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Universidad de Chile
Tecnología Médica

Alumna: Javiera Inostroza Z.
Fecha: 24 Agosto 2012
Introducción
• Estudio por microscopia directa: método
rápido y rentable
• Orienta sobre la selección del medio de
cultivo más adecuado u otros exámenes
complementarios.
• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.
• Sensibilidad menor a cultivos
¿Hialohifomicosis o Aspergilosis?

Aspergillus sp
Introducción
• Estudio por microscopia directa: método
rápido y rentable
• Orienta sobre la selección del medio de
cultivo más adecuado u otros exámenes
complementarios.
• Ayuda a interpretar la relevancia del cultivo.
• Sensibilidad menor a cultivos
Muestra: Biopsia
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•

Etapas:
Observación macroscópica.
Fijación.
Selección de zonas de estudio.
Deshidratación.
Inclusión.
Realización de cortes.
Hidratación.
Tinción.
Examen microscopico.
Tinciones
•
•
•
•
•

Hematoxilina-eosina
Gomori-Grocott
Ácido peryódico de Schiff(PAS)
Fontana-Masson
Mucicarmina

• *Giemsa
• * Gram
Giemsa
• Fundamento: afinidad que demuestran las
células y sus componentes a los distintos
colorantes incluidos en el colorante de Giemsa
Giemsa
• Muestras:
• Frotis sanguíneos
• Muestras
respiratorias
Gram
• Fundamento.
• Cristal violeta.
• Lugol
(complejo)
• Alcohol-acetona
• Colorante de
contraste
(safranina)
Gram
• La mayoría de los
hongos son
gramnegativos
• * Cryptococcus
neoformans
Hematoxilina-eosina
• Fundamento:
• Eosina: ácido,
basófilo (rosado)
• Hematoxilina:
catiónico unión a
aniones (azul)

•Zigomicosis. H-E (hifas anchas no
septadas, con membrana más basófila,
polisacaridos son negativos)
Hematoxilina-eosina
• Tiñe mayoría de los
hongos

Formación de granulomas en infección micótica
(H.E., Neg x20)

•Estudio de la
respuesta tisular
Zona necrótica en cuyo seno se observa un crecimiento
micótico formado por Aspergillus (H.E. Neg. X 100)
Hematoxilina-eosina
•
•
•
•
•

Se tiñen bien:
Aspergillus spp
Zigomicetos
Blastoconidios
Pseudohifas de
Candida.

Aspergilosis pulmonar
invasiva
crecimiento invasor
del hongo con
infiltración del
parénquima pulmonar
y de los vasos
sanguíneos

Cryptococcus en hilio pulmonar
Hematoxilina-eosina
• Caracterización de
hongos pigmentados
Tinción de GomoriGrocott (Metenamina de plata)
• Fundamento:
•  Ácido crómico: oxidación 
grupos OH de polisacáridos 
de pared celular.
• Aldehidos reducen 
complejo nitrato-platametanamina color cafénegro.
• Verde brillante

Zigomicosis, GMS
Tinción de GomoriGrocott (Metenamina de plata) 
•
•
•
•
•

Utilidad:
Aspergilosis
Zigomicosis
Candidiasis
Criptococosis

Mucorales (Rhizopus)

Biopsia pulmonar, 
disposición característica 
de las hifas de Aspergillus 
en el parénquima 
pulmonar.
Tinción de GomoriGrocott (Metenamina de plata) 
Tinción de GomoriGrocott (Metenamina de plata) 

Cryptococcus

Abundantes conidios 
(esporas) de forma oval 
o periforme de base 
plana (Grocott).
Ácido peryódico de Schiff (PAS)
Fundamento:
• Ácido peryódico rompe la 
unión entre carbonos con 
hidroxilos adyacentes,
•  Formación de grupos 
aldehído. 
• Reactivo de Schiff 
reacciona con los 
aldehídos para dar un 
color rojo púrpura intenso.

Zigomiceto
Ácido peryódico de Schiff(PAS)

esporas
Vaso colonizado por hifas y 
esporas de morfología típica de 
Scedosporium spp (PAS).

Cryptococcus en miocardio (SIDA)
Ácido peryódico de Schiff(PAS)

 Histoplasmosis, intracelular
Fontana-Masson
• Fundamento:melanina
reduce el nitrato de plata
que se precipita sobre los
gránulos del pigmento
dando una coloración
negra.
• Hongos dematiáceos
Bipolaris spicifera in lung tissue (FontanaMasson stain; magnification ×100).
Fontana-Masson

Cladosporium
Mucicarmina
• Fundamento: tiñe
glucoproteínas.
• Cryptococcus sp.
Las mucinas o
mucoproteínas son
proteínas con H.C. en una
proporción superior al 4 %.
La técnica del mucicarmín de
Mayer sirve para identificar
globalmente las mucinas,
pero no reconoce su
naturaleza bioquímica.
Mucicarmina

Criptocococis miocárdica
Mucicarmina

Riñón. Nefritis criptococócica.Mucicarmín.
Microscopía médica hongos

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Microscopía médica hongos

Notas del editor

  1. Diagnóstico de certeza
  2. Azul de metileno: tiñe el núcleo azul Eosina: tiñe citoplasma rojo. Ayuda a diferenciar células sanguineas de agentes patógenos.
  3. Alcohol acetona es para la decoloración Tiñe levaduras e hifas.
  4. Zigomicetos: angulos de 90º
  5. Capsula no se tiñe con hematoxilina eosina
  6. Tiñe también los elementos mas viejos o no viables
  7. Tiñe carbohidratos, los mucopolisacaridos de la pared celular se oxidan ( se oxidan los 1,2-glicoles) formando los grupos aldehido en los glucanos y mananos
  8. Pas no tiñe la capsula de cryptococcus dejando un halo caracteristico, se observan también levaduras en gemacion
  9. Histioplasmosis diseminada
  10. Masson-Fontana, ha demostrado ser más útil que otras para la identificación de las características de los hongos Dematiáceos (hongos pigmentados), causantes con frecuencia de la Sinusitis fungal alérgica, ya que tiñen su pared y la contrastan mejor l igual que los otros más de cien dematiáceos patógenos para el hombre, presenta melanina en sus paredes celulares, lo que le confiere un color característico entre el marrón y negro a sus conidias e hifas, evidenciándose por la tinción positiva con técnica de Fontana-Masson. es un colorante específico de la melanina.
  11. Tincion para mucopolisacaridos La técnica de Mucicarmin de Mayer se utiliza generalmente para mucoproteínas y Criptococcus y se usa fundamentalmente en centros especializados y en infecciones oportunistas.2,3