TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

1. LOJA-ECUADOR
2018-2019
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA
FACULTAD AGROPECUARIA DE RECURSOS NATURALES
RENOVABLES
TÍTULO:
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES.
AUTOR: Jorge Luis Córdova Román

2. La transferencia
de embriones
empezó a
realizarse en
1980 y en 1950
se aplicó en el
ganado vacuno.
GENERALIDADES

3. Ventajas de la
hembra
donante
Aumenta la capacidad
reproductiva de hembras de
gran valor genético (mayor
número de descendientes por
hembra)
Disminuye el intervalo
generacional
Rescate genético de
animales accidentados
o enfermos de los que
pudieran obtenerse
embriones antes de
que el animal muera.
Intercambio material
genético (transporte,
patógenos,
adaptación al medio)
Se pueden obtener crías
de vaquillas que aún no
alcanzan la edad y peso
para cargarse, ya que
será la receptora quien
se encargue de
mantener la preñez.

4. Costo operacional
Contratación de
personal
especializado.
Inversión en equipos,
materiales, productos
veterinarios.
DESVENTAJAS DE LA HEMBRA DONANTE
Promedio de
aceptación de
embriones por
parte de la hembra
receptora 40-50%.

5. Las vacas
deben
estar
libres de
enfermed
ades
• Especial
aquellas que
afectan la
reproducción
deben tener
pruebas
diagnósticas de
• Brucelosis
• Tuberculosis al
día
estar al día con
las vacunas
• Obligatorias y
• Necesarias
CONDICIONES SANITARIAS DE LA HEMBRA DONANTE

6. PROTOCOLO DE SUPEROVULACIÓN
Consiste en la
estimulación hormonal
de la donante para la
formación y desarrollo
de varios folículos y su
ovulación en ambos
ovarios en un momento
previamente fijado.
La inducción de la
superovulación se
sucede en el diestro
entre el día 8 y 14 del
ciclo mediante la
inyección de hormonas
gonadotropinas como
la FSH y PMSG
Induciendo mediante la
aplicación de una serie
continuada de dosis
decrecientes de FSH.

7. PROTOCOLO DE SUPEROVULACIÓN

8. Se realiza
preferentemente, al
séptimo día
mediante un lavado
uterino transcervical,
este día es el más
adecuado
mediante el
lavado son
fácilmente
arrastrados al
exterior flotando
en el medio.
ese momento los embriones
se encuentran en el estadio
de blastocistos o de mórulas,
fases muy estables, lo que
hace posible que sean
transferidos directamente o
que sufran otras
manipulaciones.
COLECCIÓN Y
EVOLUCION
EMBRIONARIA

9. COLECCIÓNY
EVOLUCION
EMBRIONARIA
dependerá de varios
factores, entre los que se
encuentran la
infraestructura disponible
de acuerdo al tipo de
establecimiento ganadero
la docilidad del
animal como así
también la destreza y
experiencia del
operador.
vaciar el contenido rectal,
precisar la posición y
dimensiones del útero y la
respuesta ovárica al
tratamiento
superovulatorio
Preparación
del animal

10. COLECCIÓN Y EVOLUCIÓN EMBRIONARIA
“MATERIALES”
Dilatador
cervical 1
Catéter
recolección
de
embriones 2
Mandril
2
Jeringa 60
ml 2 20 ml
2
Clamps
2 Botella
para el
medio de
recolección
3 Tubo de
recolección
del medio
2 Filtro
2 Recipiente
de vidrio
500 ml
3
Lubricant
e
1 PBS
2 Suero
fetal
bovino
Toalla
s de
papel
Agujas 18
descartabl
es x 11/2 6
Baño de agua con
temperatura
controlada portátil

11. Colocacióndelcatéterylavajedel
útero
Antes de colocar el instrumento, éste debe ser enjuagado con la misma solución
destinada el lavaje (PBS). Ello contribuirá a lubricar. El catéter es introducido en
el vestíbulo de la vulva, separando sus labios. Los catéteres de goma o silicona, a
diferencia de los de acero, requieren para ello un mandril.
Al llegar al último anillo se deberá presentar el cuerno uterino, ligeramente
elevado, frente a la punta del catéter. En este momento es imprescindible tener
especial precaución de controlar la fuerza que se ejerce sobre el catéter, a fin de no
atravesar bruscamente la cérvix y perforar la pared uterina.
Una vez alcanzada la posición próxima a la deseada (por ejemplo borde del
ligamento intercornual) se libera el catéter del mandril, se desplaza este último
unos centímetros hacia caudal y se deslizan ambos suavemente hacia craneal, unos
5 cm. Repetir la operación un par de veces hasta comprobar una óptima colocación
del catéter en el cuerno uterino.

12. EXISTE DOS TIPOS DE CIRCUITOS PARA LA RECOLECCIÓN DE
EMBRIONES
RECOLECCION DE
EMBRIONES
Circuito cerrado
con flujo continuo
Con este método se emplean
catéteres de 3 vías, rígidos o flexibles.
Una vía, destinada a la inyección del
medio de lavaje, se conecta al frasco
que contiene la solución por medio
de una tabuladora de goma látex o
silicona.
La solución puede inyectarse por
gravedad, colocando el frasco con el
medio a aproximadamente 1 m por
encima del frasco recolector o con
una jeringa, con el mismo
procedimiento que el método de flujo
discontinuo.
Circuito cerrado
flujo discontinuo
Con este método se usa el catéter de 2 vías, una jeringa de
50-60 ml, una válvula automática o manual, una unión de
vidrio o plástico en forma de T o Y y las tubuladuras . La
válvula, que se coloca a la salida del frasco , permite extraer
el medio e inyectar en el interior del cuerno uterino

13. Luego del lavaje, la aislación de los embriones de
los grandes volúmenes de medio se puede hacer
por medio de sedimentación o filtración del
medio recuperado
Para la sedimentación de los embriones se
emplean recipientes con forma de embudo y un
cierre hermético en su fondo, probetas o frascos
de 0,5-1,0 l.
Los recipientes deben estar a una temperatura
constante de 37 C ó 20 C y protegidos de la luz
solar directa. La sedimentación de los embriones
requiere 20-30 minutos.
Lavado
del filtro

14. CLASIFICACION DE EMBRIONESExcelente, el desarrollo corresponde
al día de la recolección. No existen
defectos visibles. Los blastómeros
son claramente visibles, de color y
estructura uniformes, simétricos, de
forma esferoide y la zona pelúcida
está intacta
Bueno, el embrión tiene muy pocos
blastómeros desprendidos de la masa
celular y/o posee una pequeña
cantidad de detritus celulares. Su forma
puede ser ligeramente irregular
GRADO I
GRADO II

15. Regular, el embrión posee
varios defectos: detritus
celulares, forma irregular, de
color muy oscuro o muy
claro y/o ligero
agrietamiento de la zona
pelúcida
Malo, el embrión posee muchos
defectos: los correspondientes al G III
más desarrollo retardado, seria ruptura
de la zona pelúcida del embrión puede
encontrarse parcialmente fuera de ella,
forma muy asimétrica, tendencia a la
desintegración como granulación o
vacuolización de los blastómeros. Incluye
también a los estadios hasta 8 células y la
clara degeneración. Esta categoría es
considerada como no transferible.
GRADO
111
GRADO
IV

16. Huevo sin fertilizar
después de la
ovulación.
Embrión de cuatro
células.
EVALUACIÓNDE
EMBRIONES

17. Aislamientode embriones
Al finalizar la colecta de los embriones el técnico del laboratorio debe tener el
equipo listo y preparado para buscar y manipular los embriones.
Preparación del equipo de manipulación de embriones.
•Termostato (36.5°C)
•Estereoscopio
•Jeringas
•Agujas
•Medio de lavado del filtro y mantenimiento
•Platos de manipulación de embriones (búsqueda, holding)
•Tripsina.

18. LAVADO DEL FILTRO DE EMBRIONES.
• Empezar el lavado en la parte donde está la malla del filtro a una inclinación de 45° y
colocar el medio con los embriones en los platos de búsqueda.
• Usar una jeringa de 20 mL para lavar el filtro utilizando el medio de lavado SFB al 1%
con aguja hipodérmica desechable calibre 20G * ½”.
• Hacer de 2 a 3 lavados en el filtro de embriones.

19. BÚSQUEDA DE EMBRIONES.
• Usar platos de búsqueda a temperatura de 37°C (mantener los platos de búsqueda
sobre un termostato). Para identificar el plato de búsqueda se escribe el número de la
vaca sobre uno de los costados del plato.
• Solamente al momento de hacer la búsqueda los platos no están sobre el termostato.
• Para facilitar la búsqueda, los platos están marcados con líneas horizontales y
verticales en la base, estas líneas forman cuadrículas. Horizontalmente van de la A-E,
verticalmente del 1-5.
• Al finalizar la búsqueda, los embriones se pasan a los platos de mantenimiento.

20. MANTENIMIENTO DE EMBRIONES
(HOLDING) A 37°C.
• Usar platos de mantenimiento, el cual contiene 5 pasos en forma circular y uno al
centro.
• Usar una solución que contiene 10% de SFB, diferente al medio de colecta el cual tiene
1% de SFB.
• Método de limpieza o mantenimiento de los embriones: 5 holding o limpieza, 2 de
tripsina para eliminar cualquier agente contaminante o infeccioso (30-60 seg. cada
paso, con mas tiempo en la tripsina el embrión se empieza a degradar), 5 holding para
quitar la tripsina y dejar alrededor del embrión estéril.
• Pasar los embriones buenos (grados 1 y 2) en solución de etilenglicol o glicerol por 5-7
min.

21. LLENADO DE LAS PAJILLAS.
• Usar jeringas de 1 mL desechables para llenar pajillas.
• Primero llenar la pajilla con etilenglicol, luego dejar un espacio de aire, seguido de
etilenglicol o glicerol con el embrión (el embrión queda en la parte media de la pajilla),
llenar de nuevo un espacio de aire y por último llenar con etilenglicol o glicerol.
• El espacio de aire sirve de ayuda al momento cuando se transfiere el embrión a que no
quede adherido en la pajilla o en la punta de la pajilla y salga todo el contenido.

22. • Preparacióndelequipodecongelamiento.
• El equipo utilizado (BioCool) debe estar como punto de inicio a -0.6°C y un punto final de -34.0°C a un
descenso de -0.53°C por minuto.
• La solución utilizada para el congelamiento es alcohol etílico al 70%.
•
Cristalización.
• Colocar las pajillas en el equipo a -0.60°C.
• Colocar una barra de cobre en nitrógeno líquido a -196°C.
• Pasar la barra de cobre sobre las pajillas haciendo un roce para que la solución dentro de la pajilla
cristalice.
• Dejar las pajillas por 10 minutos a -0.60°C en el equipo.
• Comenzar con el descenso de temperatura a -0.53°C por minuto.

23. • Etiquetarlaspajillasconsurespectivainformación.
• Esto se hace durante la cristalización de las pajillas.
• La máquina que se utiliza es un aparato de etiquetado electrónico P-Touch.
• Introducir los datos del número de registro del laboratorio, tipo de medio que se utiliza para congelar
el embrión, la raza del embrión, nombre y raza de la madre, nombre y raza del padre, calidad del
embrión, fecha de colecta y congelamiento.
• Al terminar de introducir los datos, las etiquetas se colocan en las pajillas.
•
Pasarlas pajillasal tanquedecongelamientoconnitrógenolíquidoa -196°C
•
Descongelado de los embriones
• La descongelación se debe hacer lo más rápido posible en agua a 37°C.

24. HEMBRA RECEPTORA
• Ventajas y desventajas
• La transferencia de embriones con respecto desde el punto de vista de la hembra
tiene grandes ventajas que permiten buenos resultados, una de estas ventajas es que la
hembra receptora no necesariamente debe ser de elevado valor genético y permite al
veterinario elegir una hembra que sea manejable y dócil para desarrollar el proceso, sin
embargo esta hembra debe ser de preferencia menor de 10 años y debe poseer una
condición corporal, debe ser una hembra libre de enfermedades y sobre todo una gran
desventaja es que el manejo de la hembra luego de la transferencia debe ser observado
continuamente por una persona calificada para así poder detectar inconvenientes como
abortos prematuros. Además de que para la sincronización de receptoras hay que elegir
mejor método posible y sobre todo un método con el que ya se ha trabajado, para
observar resultados positivos.

25. CONDICIONES SANITARIAS DE LA
HEMBRA RECEPTORA
• La hembra receptora cumple un papel fundamental en la transferencia de embriones
para conseguir una transferencia de embriones exitosa y llegue a término, se
recomienda que esta hembra cumpla con el mínimo de requisitos sanitarios de la
donante. Como lo son: estar libre de enfermedades, tener una equilibrada
alimentación, cumpliendo con todas las necesidades para la gestación. Además, se
debe realizar un buen manejo hay que evitar el transporte de los animales, vigilar los
partos prematuros (7 meses), realizar el diagnóstico de la gestación antes de entregar
a la receptora (La tasa de abortos en las receptoras preñadas puede ser ligeramente
superior a la de vacas servidas normalmente. Por ello nunca se deberá entregar una
receptora sin verificar previamente su estado de gestación).

26. 1.
Protocolo 1 PGF2α: Se usan dos dosis de prostaglandinas separadas por 8 días.
Día 0: Dispositivo, PGF2α + 2mg BE
Día 8: Retiro dispositivo, PGF2α
Día 9: 1mg BE
2.Protocolo 2 PGF2α: Utiliza una sola dosis de prostaglandina.
Día 0: Dispositivo, 2mg BE
Día 8: Retiro dispositivo, PGF2α
Día 9: 1mg BE

27. Protocolo 3 PGF2α (Con embriones congelados): Se usan
2 dosis de prostaglandina intramuscular, separadas por 12
días.
Se utiliza un dispositivo de liberación lenta de
progesterona, éstos pueden ser dispositivos
vaginales (PRID, CIDR) o implantes
subcutáneos (Crestar, SMB).

30. IMPLANTES SUBCUTÁNEOS DE P4

31. EFECTO DE LA ADMINISTRACIÓN DE
FOLLIGON EN DIFERENTES DÍAS

32. MÉTODO RESET
Tiene como objetivo elevar la respuesta en receptoras hasta el 80%.
Protocolo 1 RESET: Es utilizado para novillas Holstein de 15 - 18 meses.
Día 0: Dispositivo PRIDsch, 100mg P4 + 5mg E2
Día 4: 1000 UI eCG
Día 6: Retirar PRID: PM, PGF2α
Día 8: Celo, GnRH: PM
Días 14 y 15: TE

33. GRACIAS POR SU ATENCIÓN.