOQUÍMICAS Los microorganismos se cultivan en medios S/D  SS + SD            PB Las pruebas bioquímicas disponibles para la identificación de microorganismos de la familia Enterobacteriaceae son: 	1.- Pruebas IMVIC  	2.- Prueba de TSI  	3.- Prueba de Ureasa      4.- Movilidad
PRUEBAS IMVIC Incluyen un grupo de cuatro pruebas usadas para diferenciar a los microorganismos entéricos (Familia Enterobacteriaceae)  Las pruebas son: INDOL 	  ROJO DE METILO VOGES – PROSKAUER CITRATO.
PRUEBA DE INDOL FUNDAMENTO:       TRIPTOFANASA H2O + TRIPTOFANO                       		INDOL + AC. PIRUVICO + NH3 PROTOCOLO: Se inocula en caldo triptosa e incuba a 35 - 37°C durante 24 horas.  Luego de este período, se añaden 5 gotas del reactivo de Kovacs. INTERPRETACIÓN: NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO
PRUEBA DE CITRATO CITRATO PIRUVATO Na2CO3 CO2 + Na + H2O AgarCitratado de Simmons Ph ALCALINO AZUL DE  BROMOTIMOL PRUEBA + COLOR AZUL
PRUEBA DE CITRATO PROTOCOLO 	1.- Se inocula el agar de superficie inclinada con una sola estría en la superficie.  	2.- Se incuba a 35 - 37°C durante 24 horas y se realiza la lectura de la prueba.
PRUEBA DE CITRATO INTERPRETACIÓN: 	Es positiva cuando se observa crecimiento a lo largo de la estría, y este se acompaña o no de un viraje del indicador de verde a azul. El cambio de color del medio a azul indica una reacción positiva. POSITIVO NEGATIVO
PRUEBA DE ROJO DE METILO Y VOGES PROSKAUER
PRUEBA DE ROJO DE METILO FUNDAMENTO: FERMENTACIÓN ÁCIDO MIXTA GLUCOSA ÁCIDOS LÁCTICO, ACÉTICO Y SUCCÍNICO pH ÁCIDO + CO2, H2 y ETANOL 5 GOTAS ROJO DE METILO COLOR ROJO POSITIVO NEGATIVO
PRUEBA DE ROJO DE METILO PROTOCOLO: (caldo MRVP) 1.- Se Inocula el medio  con un cultivo puro joven.  	2.- Se incuba a 35 – 37°C durante 48 horas.  	3.- Luego de terminado el tiempo de incubación se añaden 5 gotas del reactivo de Rojo de Metilo (no agitar). INTERPRETACIÓN: SIN INOCULAR NEGATIVO POSITIVO
PRUEBA DE VOGES PROSKAUER FUNDAMENTO: FERMENTACIÓN BUTILENGLICÓLICA GLUCOSA ACETIL-METIL-CARBINOL (ACETOÍNA) REACTIVO DE BARRETT KOH 40% 2-3 BUTANODIOL, ETANOL, H2 y CO2 POSITIVO NEGATIVO
PRUEBA TSI (TRIPLE SUGAR IRON) Medio S/D  Permite evidenciar:  Capacidad de producción de ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un único medio. Permite la identificación de la producción de SH2.
PRUEBA TSI  Esta prueba tiene como objetivo diferenciar entre:
PRUEBA TSI FUNDAMENTO: El extracto de carne y peptona aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano.  La lactosa, sacarosa y glucosa son los HC fermentables.  El rojo de fenol es el indicador de pH. Por la fermentación de los azúcares, se producen ácidos que se detectan por el indicador de pH.
PRUEBA TSI PROTOCOLO: 	1.- Se inocula los tubos de TSI con punta.  	2.- Se introduce la punta hasta 3 a 5 mm del fondo del tubo.  	3.- Luego de retirar  el asadel fondo, se estría el pico con un movimiento en zigzag, de un lado al otro.  	4.- Se incuba a 35 - 37°C durante 24 horas. INOCULACION CON PUNTA ESTRIACION EN ZIGZAG
PRUEBA TSI INTERPRETACIÓN: Se debe considerar los cambios de color en el pico y el fondo del tubo y la formación de burbujas.  Cuando el medio es ácido (A) este se torna de color amarillo y cuando es alcalino (ALK) permanece de color rojo.
PRUEBA TSI El medio contiene 0.1% de glucosa y 1% de lactosa y sacarosa respectivamente.  Si el microorganismo sólo fermenta la glucosa, el ácido producido en el fondo acidifica el medio en esa zona y se torna de color amarillo. Cuando el microorganismo fermenta la lactosa y la sacarosa, el ácido producido es suficiente como para virar el color del medio a amarillo.  El medio permanece rojo cuando no se produce fermentación de ninguno de los azúcares.
PRUEBA TSI Si hay formación de gas durante el proceso de fermentación, en el fondo del medio se observan burbujas o la ruptura del agar.  Si las bacteria son productoras de SH2 este se evidencia como un precipitado negro en el fondo del tubo.
PRUEBA DE LA UREASA FUNDAMENTO: UREASA UREA 2 MOLÉCULAS DE NH4 pH ALCALINO RESULTADOS ROJO DE FENOL + - COLOR FUCSIA
PRUEBA DE LA UREASA PROTOCOLO: 1.- Se siembra el microorganismo en estudio en caldo urea o agar úrea de Cristensen. 	2.- Se incuba a 35 - 37° C durante 24 horas. INTERPRETACIÓN: NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO Agar Úrea de Cristensen

Más contenido relacionado

La actualidad más candente

2.5.morfologia colonial
2.5.morfologia colonial2.5.morfologia colonial
2.5.morfologia colonialArianita Ayón
 
Agar TCBS - Agar Selectivo para Vibrios
Agar TCBS - Agar Selectivo para VibriosAgar TCBS - Agar Selectivo para Vibrios
Agar TCBS - Agar Selectivo para VibriosCitrin Longin
 
Guía III: Identificación de Enterobacterias
Guía III: Identificación de EnterobacteriasGuía III: Identificación de Enterobacterias
Guía III: Identificación de EnterobacteriasAlonso Custodio
 
Enterobacterias
Enterobacterias  Enterobacterias
Enterobacterias arizandy92
 
Agar manitol salado
Agar manitol saladoAgar manitol salado
Agar manitol saladoFR GB
 
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicas
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicasReporte de práctica 3. Pruebas bioquímicas
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicasAlan Hernandez
 
107. pw e coli-2016_uc
107.  pw e coli-2016_uc107.  pw e coli-2016_uc
107. pw e coli-2016_ucSACERDOTE92
 
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivos
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivosAlgoritmo para la identificación de cocos gramspositivos
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivosRai Encalada
 
Medios de cultivo diferenciales
Medios de cultivo diferencialesMedios de cultivo diferenciales
Medios de cultivo diferencialesEdwin R. Peralta
 
Atlas bacteriologico.a
Atlas bacteriologico.aAtlas bacteriologico.a
Atlas bacteriologico.aCasiMedi.com
 
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-lecheMariana Reyes Fatecha
 
Medios De Cultivo Y Pruebas Bioquimica
Medios De Cultivo Y Pruebas BioquimicaMedios De Cultivo Y Pruebas Bioquimica
Medios De Cultivo Y Pruebas BioquimicaGran Farmacéutica
 

La actualidad más candente (20)

2.5.morfologia colonial
2.5.morfologia colonial2.5.morfologia colonial
2.5.morfologia colonial
 
Agar TCBS - Agar Selectivo para Vibrios
Agar TCBS - Agar Selectivo para VibriosAgar TCBS - Agar Selectivo para Vibrios
Agar TCBS - Agar Selectivo para Vibrios
 
Guía III: Identificación de Enterobacterias
Guía III: Identificación de EnterobacteriasGuía III: Identificación de Enterobacterias
Guía III: Identificación de Enterobacterias
 
Enterobacterias
Enterobacterias  Enterobacterias
Enterobacterias
 
Agar manitol salado
Agar manitol saladoAgar manitol salado
Agar manitol salado
 
Métodos de siembra y aislamiento
Métodos de siembra y aislamientoMétodos de siembra y aislamiento
Métodos de siembra y aislamiento
 
Prueba mio
Prueba mioPrueba mio
Prueba mio
 
Pruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicasPruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicas
 
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicas
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicasReporte de práctica 3. Pruebas bioquímicas
Reporte de práctica 3. Pruebas bioquímicas
 
107. pw e coli-2016_uc
107.  pw e coli-2016_uc107.  pw e coli-2016_uc
107. pw e coli-2016_uc
 
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivos
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivosAlgoritmo para la identificación de cocos gramspositivos
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivos
 
Resumen. escherichia coli
Resumen.  escherichia coliResumen.  escherichia coli
Resumen. escherichia coli
 
Medios de cultivo diferenciales
Medios de cultivo diferencialesMedios de cultivo diferenciales
Medios de cultivo diferenciales
 
Agar hierro kligler
Agar hierro  kliglerAgar hierro  kligler
Agar hierro kligler
 
Pruebas bioquímicas
Pruebas bioquímicasPruebas bioquímicas
Pruebas bioquímicas
 
Proteus copia
Proteus   copiaProteus   copia
Proteus copia
 
Atlas bacteriologico.a
Atlas bacteriologico.aAtlas bacteriologico.a
Atlas bacteriologico.a
 
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche
22412571 eq-7-microbiologia-de-la-leche
 
Medios De Cultivo Y Pruebas Bioquimica
Medios De Cultivo Y Pruebas BioquimicaMedios De Cultivo Y Pruebas Bioquimica
Medios De Cultivo Y Pruebas Bioquimica
 
Pseudomona aeruginosa
Pseudomona aeruginosaPseudomona aeruginosa
Pseudomona aeruginosa
 

Destacado

Pruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicasPruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicasdita
 
Identifcacion De Salmonellas
Identifcacion De SalmonellasIdentifcacion De Salmonellas
Identifcacion De Salmonellascarito
 
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacteriasPrincipales pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacteriaspajitacoxito
 
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianas
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA BacterianasDiapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianas
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianasdarwin velez
 
Medios de cultivos (cindy tania)
Medios de cultivos (cindy tania)Medios de cultivos (cindy tania)
Medios de cultivos (cindy tania)aguero-luna
 
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas HylaryQuistian
 
P point medios de cultivo 2013
P point medios de cultivo 2013P point medios de cultivo 2013
P point medios de cultivo 2013Mario Chaves
 
Enterobacterias curso virtual segunda versión 2012
Enterobacterias  curso  virtual  segunda versión 2012Enterobacterias  curso  virtual  segunda versión 2012
Enterobacterias curso virtual segunda versión 2012Altagracia Diaz
 
utilizacion de carbohidratos y acidos organicos
utilizacion de  carbohidratos y acidos organicos utilizacion de  carbohidratos y acidos organicos
utilizacion de carbohidratos y acidos organicos IPN
 

Destacado (16)

Pruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicasPruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicas
 
Identifcacion De Salmonellas
Identifcacion De SalmonellasIdentifcacion De Salmonellas
Identifcacion De Salmonellas
 
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacteriasPrincipales pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias
Principales pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias
 
Diapositivas salmonella..
Diapositivas salmonella..Diapositivas salmonella..
Diapositivas salmonella..
 
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianas
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA BacterianasDiapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianas
Diapositivas Tema 02. Estructura Y MorfologíA Bacterianas
 
Medios de cultivos (cindy tania)
Medios de cultivos (cindy tania)Medios de cultivos (cindy tania)
Medios de cultivos (cindy tania)
 
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas
Practica No. 3 Pruebas Bioquímicas
 
P point medios de cultivo 2013
P point medios de cultivo 2013P point medios de cultivo 2013
P point medios de cultivo 2013
 
Manual de bacteriologia
Manual de bacteriologia Manual de bacteriologia
Manual de bacteriologia
 
Shigella sp
Shigella spShigella sp
Shigella sp
 
Presentacion 8
Presentacion 8Presentacion 8
Presentacion 8
 
Enterobacterias curso virtual segunda versión 2012
Enterobacterias  curso  virtual  segunda versión 2012Enterobacterias  curso  virtual  segunda versión 2012
Enterobacterias curso virtual segunda versión 2012
 
utilizacion de carbohidratos y acidos organicos
utilizacion de  carbohidratos y acidos organicos utilizacion de  carbohidratos y acidos organicos
utilizacion de carbohidratos y acidos organicos
 
Shigella dysenteriae
Shigella dysenteriaeShigella dysenteriae
Shigella dysenteriae
 
Shigella
ShigellaShigella
Shigella
 
Shigella
ShigellaShigella
Shigella
 

Similar a Laboratorio no. 5 pruebas bioquímicas

Laboratorio 3-pruebasbioqumicas
Laboratorio 3-pruebasbioqumicasLaboratorio 3-pruebasbioqumicas
Laboratorio 3-pruebasbioqumicasKimberly Campos
 
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptx
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptxClase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptx
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptxCarlos Guanín
 
Pruebas bioquimicas y coprocultivo
Pruebas bioquimicas y coprocultivoPruebas bioquimicas y coprocultivo
Pruebas bioquimicas y coprocultivoRamses CF
 
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1Ramses CF
 
Pruebas bioquimicas para enterobacterias
Pruebas bioquimicas para enterobacteriasPruebas bioquimicas para enterobacterias
Pruebas bioquimicas para enterobacteriasJhoselineRuiz
 
Características diferenciales de identificación
Características diferenciales de identificaciónCaracterísticas diferenciales de identificación
Características diferenciales de identificaciónEric Rodriguez
 
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOS
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOSMETABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOS
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOSIPN
 
Practica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxPractica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxMichellOrtiz17
 
Practica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxPractica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxMichellOrtiz17
 
Practica de laboratorio.pdf
Practica de laboratorio.pdfPractica de laboratorio.pdf
Practica de laboratorio.pdfMichellOrtiz17
 
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506glenda
 
recuento de bacterias anaerobicas
recuento de bacterias anaerobicas recuento de bacterias anaerobicas
recuento de bacterias anaerobicas IPN
 
Utilizacion de-carbohidratos
Utilizacion de-carbohidratosUtilizacion de-carbohidratos
Utilizacion de-carbohidratosIPN
 
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicos
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicosutilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicos
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicosIPN
 

Similar a Laboratorio no. 5 pruebas bioquímicas (20)

Laboratorio 3-pruebasbioqumicas
Laboratorio 3-pruebasbioqumicasLaboratorio 3-pruebasbioqumicas
Laboratorio 3-pruebasbioqumicas
 
Pruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicasPruebas bioquimicas
Pruebas bioquimicas
 
La microbiología de los alimentos - Parte 5.pptx
La microbiología de los alimentos - Parte 5.pptxLa microbiología de los alimentos - Parte 5.pptx
La microbiología de los alimentos - Parte 5.pptx
 
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptx
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptxClase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptx
Clase 11 - Infecciones bacterianas frecuentes en la práctica clínica - Copy.pptx
 
Guia Laboratorio 4
Guia Laboratorio 4Guia Laboratorio 4
Guia Laboratorio 4
 
Pruebas bioquimicas y coprocultivo
Pruebas bioquimicas y coprocultivoPruebas bioquimicas y coprocultivo
Pruebas bioquimicas y coprocultivo
 
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1
Pruebas bioquimicas y coprocultivo 1
 
Pruebas bioquimicas para enterobacterias
Pruebas bioquimicas para enterobacteriasPruebas bioquimicas para enterobacterias
Pruebas bioquimicas para enterobacterias
 
Características diferenciales de identificación
Características diferenciales de identificaciónCaracterísticas diferenciales de identificación
Características diferenciales de identificación
 
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOS
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOSMETABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOS
METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS EN MICROORGANISMOS
 
Practica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxPractica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docx
 
Practica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docxPractica de laboratorio.docx
Practica de laboratorio.docx
 
Practica de laboratorio.pdf
Practica de laboratorio.pdfPractica de laboratorio.pdf
Practica de laboratorio.pdf
 
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506
Pruebas.bioquimicas.de.identificacion.243338506
 
urocultivo.pdf
urocultivo.pdfurocultivo.pdf
urocultivo.pdf
 
recuento de bacterias anaerobicas
recuento de bacterias anaerobicas recuento de bacterias anaerobicas
recuento de bacterias anaerobicas
 
Guionpracticas0809 (1)
Guionpracticas0809 (1)Guionpracticas0809 (1)
Guionpracticas0809 (1)
 
metabolismo general
metabolismo generalmetabolismo general
metabolismo general
 
Utilizacion de-carbohidratos
Utilizacion de-carbohidratosUtilizacion de-carbohidratos
Utilizacion de-carbohidratos
 
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicos
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicosutilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicos
utilizacion de carbohidratos y ácidos orgánicos
 

Más de nataliaizurieta

Laboratorio no.4 antibiograma
Laboratorio no.4   antibiogramaLaboratorio no.4   antibiograma
Laboratorio no.4 antibiogramanataliaizurieta
 
Laboratorio no. 4 recuento bacteriano
Laboratorio no. 4   recuento bacterianoLaboratorio no. 4   recuento bacteriano
Laboratorio no. 4 recuento bacterianonataliaizurieta
 
Laboratorio no. 3 técnicas de inoculación
Laboratorio no. 3  técnicas de inoculaciónLaboratorio no. 3  técnicas de inoculación
Laboratorio no. 3 técnicas de inoculaciónnataliaizurieta
 
Laboratorio no. 3 medios de cultivo
Laboratorio no. 3   medios de cultivoLaboratorio no. 3   medios de cultivo
Laboratorio no. 3 medios de cultivonataliaizurieta
 
Laboratorio no. 1 toma y envío de muestras ppt
Laboratorio no. 1   toma y envío de muestras pptLaboratorio no. 1   toma y envío de muestras ppt
Laboratorio no. 1 toma y envío de muestras pptnataliaizurieta
 
Laboratorio no. 1 bioseguridad
Laboratorio no. 1  bioseguridadLaboratorio no. 1  bioseguridad
Laboratorio no. 1 bioseguridadnataliaizurieta
 
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]nataliaizurieta
 

Más de nataliaizurieta (7)

Laboratorio no.4 antibiograma
Laboratorio no.4   antibiogramaLaboratorio no.4   antibiograma
Laboratorio no.4 antibiograma
 
Laboratorio no. 4 recuento bacteriano
Laboratorio no. 4   recuento bacterianoLaboratorio no. 4   recuento bacteriano
Laboratorio no. 4 recuento bacteriano
 
Laboratorio no. 3 técnicas de inoculación
Laboratorio no. 3  técnicas de inoculaciónLaboratorio no. 3  técnicas de inoculación
Laboratorio no. 3 técnicas de inoculación
 
Laboratorio no. 3 medios de cultivo
Laboratorio no. 3   medios de cultivoLaboratorio no. 3   medios de cultivo
Laboratorio no. 3 medios de cultivo
 
Laboratorio no. 1 toma y envío de muestras ppt
Laboratorio no. 1   toma y envío de muestras pptLaboratorio no. 1   toma y envío de muestras ppt
Laboratorio no. 1 toma y envío de muestras ppt
 
Laboratorio no. 1 bioseguridad
Laboratorio no. 1  bioseguridadLaboratorio no. 1  bioseguridad
Laboratorio no. 1 bioseguridad
 
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]
Diseño curricular 97 2003 ppt [modo de compatibilidad]
 

Laboratorio no. 5 pruebas bioquímicas

  • 1. PRUEBAS BIOQUÍMICAS Dra. Natalia Izurieta Cergneux PRÁCTICA No. 5 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA Y MICOLOGÍA
  • 2. PRUEBAS BIOQUÍMICAS La identificación definitiva de una especie requiere de pruebas bioquímicas. Permiten conocer las actividades metabólicas y enzimáticas de los microorganismos.
  • 3. PRUEBAS BIOQUÍMICAS Identificar los productos finales de los procesos metabólicos Se debe conocer: 1.- Cambios que se producen 2.- Reacciones químicas que ocurren 3.- Enzimas que intervienen 4.- Productos intermedios 5.- Secuencias de las reacciones bioquímicas
  • 4. PRUEBAS BIOQUÍMICAS Los microorganismos se cultivan en medios S/D SS + SD PB Las pruebas bioquímicas disponibles para la identificación de microorganismos de la familia Enterobacteriaceae son: 1.- Pruebas IMVIC 2.- Prueba de TSI 3.- Prueba de Ureasa 4.- Movilidad
  • 5. PRUEBAS IMVIC Incluyen un grupo de cuatro pruebas usadas para diferenciar a los microorganismos entéricos (Familia Enterobacteriaceae) Las pruebas son: INDOL ROJO DE METILO VOGES – PROSKAUER CITRATO.
  • 6. PRUEBA DE INDOL FUNDAMENTO: TRIPTOFANASA H2O + TRIPTOFANO INDOL + AC. PIRUVICO + NH3 PROTOCOLO: Se inocula en caldo triptosa e incuba a 35 - 37°C durante 24 horas. Luego de este período, se añaden 5 gotas del reactivo de Kovacs. INTERPRETACIÓN: NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO
  • 7. PRUEBA DE CITRATO CITRATO PIRUVATO Na2CO3 CO2 + Na + H2O AgarCitratado de Simmons Ph ALCALINO AZUL DE BROMOTIMOL PRUEBA + COLOR AZUL
  • 8. PRUEBA DE CITRATO PROTOCOLO 1.- Se inocula el agar de superficie inclinada con una sola estría en la superficie. 2.- Se incuba a 35 - 37°C durante 24 horas y se realiza la lectura de la prueba.
  • 9. PRUEBA DE CITRATO INTERPRETACIÓN: Es positiva cuando se observa crecimiento a lo largo de la estría, y este se acompaña o no de un viraje del indicador de verde a azul. El cambio de color del medio a azul indica una reacción positiva. POSITIVO NEGATIVO
  • 10. PRUEBA DE ROJO DE METILO Y VOGES PROSKAUER
  • 11. PRUEBA DE ROJO DE METILO FUNDAMENTO: FERMENTACIÓN ÁCIDO MIXTA GLUCOSA ÁCIDOS LÁCTICO, ACÉTICO Y SUCCÍNICO pH ÁCIDO + CO2, H2 y ETANOL 5 GOTAS ROJO DE METILO COLOR ROJO POSITIVO NEGATIVO
  • 12. PRUEBA DE ROJO DE METILO PROTOCOLO: (caldo MRVP) 1.- Se Inocula el medio con un cultivo puro joven. 2.- Se incuba a 35 – 37°C durante 48 horas. 3.- Luego de terminado el tiempo de incubación se añaden 5 gotas del reactivo de Rojo de Metilo (no agitar). INTERPRETACIÓN: SIN INOCULAR NEGATIVO POSITIVO
  • 13. PRUEBA DE VOGES PROSKAUER FUNDAMENTO: FERMENTACIÓN BUTILENGLICÓLICA GLUCOSA ACETIL-METIL-CARBINOL (ACETOÍNA) REACTIVO DE BARRETT KOH 40% 2-3 BUTANODIOL, ETANOL, H2 y CO2 POSITIVO NEGATIVO
  • 14. PRUEBA TSI (TRIPLE SUGAR IRON) Medio S/D Permite evidenciar: Capacidad de producción de ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un único medio. Permite la identificación de la producción de SH2.
  • 15. PRUEBA TSI Esta prueba tiene como objetivo diferenciar entre:
  • 16. PRUEBA TSI FUNDAMENTO: El extracto de carne y peptona aportan los nutrientes para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los HC fermentables. El rojo de fenol es el indicador de pH. Por la fermentación de los azúcares, se producen ácidos que se detectan por el indicador de pH.
  • 17. PRUEBA TSI PROTOCOLO: 1.- Se inocula los tubos de TSI con punta. 2.- Se introduce la punta hasta 3 a 5 mm del fondo del tubo. 3.- Luego de retirar el asadel fondo, se estría el pico con un movimiento en zigzag, de un lado al otro. 4.- Se incuba a 35 - 37°C durante 24 horas. INOCULACION CON PUNTA ESTRIACION EN ZIGZAG
  • 18. PRUEBA TSI INTERPRETACIÓN: Se debe considerar los cambios de color en el pico y el fondo del tubo y la formación de burbujas. Cuando el medio es ácido (A) este se torna de color amarillo y cuando es alcalino (ALK) permanece de color rojo.
  • 19. PRUEBA TSI El medio contiene 0.1% de glucosa y 1% de lactosa y sacarosa respectivamente. Si el microorganismo sólo fermenta la glucosa, el ácido producido en el fondo acidifica el medio en esa zona y se torna de color amarillo. Cuando el microorganismo fermenta la lactosa y la sacarosa, el ácido producido es suficiente como para virar el color del medio a amarillo. El medio permanece rojo cuando no se produce fermentación de ninguno de los azúcares.
  • 20. PRUEBA TSI Si hay formación de gas durante el proceso de fermentación, en el fondo del medio se observan burbujas o la ruptura del agar. Si las bacteria son productoras de SH2 este se evidencia como un precipitado negro en el fondo del tubo.
  • 21.
  • 22. PRUEBA DE LA UREASA FUNDAMENTO: UREASA UREA 2 MOLÉCULAS DE NH4 pH ALCALINO RESULTADOS ROJO DE FENOL + - COLOR FUCSIA
  • 23. PRUEBA DE LA UREASA PROTOCOLO: 1.- Se siembra el microorganismo en estudio en caldo urea o agar úrea de Cristensen. 2.- Se incuba a 35 - 37° C durante 24 horas. INTERPRETACIÓN: NEGATIVO POSITIVO POSITIVO NEGATIVO Agar Úrea de Cristensen