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• Bermeo Velasquez Brenda María
• Bolaños Vélez Cristóbal Ismael
• Briones Herrera Edwin Eduardo
• Carrión Cuenca Valeria Alexandra
• Castillo Castillo Jefferson Alexander
• Docente
• Ing. Verónica Taipe
• Catedra
• Fitogenotecnia
Micropropagación
 Índice
 Introducción. ....................................................................................................................................... 3
 OBJETIVO GENERAL. ..................................................................................................................... 4
 OBJETIVOS ESPECÍFICOS.............................................................................................................. 4
 MARCO TEÓRICO............................................................................................................................ 5
 FUNDAMENTOS BIOLÓGICOS DE LA MICROPROPAGACIÓN. ......................................... 5
 Micropropagación, Generalidades Y Procesos. .............................................................................. 5
 Desarrollo de la planificación. ............................................................................................................ 7
 Fase 0: Preparación de la planta madre........................................................................................... 7
 Fase 1: Desinfección del material vegetal....................................................................................... 7
 Fase 2: Introducción del material in vitro. ...................................................................................... 7
 Fase 3: Multiplicación de los brotes................................................................................................ 7
 Fase 4: Elección de un medio de enraizamiento de los explantos................................................... 7
 Fase 5: Aclimatación de los explantos enraizados. ......................................................................... 8
 Conclusiones. ...................................................................................................................................... 8
 Recomendaciones................................................................................................................................ 8
 Bibliografía ......................................................................................................................................... 9
CULTIVO IN VITRO
 Micropropagación es el conjunto de metodologías y procesos de
cultivo de tejidos utilizados para repetir plantas asexualmente de
forma alígera, eficiente que puede utilizarse para generar
material de plantación libre de enfermedades, con el fin de
obtener una población de plantas ‘elite’ seleccionadas por sus
características de desempeño agronómico, libres de virus y en el
menor tiempo posible(Olmos, 2017).
Introducción
Objetivo General
• Fortalecer el conocimiento y desarrollar habilidades
técnicas en los tejidos vegetales con el fin de implementarlo
en las especies vegetales.
Objetivos Específicos.
• Comprender los conceptos teóricos básicos de los tejidos vegetales. o
Establecer y aplicar protocolos en especies vegetales.
• Preparar adecuadamente medios de cultivo a partir de una especie vegetal y
un objetivo o propósito de cultivo definidos.
• Conocer la función que desempeñan los distintos componentes del medio de
cultivo en el desarrollo de los tejidos
La reproducción asexual es utilizada para obtener una
gran cantidad de plantines a partir de una única planta
Dependiendo del caso, se aprovechan bulbos , cormos,
rizomas , tubérculos, tallos, raíces, hojas, estaca etc. Las
plantas obtenidas por propagación asexual o vegetativa
son idénticas a la planta madre e idénticas entre sí. En
otras palabras, son clones (Gárate, 2010. ).
Fundamentos Biológicos De La
Micropropagación.
Totipotencia
Es la capacidad de una célula de generar
réplicas del organismo del cual deriva.
Restringida en animales, esta propiedad
característica de las plantas permite la
supervivencia en condiciones ambientales
desfavorables o luego del ataque de
herbívoros, plagas y patógenos (Reyes, 1994).
El cultivo in vitro o la micropropagación se inicia
con la extracción de pequeños fragmentos de
tejido tomados de diversas partes de la planta una
vez limpios y desinfectados, los explantes son
transferidos en condiciones asépticas a un medio
de cultivo adecuado y, más tarde, su diferenciación
de modo de generar una planta completa
(Saucedo, 2009).
El cultivo in vitro puede desarrollarse inicialmente en un
espacio reducido e independientemente de factores climáticos y
estaciones del año. Se calcula que 10 m2 de estantes son
suficientes para el cultivo de 20.000 plantines.
El numero de producción en cultivo in vitro es mucho mayor
que el cultivo tradicional una gema de eucalipto puede originar
en un año 75 trillones de mudas en vez de las 100 o 200 que se
obtienen habitualmente por estaquillado (Agramonte, 2001. )
Micropropagación, Generalidades Y
Procesos.
Un ejemplo es la producción de tubérculos de papa libres de virus
para la inclusión en programas de certificación, permite la
producción de semillas sintéticas, que consisten en un embrioide
formado a partir de una masa de tejidos obtenida in vitro,
envuelta en una sustancia gelatinosa con nutrientes y cubierta por
un plástico biodegradable.
Son de gran interés para las industrias del papel,
celulosa y maderera ya que el cultivo in vitro
permite la producción y distribución de mudas
libres de patógenos a partir de tejidos
meristemáticos, que no están infectados por virus
facilitan el mejoramiento genético de las
variedades comerciales y, también, porque
representan una etapa indispensable en la
obtención de una planta transgénica
(GIMÉNEZ & COLMENARES, 2004).
es una de las aplicaciones más generalizadas del cultivo
in vitro, a partir de un fragmento (explante) de una planta
madre los frascos que contienen las plantas se ubican en
estanterías con luz artificial dentro de la cámara de
crecimiento, donde se fija la temperatura en valores que
oscilan entre los 21 y 23°C, además de controlar la
cantidad de horas de luz. Por su parte, el medio de cultivo
se compone de una mezcla de sales minerales, vitaminas
reguladoras de crecimiento, azúcar, agua y agar
(OLMOS, LUCIANI, & GALDEANO, 2010).
La micropropagación o propagación clonal
clasificar los principales
factores no biológicos que afectaran al
desarrollo del cultivo in vitro
Ambiente químico
Composición del medio de cultivo
pH.
Ambiente físico
Temperatura
Luz y fotoperíodo
Humedad
Proceso de micropropagación
diferenciamos varias fases o etapas
Selección y Preparación de la
planta madre
Desinfección de las yemas de la
planta y/o desinfección de semillas
Introducción del material seleccionado in
vitro
Multiplicación de brotes
Enraizamiento Aclimatación
Esta secuencia de etapas abarca el ciclo completo de la
multiplicación de plantas in vitro; puede ser aplicada a
diferentes especies vegetales, en cada caso se podrán incluir
simplificaciones o cambios de acuerdo a las características de
las plantas, pero en términos generales son comunes al proceso
de propagación in vitro (Quiala E., 2004).
Es una de las aplicaciones más generalizadas
del cultivo in vitro, a través de la
micropropagación, a partir de un fragmento
(explante) de una planta madre
Desarrollo de la planificación
La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar
plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente
artificial. Esta forma de cultivar las plantas tiene dos
características fundamentales: la asepsia (ausencia de
gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el
crecimiento(Milagros y Luna, 2013).
Para poder establecer el cultivo en condiciones
de asepsia, se deben obtener explantos con un
nivel nutricional y un grado de desarrollo
adecuado.es recomendable mantener a las
plantas madre, es decir la planta donadora de
yemas, durante un período de tiempo que
puede oscilar entre unas semanas o varios
meses en un invernadero bajo condiciones
controladas.
Fase 0: Preparación de la planta madre.
Una vez elegida la planta madre, se extraerán los
fragmentos a partir de los cuales se obtendrán los
explantes. Los explantes pueden ser yemas, trozos de
hojas, porciones de raíces, semillas, etc.
Fase 1: Desinfección del material vegetal
Luego de la desinfección superficial, las
semillas o las yemas dependiendo del material
seleccionado, se ponen en medio de cultivo
estéril.
Fase 2: Introducción del material in vitro Fase 3: Multiplicación de los brotes
consiste en aumentar la cantidad de brotes para los
nuevos ciclos de multiplicación y poder destinar parte de
ellos a la siguiente etapa de producción.
Periódicamente estos nuevos brotes se deben subcultivar
en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en
tubos de cultivo u otros recipientes adecuados.
Se utilizan principalmente plantines
individuales de un tamaño aproximado de 2
centímetros. Los brotes obtenidos durante la
fase de multiplicación se transfieren a un
medio libre de reguladores de crecimiento o
que solo contenga hormonas del tipo auxinas.
Fase 4: Elección de un medio de
enraizamiento de los explantos.
Fase 5: Aclimatación de los explantos
enraizados.
Los explantes recién enraizados son muy sensibles
a los cambios ambientales, de manera que el éxito
o el fracaso de todo el proceso dependen de la
aclimatación. En esta etapa las plantas sufrirán
cambios de diferente tipo que permitirán la
adaptación de las mismas a vivir en condiciones
naturales (Simpson, 2017).
Ventajas que ofrece el cultivo in vitro
❖ Es uno de los métodos conocidos más utilizado
actualmente para erradicar patógenos.
❖ Propagación clonal masiva de plantas libres de
enfermedades en corto tiempo.
❖ Reduce los costos de labores agronómicas en el
mantenimiento de germoplasma en campo.
❖ Los materiales pueden ser propagados en
cualquier época del año.
❖ Facilita el intercambio de material genético.
❖ Reduce el riesgo de pérdidas genéticas al
evitar la mezcla del material por cruzamiento.
Desventajas del cultivo in vitro
❖ Requiere de personal especializado.
❖ Requiere de, infraestructura y equipamiento.
❖ Los productos químicos son de elevado
costo.
La propagación in vitro a través del cultivo de
embriones cigóticos, demuestra ser eficaz para la
obtención de plántulas. Micropropagación es un tema
de mucha importancia ya que es útil para preservar o
perpetuar la genética, es muy eficaz estudiarlo y
analizarlo por que nos ayuda a que podamos
aprovechar el área de siembra es bueno para producir
mas y obtener plantas de calidad con resistencia a
varias enfermedades.
Conclusión
Se recomienda saber y distinguir que fertilizante utilizar ya que
la fertilización Es sumamente importante que, de acuerdo a los
resultados del análisis del suelo.
Es recomendable el buen Manejo fitosanitario Si bien es cierto
que las plantas están bajo condiciones protegidas, es necesario
realizar controles fitosanitarios, pues es imposible evitar la
entrada de insectos.
Recomendaciones
Bibliografía
• Agramonte, D. D. (2001. ). Micropropagación del Eucalyptus grandis (Hill ex Maiden) a partir de segmentos
nodales. . Biotecnología vegetal Vol 1 No2: 109-114.
• Gárate, M. (2010. ). Técnicas de propagación por estacas. . Tesis de Ingeniero Agrónomo, Universidad
Nacional de Ucayali. Ucayali, Perú.
• GIMÉNEZ, C., & COLMENARES, M. (2004). Sistemas prototipos para la micropropagación por inmersión
temporal. . Revista de la Facultad de Agronomía, Bogotá, v.21, supl.1, p.1-7
• Olmos, S. (2017). Micropropagación. Obtenido de Micropropagación:
https://www.researchgate.net/publication/304459382_IV_Capitulo_1_Micropropagacion
• OLMOS, S., LUCIANI, G., & GALDEANO, E. (2010). Biotecnología y Mejoramiento Vegetal: II Capítulo
Micropropagación. INTA. pp 353-362.
• Quiala E., G. M. (2004). Empleo de la Biotecnología vegetal para la propagación de cactáceas amenazadas. .
Biotecnología Vegetal 4(4):195-199.
• Reyes, H. y. (1994). Cultura de tejidos en la agricultura. . Revista Tierra Adentro No. 24, 30-33.
• Saucedo, S. R. (2009). Efecto de los reguladores de crecimiento para la propagación in vitro de Malanga
(Xanthosoma sagittifolium). . Revista Ciencia y Tecnología (1) 1: 17-21.
• Milagros, F. y Luna, L. (2013) “Micropropagación vegetal”, pp. 1–11.
• Simpson, J. (2017) “Marcadores moleculares”, Botánica Sciences, (60), p. 73. doi: 10.17129/botsci.1521.

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UNIVERSIDAD LAICA ELOY ALFARO DE MANABÍ

  • 1. UNIVERSIDAD LAICA ELOY ALFARO DE MANABÍ EXTENSIÓN EN EL CARMEN Integrantes • Alcívar Veliz Willy Yair • Andrade Mendoza Danayse Yalkira • Aveiga Estrada Josselyn Fernanda • Barberán Muñoz Lisseth Estefanía • Barreiro Velasquez Yulissa María • Bermeo Velasquez Brenda María • Bolaños Vélez Cristóbal Ismael • Briones Herrera Edwin Eduardo • Carrión Cuenca Valeria Alexandra • Castillo Castillo Jefferson Alexander • Docente • Ing. Verónica Taipe • Catedra • Fitogenotecnia Micropropagación
  • 2.  Índice  Introducción. ....................................................................................................................................... 3  OBJETIVO GENERAL. ..................................................................................................................... 4  OBJETIVOS ESPECÍFICOS.............................................................................................................. 4  MARCO TEÓRICO............................................................................................................................ 5  FUNDAMENTOS BIOLÓGICOS DE LA MICROPROPAGACIÓN. ......................................... 5  Micropropagación, Generalidades Y Procesos. .............................................................................. 5  Desarrollo de la planificación. ............................................................................................................ 7  Fase 0: Preparación de la planta madre........................................................................................... 7  Fase 1: Desinfección del material vegetal....................................................................................... 7  Fase 2: Introducción del material in vitro. ...................................................................................... 7  Fase 3: Multiplicación de los brotes................................................................................................ 7  Fase 4: Elección de un medio de enraizamiento de los explantos................................................... 7  Fase 5: Aclimatación de los explantos enraizados. ......................................................................... 8  Conclusiones. ...................................................................................................................................... 8  Recomendaciones................................................................................................................................ 8  Bibliografía ......................................................................................................................................... 9
  • 4.  Micropropagación es el conjunto de metodologías y procesos de cultivo de tejidos utilizados para repetir plantas asexualmente de forma alígera, eficiente que puede utilizarse para generar material de plantación libre de enfermedades, con el fin de obtener una población de plantas ‘elite’ seleccionadas por sus características de desempeño agronómico, libres de virus y en el menor tiempo posible(Olmos, 2017). Introducción
  • 5. Objetivo General • Fortalecer el conocimiento y desarrollar habilidades técnicas en los tejidos vegetales con el fin de implementarlo en las especies vegetales. Objetivos Específicos. • Comprender los conceptos teóricos básicos de los tejidos vegetales. o Establecer y aplicar protocolos en especies vegetales. • Preparar adecuadamente medios de cultivo a partir de una especie vegetal y un objetivo o propósito de cultivo definidos. • Conocer la función que desempeñan los distintos componentes del medio de cultivo en el desarrollo de los tejidos
  • 6. La reproducción asexual es utilizada para obtener una gran cantidad de plantines a partir de una única planta Dependiendo del caso, se aprovechan bulbos , cormos, rizomas , tubérculos, tallos, raíces, hojas, estaca etc. Las plantas obtenidas por propagación asexual o vegetativa son idénticas a la planta madre e idénticas entre sí. En otras palabras, son clones (Gárate, 2010. ). Fundamentos Biológicos De La Micropropagación.
  • 7. Totipotencia Es la capacidad de una célula de generar réplicas del organismo del cual deriva. Restringida en animales, esta propiedad característica de las plantas permite la supervivencia en condiciones ambientales desfavorables o luego del ataque de herbívoros, plagas y patógenos (Reyes, 1994). El cultivo in vitro o la micropropagación se inicia con la extracción de pequeños fragmentos de tejido tomados de diversas partes de la planta una vez limpios y desinfectados, los explantes son transferidos en condiciones asépticas a un medio de cultivo adecuado y, más tarde, su diferenciación de modo de generar una planta completa (Saucedo, 2009).
  • 8. El cultivo in vitro puede desarrollarse inicialmente en un espacio reducido e independientemente de factores climáticos y estaciones del año. Se calcula que 10 m2 de estantes son suficientes para el cultivo de 20.000 plantines. El numero de producción en cultivo in vitro es mucho mayor que el cultivo tradicional una gema de eucalipto puede originar en un año 75 trillones de mudas en vez de las 100 o 200 que se obtienen habitualmente por estaquillado (Agramonte, 2001. ) Micropropagación, Generalidades Y Procesos.
  • 9. Un ejemplo es la producción de tubérculos de papa libres de virus para la inclusión en programas de certificación, permite la producción de semillas sintéticas, que consisten en un embrioide formado a partir de una masa de tejidos obtenida in vitro, envuelta en una sustancia gelatinosa con nutrientes y cubierta por un plástico biodegradable. Son de gran interés para las industrias del papel, celulosa y maderera ya que el cultivo in vitro permite la producción y distribución de mudas libres de patógenos a partir de tejidos meristemáticos, que no están infectados por virus facilitan el mejoramiento genético de las variedades comerciales y, también, porque representan una etapa indispensable en la obtención de una planta transgénica (GIMÉNEZ & COLMENARES, 2004).
  • 10. es una de las aplicaciones más generalizadas del cultivo in vitro, a partir de un fragmento (explante) de una planta madre los frascos que contienen las plantas se ubican en estanterías con luz artificial dentro de la cámara de crecimiento, donde se fija la temperatura en valores que oscilan entre los 21 y 23°C, además de controlar la cantidad de horas de luz. Por su parte, el medio de cultivo se compone de una mezcla de sales minerales, vitaminas reguladoras de crecimiento, azúcar, agua y agar (OLMOS, LUCIANI, & GALDEANO, 2010). La micropropagación o propagación clonal
  • 11. clasificar los principales factores no biológicos que afectaran al desarrollo del cultivo in vitro Ambiente químico Composición del medio de cultivo pH. Ambiente físico Temperatura Luz y fotoperíodo Humedad
  • 12. Proceso de micropropagación diferenciamos varias fases o etapas Selección y Preparación de la planta madre Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de semillas Introducción del material seleccionado in vitro Multiplicación de brotes
  • 13. Enraizamiento Aclimatación Esta secuencia de etapas abarca el ciclo completo de la multiplicación de plantas in vitro; puede ser aplicada a diferentes especies vegetales, en cada caso se podrán incluir simplificaciones o cambios de acuerdo a las características de las plantas, pero en términos generales son comunes al proceso de propagación in vitro (Quiala E., 2004).
  • 14. Es una de las aplicaciones más generalizadas del cultivo in vitro, a través de la micropropagación, a partir de un fragmento (explante) de una planta madre Desarrollo de la planificación La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente artificial. Esta forma de cultivar las plantas tiene dos características fundamentales: la asepsia (ausencia de gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el crecimiento(Milagros y Luna, 2013).
  • 15.
  • 16. Para poder establecer el cultivo en condiciones de asepsia, se deben obtener explantos con un nivel nutricional y un grado de desarrollo adecuado.es recomendable mantener a las plantas madre, es decir la planta donadora de yemas, durante un período de tiempo que puede oscilar entre unas semanas o varios meses en un invernadero bajo condiciones controladas. Fase 0: Preparación de la planta madre.
  • 17. Una vez elegida la planta madre, se extraerán los fragmentos a partir de los cuales se obtendrán los explantes. Los explantes pueden ser yemas, trozos de hojas, porciones de raíces, semillas, etc. Fase 1: Desinfección del material vegetal
  • 18. Luego de la desinfección superficial, las semillas o las yemas dependiendo del material seleccionado, se ponen en medio de cultivo estéril. Fase 2: Introducción del material in vitro Fase 3: Multiplicación de los brotes consiste en aumentar la cantidad de brotes para los nuevos ciclos de multiplicación y poder destinar parte de ellos a la siguiente etapa de producción. Periódicamente estos nuevos brotes se deben subcultivar en un nuevo medio mediante divisiones y resiembras en tubos de cultivo u otros recipientes adecuados.
  • 19. Se utilizan principalmente plantines individuales de un tamaño aproximado de 2 centímetros. Los brotes obtenidos durante la fase de multiplicación se transfieren a un medio libre de reguladores de crecimiento o que solo contenga hormonas del tipo auxinas. Fase 4: Elección de un medio de enraizamiento de los explantos. Fase 5: Aclimatación de los explantos enraizados. Los explantes recién enraizados son muy sensibles a los cambios ambientales, de manera que el éxito o el fracaso de todo el proceso dependen de la aclimatación. En esta etapa las plantas sufrirán cambios de diferente tipo que permitirán la adaptación de las mismas a vivir en condiciones naturales (Simpson, 2017).
  • 20. Ventajas que ofrece el cultivo in vitro ❖ Es uno de los métodos conocidos más utilizado actualmente para erradicar patógenos. ❖ Propagación clonal masiva de plantas libres de enfermedades en corto tiempo. ❖ Reduce los costos de labores agronómicas en el mantenimiento de germoplasma en campo. ❖ Los materiales pueden ser propagados en cualquier época del año. ❖ Facilita el intercambio de material genético. ❖ Reduce el riesgo de pérdidas genéticas al evitar la mezcla del material por cruzamiento.
  • 21. Desventajas del cultivo in vitro ❖ Requiere de personal especializado. ❖ Requiere de, infraestructura y equipamiento. ❖ Los productos químicos son de elevado costo.
  • 22. La propagación in vitro a través del cultivo de embriones cigóticos, demuestra ser eficaz para la obtención de plántulas. Micropropagación es un tema de mucha importancia ya que es útil para preservar o perpetuar la genética, es muy eficaz estudiarlo y analizarlo por que nos ayuda a que podamos aprovechar el área de siembra es bueno para producir mas y obtener plantas de calidad con resistencia a varias enfermedades. Conclusión
  • 23. Se recomienda saber y distinguir que fertilizante utilizar ya que la fertilización Es sumamente importante que, de acuerdo a los resultados del análisis del suelo. Es recomendable el buen Manejo fitosanitario Si bien es cierto que las plantas están bajo condiciones protegidas, es necesario realizar controles fitosanitarios, pues es imposible evitar la entrada de insectos. Recomendaciones
  • 24. Bibliografía • Agramonte, D. D. (2001. ). Micropropagación del Eucalyptus grandis (Hill ex Maiden) a partir de segmentos nodales. . Biotecnología vegetal Vol 1 No2: 109-114. • Gárate, M. (2010. ). Técnicas de propagación por estacas. . Tesis de Ingeniero Agrónomo, Universidad Nacional de Ucayali. Ucayali, Perú. • GIMÉNEZ, C., & COLMENARES, M. (2004). Sistemas prototipos para la micropropagación por inmersión temporal. . Revista de la Facultad de Agronomía, Bogotá, v.21, supl.1, p.1-7 • Olmos, S. (2017). Micropropagación. Obtenido de Micropropagación: https://www.researchgate.net/publication/304459382_IV_Capitulo_1_Micropropagacion • OLMOS, S., LUCIANI, G., & GALDEANO, E. (2010). Biotecnología y Mejoramiento Vegetal: II Capítulo Micropropagación. INTA. pp 353-362. • Quiala E., G. M. (2004). Empleo de la Biotecnología vegetal para la propagación de cactáceas amenazadas. . Biotecnología Vegetal 4(4):195-199. • Reyes, H. y. (1994). Cultura de tejidos en la agricultura. . Revista Tierra Adentro No. 24, 30-33. • Saucedo, S. R. (2009). Efecto de los reguladores de crecimiento para la propagación in vitro de Malanga (Xanthosoma sagittifolium). . Revista Ciencia y Tecnología (1) 1: 17-21. • Milagros, F. y Luna, L. (2013) “Micropropagación vegetal”, pp. 1–11. • Simpson, J. (2017) “Marcadores moleculares”, Botánica Sciences, (60), p. 73. doi: 10.17129/botsci.1521.