La tinción de Papanicolaou implica fijar la muestra en alcohol, teñir el núcleo con hematoxilina, el citoplasma con Orange G y EA-50, y aclarar con xilol. El proceso consiste en 10 pasos que incluyen fijación, tinción con tres colorantes, hidratación y aclarado para visualizar las células teñidas.

1. TINCION DE
PAPANICOLAOU

2. TINCION DE PAPANICOLAOU
La tinción de papanicolaou modificada se
basa en la reacción química de los
colorantes con los elementos celulares, y
su captación varia de acuerdo al pH
vaginal.

3. de
TINCION DE PAPANICOLAOU
FIJACION
Se entiende por fijación a la acción de
la
e
detener
célula,
el funcionamiento metabólico de
conservando su estructura
impidiendo su putrefacción.
• Citospray en aerosol
• Alcohol del 96°

4. TINCION DE PAPANICOLAOU
COLORANTES
* Hematoxilina de Harris
Se usa para teñir el núcleo (básico).
La membrana nuclear y la cromatina se
tiñe de color azul oscuro o rojizo púrpura y
el nucléolo de color rojo, rosado o naranja.

5. ol de
TINCION DE PAPANICOLAOU
COLORANTES
* Orange G (OG-6)
Se usa para teñir el citoplasma (ácido).
Tiñe el citoplasma de color naranja.
Es una solución de alcohol.

6. de
TINCION DE PAPANICOLAOU
COLORANTES
* Eosina Azur 50 (EA-50)
Se usa para teñir los
Coloración cianófila.
Colorante ácido.
citoplasmas.

7. de
TINCION DE PAPANICOLAOU
PROCEDIMIENTO
1.
2.
3.
4.
5.
Fijar las láminas en alcohol del 96° mínimo 15 min.
Lavar en agua
Se sumerge la
Lavar en agua
corriente.
hematoxilina durante
corriente .
15 segundos.
Alcohol del 96° HIDRATAR
3 cajas, 10 baños en cada caja.

8. l de
TINCION DE PAPANICOLAOU
PROCEDIMIENTO
6. Se pasa por el colorante OG-6 (50 segundos).
7. Alcohol de 96° HIDRATAR
3 cajas, 10 baños en cada caja.
8. Se pasa por el colorante EA 50 (50 segundos).
9. Se sumergen en alcohol etílico absoluto HIDRATAR
4 cajas, 10 baños en cada caja.

9. TINCION DE PAPANICOLAOU
PROCEDIMIENTO
10. Se pasa por el Xilol ACLARAR
4 cajas, 10 baños en cada caja.
11. Agrega una gota de resina MONTAR
NOTA:
variable,
El tiempo que
a la
se lleva a los colorantes es
yde acuerdo marca, concentración, filtrado
calentado.

10. ol de
TINCION DE PAPANICOLAOU
RECOMENDACIONES
1. Los alcoholes y la hematoxilina de Harris debe
filtrarse diario.
Para verificar si la hematoxilina esta en
colocar una gota de solución en el papel
2. buen estado,
filtro.
3. Las cajas de tinción no deben de ser lavadas con
detergente, y tienen que secarse perfectamente.
Cuando la canastilla con laminillas deba llevarse de
una solución a otra debe escurrirse completamente.
4.

11. TINCION DE PAPANICOLAOU
RECOMENDACIONES
5. Las soluciones OG-6 y EA 50 se deben filtrar o
cambiar una vez por semana.
El Xilol se filtra cuando se ven fragmentos.
Todos los recipientes, sobre todo los que contienen
alcohol y xilol deben estar tapados.
6.
7.