los colorantes biológicos son muy importantes para la identificación de moléculas , etc ...

1. 1. COLORANTES BIOLÓGICOS
2. INTRODUCCION:
Los colorantes biológicos son sustancias químicas, las cuales se podrán combinar con
diferentes tipos de estructuras células, dándose esto por la diferentes cargar y afinidad que
pueda tener el colorante por las estructuras celulares.
Todo colorante presenta dos estructuras muy importantes llamadas: cromoforo, el cual le
dará el color a la muestra y el cromógeno el cual se uniera a estructura a colorear.
La utilización del colorante, es de mucha ayuda en lo que es la biología y otras ramas, ya que
nos ayudara a poder identificar estructuras celulares, poder diferenciar células, a poder
observar inclusiones citoplasmáticas, entre otros.
En el desarrollo del informe podremos conocer su utilización de cada uno de los colorantes,
las
En el siguiente informe que desarrollaremos utilizaremos tres tipos de tinción siendo la
simple, la compuesta y la neutra, en donde podremos realizar una comparación entre cada
una de ella y poder saber su utilización e importancia de cada tipo de coloración.
En la siguiente sección pasaremos a visualizarlo detalles estructurales de la célula en el
microscopio, gracias a la ayuda de los colorantes utilizados
Por último, al finalizar la práctica tendremos claro el uso, los diferentes métodos de
coloración e importancia de realizar una tipo de coloración.
3. Materiales y método
a) Materiales
 Microscopio
 Goteros
 Laminas
 Laminillas
 Lanceta
 Wright
 Eosina
 Alcohol éter
 Azul de metileno
 Aceite de inmersión

2.  Safranina
 Agua destilada
 Puente de coloración
b) Muestras:
 Raspado de mucosa labial
 Sangre capilar
 Tallo de geranio
c) Método:
 Coloración simple (utilización de un solo colorante)
 Coloración diferencial (utilización de dos a mas colorantes)
 Coloración neutra (uso de una sola sustancia que podrán teñir diferentes
estructuras)
3.1 Procedimiento:
Para el desarrollo de este informe se llevaron a cabo los siguientes procedimientos para
poder realizar la observación e identificación de las diferentes tipos de células en las
muestras utilizadas:
 Coloración simple: mucosa bucal
1. Con la ayuda de un palito de diente o una lámina ligeramente pasar a realizar un
raspado en la parte interna del labio.
2. Con la ayuda de una lámina extender el raspado, formando una capa delgada.
3. Dejar secar.
4. Fijar la lámina con 2 o 3 gotas de alcohol – éter (2minutos).
5. Agregar dos colorantes de colorante acido o básico (2 a 3 minutos).
6. Lavar la lámina con agua de grifo.
7. Dejar secar la lámina.
8. Observar con el microscopio a 10x, 40x y 100 x

3. Fig. 1 toma de muestra de mucosa bucal
Fig. 2 procedimiento de coloreado, lavado y secado de muestra
 Coloración neutra: sangre capilar
1. desinfectar con alcohol la yema del dedo mayor.
2. Con la ayuda de una lanceta pasar a realizar un pinchazo.
3. Colocar una gota de sangre en un extremo de la lámina.
4. Con la ayuda de otra lamina y formando un ángulo de 45 ° pasar a realizar una
extensión de la muestra.
5. Dejar secar la muestra extendida.
6. Cubrir la lámina con dos o tres gota de colorante Wright o Leishmans por 3 minutos.
7. Agregar a la muestra agua destilada por 4 minutos.
8. Lavar la lámina con agua de grifo.
9. Dejar secar.
10. Observar al microscopio con 40x y 100 x

4. Fig. 3 procedimientos para realizar el extendido de sangre periférica
 Coloración simple: tejido vegetal
1. Con la ayuda de una navaja realizar un corte trasversal al taño del Geranio.
2. Agregarlo sobre una lámina.
3. Agregar safranina por 5 minutos.
4. Cubrirlo con un porta objeto.
5. Observar a 10x, 40 x

5. Fig. 4 corte transversal de tallo Fig. 5 tinciones con safranina de la Mx de tallo
4. Resultados:
4.1 Observación e identificación de las células sanguíneas:
En el siguiente resultado pudimos observar los diferentes tipos de células blancas
(leucocitos), gracias a la ayuda de un colorante neutro (Wright) el cual teñirá
estructuras acidofilicas (citoplasma) y basílicas (núcleo) ayudándonos así a poder
identificar y distinguir las células gracias a sus estructuras coloreadas que se podrán
observar como : núcleo, citoplasma , y gránulos.

6. Fig. 6 Coloración Wright extendida de sangre periférica, observación de Hematíes y los
diferentes tipos de glóbulos blancos: linfocito, monocito, neutrófilo, eosinofilo y basófilo.
Aumento 400x
Fig. 7 Se observa neutrófilos. Núcleos lobulados. Aumento 400x
Fig. 8 Se observa parte inferior un neutrófilo y
un eosinofilo. Parte superior, linfocito. 400x
Fig. 9 Observación de un Monocito, célula agranulada. 400x

7. 4.2 Observación e identificación de las células del epitelio bucal:
Mediante la coloración utilizada (simple-azul de metileno) pudimos identificar las
células de epitelio bucal, donde observamos el núcleo, algunos agregados
citoplasmáticos y el tipo fusiforme que presenta la célula.
Fig. 10 Célula de muestra de raspado bucal, coloración azul de metileno, se observa núcleo
y la forma irregular de la célula. Aumento 400x
4.3 Observación de epitelio vegetal:

8. Fig. 11 Muestra de tallo de geranio (corte transversal-safranina. Parte externa estructuras
filamentosa, corteza, floema y xilema. Aumento 400x
5. Discusión:
 En el desarrollo del informe se pasó a realizar las coloraciones tanto simples como
compuestas, las cuales tenían un intervalo de tiempo determinado por las diferentes
bibliografías, al emplear estos intervalos, la coloración no resulta como se espera, ya
que el tiempo necesario en el que debe de actuar el colorante va a depender mucho
su concentración que presente en colorante.
 Al observar los diferentes tipos de células sanguíneas como glóbulos blancos se
obtuvo resultados similares a comparación de otro tipo de muestras.
 En el desarrollo del informe nos ayudó mucho saber las diferentes cargas netas de
las estructuras celulares, ya que esto nos ayuda a poder confirmar que un colorante
acido se une a estructuras de carga neta positiva y un colorante básico se une a
estructuras de carga neta negativa, dando así los colores característicos, y al
compararlos con imágenes de bibliografía utilizada observamos resultados similares
a los obtenidos.
6. Conclusiones:
 Los colorantes a utilizar se deben de encontrar en óptimas condiciones, ya que nos
pueden dar coloraciones defectuosas.
 Los colorantes simples nos ayudan a poder identificar la morfología de cada célula,
mientras que los colorantes compuestos o neutros nos ayudara a poder
diferenciarlas.
 Los colorantes tendrán afinidad a cada estructura celular, dependiendo de su carga
que presente.
 Para una buena observación células se debe realizar tanto una buena toma de
muestra como un buen extendido, evitando así algún tipo de hemolisis (sangre) o
células sobrepuestas
 Es muy importante la utilización de mordientes, ya que nos ayudara a poder fijar
mejor los colorantes, y así obtener una mejor coloración.