Este documento presenta una introducción a la técnica histológica y la microscopía. Define la histología y resume brevemente su historia. Explica conceptos básicos como los tejidos y los pasos de la técnica histológica. Describe varias técnicas de tinción comúnmente usadas y procedimientos avanzados como la histoquímica e inmunocitoquímica. Finalmente, define el microscopio y explica sus componentes y tipos principales.
1. Hospital Regional Universitario
José María Cabral y Báez
(HRUJMCB)
Rotación: CIRUGÍA
Sub-especialidad: ANATOMÍA
PATOLÓGICA & CITOLOGÍA
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
&
MICROSCOPÍA
Presentado por:
Yoseli Ventura, médico interno.
2. CONTENIDO
Introducción
Definición de Histología
Historia de la Histología
Conocimientos básicos sobre histología
Pasos de la técnica histológica básica
Técnicas de tinción más utilizadas: tipos & usos
Procedimientos avanzados de observación
Microscopía: Concepto, tipos & sus
componentes.
3. Introducción
Se denomina TÉCNICA HISTOLOGICA al conjunto de
procedimientos aplicados a un material biológico (animal o
vegetal) con la finalidad de prepararlo y conferirle las condiciones
óptimas para poder observar, examinar y analizar sus
componentes morfológicos a través de los microscopios
electrónicos.
4. Definición de Histología
Rama de la anatomía que estudia los
tejidos de animales y plantas haciendo
una descripción de estructura celular,
tejidos y órganos asociada a su función.
Anatomía Histología Patología
Histopatología Citopatología Anatomía patológica
5. Historia de la Histología (1)
Marie François Xavier Bichat
Fundador de la Histología
Moderna
Marcello Malpighi
Fundador de la Histología
6. Historia de la Histología (2)
Giovanni Morgagni
Padre de la Anatomía
Patológica
Rudolf Virchow
Padre de la Patología
7. Conocimientos Básicos de la
Histología
TEJIDO
Grupo de células similares, iguales o diferenciadas,
que realizan una función específica y tienen un
origen embrionario común.
A. Nervioso
B. Muscular
C. Conectivo
D. Epitelial
8. Pasos de la técnica histológica básica (1)
1. Obtención de la
muestra
2. Fijación
3. Corte
4. Tinción
5. Montaje
6. Observación al
microscopio
11. Tinciones de uso frecuente (1)
Un colorante es un
cuerpo coloreado que
puede comunicar su
color a otro cuerpo.
a) Hematoxilina-
Eosina (H&E)
-Ácidos:
Componentes celulares
básicos ACIDÓFILOS
Ej: Citoplasma
-Básicos
Componentes celulares
ácidos BASÓFILOS
Ej: Núcleo.
12. Tinciones de uso frecuente (2)
b) Wright-Giemsa (WG)
Uso: Diferenciar células
sanguíneas
• Rosa: Eritrocitos,
gránulos de
eosinófilos.
• Púrpura: Núcleos de
leucocitos, gránulos
basófilos.
• Azul: Citoplasma de
linfocitos y
monocitos.
13. Tinciones de uso frecuente (3)
c) Tinción de
Orceína
Uso: diferenciar
fibras elásticas.
Marrón rojizo:
fibras elásticas
14. Tinciones de uso frecuente (4)
d) Tinción
tricomónica de
Mallory
Uso: diferenciar
elementos del
tejido conectivo.
• Azul oscuro:
fibras de
colágeno
• Rojo: fibras
musculares, glía
• Naranja: fibras de
elastina
15. Tinciones de uso frecuente (3)
e) Tinción de Ácido Peryódico-Schiff (PAS)
Uso: diferenciar moléculas ricas en glucógeno
y carbohidratos.
16. Tinciones de uso frecuente (4)
f) Tinción de Plata
Uso: diferenciar fibras reticulares.
18. HISTOQUÍMICA
Es la aplicación de las reacciones químicas y
bioquímicas en la técnica histológica.
Uso: Determinar presencia de ciertas sustancias
celulares o tisulares.
19. INMUNOCITOQUÍMICA (1)
“Si ves algo pequeño, agrándalo. Si ves algo incoloro, coloréalo”.
Es un grupo técnicas de inmunotinción que permiten
demostrar una variedad de antígenos presentes en las
células o tejidos utilizando anticuerpos marcados.
Uso: Identificar neoplasias.
22. DEFINICIÓN DE MICROSCOPIO
Es un instrumento que
sirve para ver objetos
demasiados pequeños
para ser vistos con
claridad por el ojo
humano.
23. EL MICROSCOPIO COMPUESTO
• Es el microscopio
más utilizado en la
ciencia.
• Consta de dos
partes ópticas:
Lentes oculares y
objetivos.
• Inventado por el
holandés Zacarías
Janssen (también
conocido por
inventar el
telescopio).
26. Referencias Bibliográficas
1. Gartner L, Hiatt J. Chapter 1: Introduction to histology and basic
histological techniques. Color textbook of histology. Philadelphia: W.B.
Saunders; 2001.
2. Simmons J. Doctors and discoveries. Boston: Houghton Mifflin; 2002.
3. Daston L, Lunbeck E. Histories of scientific observation. Chicago:
University of Chicago Press; 2011.
4. Wesapiens.org. Técnicas Histológicas [Internet]. 2015 [citado 8 Oct 2015].
Disponible en:
http://www.wesapiens.org/es/class/4933003/T%C3%A9cnicas+Histol%C3
%B3gicas
5. Mmegias.webs.uvigo.es. Técnicas Histológicas. Protocolos. Atlas de
Histología Vegetal y Animal [Internet]. 2015 [citado 10 Oct 2015].
Disponible en: http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/p-
tincion-pas-h.php
6. Uv.es. Grado en Odontología - Histología [Internet]. 2015 [citado 10 Oct
2015]. Disponible en: http://www.uv.es/histomed/odo/index.htm
7. Múrcia D. Inmunohistoquímica | Citología y Patología Veterinaria
[Internet]. Patolvet.wordpress.com. 2012 [citado 10 Oct 2015]. Disponible
en: https://patolvet.wordpress.com/tag/inmunohistoquimica/
8. Netlab.com.ec. Patología molecular | [Internet]. 2015 [citado 10 Oct
2015]. Disponible en: http://www.netlab.com.ec/?page_id=127
9. Laboratorio Químico. Microscopio » TP - Laboratorio Químico [Internet].
2015 [citado 09 Oct 2015]. Disponible en:
https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-
Notas del editor
The study of tissue is known as histology or, in connection with disease, histopathology. The classical tools for studying tissues are the paraffin block in which tissue is embedded and then sectioned, the histological stain, and the optical microscope.
Importancia: Comprensión del proceso patológico por respuesta celular y tisular a las lesiones relacionadas con procesos patológicos.
Anatomía: Ciencia que estudia la estructura, forma y relaciones de las diferentes partes del cuerpo de los seres vivos
Patología: Parte de la medicina que estudia los trastornos anatómicos y fisiológicos de los tejidos y los órganos enfermos, así como los síntomas y signos a través de los cuales se manifiestan las enfermedades y las causas que las producen.
La Histopatología es la rama de la Patología que trata el diagnóstico de enfermedades a través del estudio de los tejidos.
Simmons J. Doctors and discoveries. Boston: Houghton Mifflin; 2002.
Daston L, Lunbeck E. Histories of scientific observation. Chicago: University of Chicago Press; 2011.
Simmons J. Doctors and discoveries. Boston: Houghton Mifflin; 2002.
Daston L, Lunbeck E. Histories of scientific observation. Chicago: University of Chicago Press; 2011.
En la actualidad los tejidos animales (que incluyen naturalmente los humanos) están divididos en 4 grupos fundamentales a saber:
Wesapiens.org. Técnicas Histológicas [Internet]. 2015 [cited 8 October 2015]. Available from: http://www.wesapiens.org/es/class/4933003/T%C3%A9cnicas+Histol%C3%B3gicas
Wesapiens.org. Técnicas Histológicas [Internet]. 2015 [cited 8 October 2015]. Available from: http://www.wesapiens.org/es/class/4933003/T%C3%A9cnicas+Histol%C3%B3gicas
Facilita la identificación las principales estructuras celulares que se desea observar.
El método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, que por ser catiónica o básica, tiñe estructuras ácidas (basófilas) en tonos azul y púrpura,como por ejemplo los núcleos celulares; y el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidófilos) en tonos de color rosa, gracias a su naturaleza ácida, como el citoplasma.
Epitelio oral embrionario
Cortes teñidos con hematoxilina y eosinas (A) y con Pass y hematoxilina (B). Las secciones pertenecen a campos similares del digestivo. La tinción de fucsia corresponde al reactivo de Schiff, el cual marca mucoplisacáridos de las células caliciformes.
Mmegias.webs.uvigo.es. Técnicas Histológicas. Protocolos. Atlas de Histología Vegetal y Animal [Internet]. 2015 [citado 10 Oct 2015]. Disponible en: http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/protocolos/p-tincion-pas-h.php
Uv.es. Grado en Odontología - Histología [Internet]. 2015 [citado 10 Oct 2015]. Disponible en: http://www.uv.es/histomed/odo/index.htm
La histoquímica es la aplicación de las reacciones químicas y bioquímicas en la técnica histológica, con el fin de localizar y determinar de manera científica ciertas sustancias o su actividad.
El objetivo de la histoquímica es poner de manifiesto una molécula o familia de moléculas presentes en una sección histológica y estudiar su distribución tisular "in situ".
Kumc.edu. 8. Cell Structure [Internet]. 2015 [citado 10 Oct 2015]. Disponible en: http://www.kumc.edu/instruction/medicine/anatomy/histoweb/cytology/cell08.htm
La técnica de tinción inmunohistoquímica que usa anticuerpos específicos para detectar la proteína en los tumores bajo estudio.
Su fundamento es muy simple. Y muy ingenioso. Si no ves algo pequeño, agrándalo. Si no ves algo incoloro, coloréalo. Pero, ¿cómo agrandar algo tan pequeño como una proteína y, además, de forma selectiva? Aquí viene la parte ingeniosa: enganchándole una cadena de anticuerpos (de ahí el nombre de “inmuno”).
Múrcia D. Inmunohistoquímica | Citología y Patología Veterinaria [Internet]. Patolvet.wordpress.com. 2012 [citad 10 Oct 2015]. Disponible en: https://patolvet.wordpress.com/tag/inmunohistoquimica/
Netlab.com.ec. Patología molecular | [Internet]. 2015 [cited 10 Oct 2015]. Disponible en: http://www.netlab.com.ec/?page_id=127
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos no perceptibles a al ojo humano. Esto se logra mediante un sistema óptico compuesto por lentes, que forman y amplifican la imagen del objeto que se está observando. Este término surge en el siglo XVII y deriva de las palabras griegas mikrós (pequeño) y skopéoo (observar).
Se distinguen dos tipos de microscopio, basados en el número de lentes y su posición. Estos son:
Microscopio simple: conocido comúnmente como lupa. Está constituido por una solo lente, o un sistema de lentes que actúan como si fuera una lente simple.
Microscopio compuesto: se constituye por la combinación de dos o más sistemas de lentes convergentes: uno, próximo al ojo del observador, el ocular y el otro próximo al objeto, denominado objetivo.
Laboratorio Químico. Microscopio » TP - Laboratorio Químico [Internet]. 2015 [citado 09 Oct 2015]. Disponible en: https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-instrumentos-de-un-laboratorio-quimico/microscopio.html
El microscopio compuesto es el microscopio más utilizado en la ciencia. Consiste en dos partes ópticas: lentes oculares (el que está próximo a tus ojos) y los lentes objetivos (el que está posicionado cerca de la prueba a observar). El microscopio compuesto fue el primero introducido por inventor holandés Zacarías Janssen. Su aparato sofisticado para el año 1590, llevaba a cabo dos tareas: para ver estrellas y pequeños objetos.