El documento proporciona una breve historia de la microbiología, desde los primeros estudios de Hipócrates y Avicena sobre enfermedades infecciosas hasta los descubrimientos más recientes en biología molecular. Detalla los principales hitos y descubridores en el campo, como Pasteur, Koch, Fleming y Gallo. Finalmente, aborda la automatización en microbiología y los desafíos actuales de la resistencia a los antimicrobianos.

1. AUTOMATIZACION EN
MICROBIOLOGIA

2. Marco
Terencio V
116-27 a.C.
Insectos
Vectores de
enfermedades
Avicena
981-1037
Describe
síntomas y
tratamiento
de gusanos
Hipócrates
460 -377 a.C.
Enfermedad
no es mágica
Enfermedad
alt. Fluido
Vital y miasma
Girolano
Fracastoro
1478-1553
Transmisibilidad
de las enfermedades
Poema sobre la sífilis
HISTORIA : MICROBIOLOGIA
ZACARIAS JANSSEN
1590-1608
Construyo Sistema de
Lentes compuestos
GALILEO GALILEI
1564-1609
Construyo primer
Microscopio simple
ANTONY VAN
LEEUWENHOEK
1632 – 1723
1676,observa y
Dibuja bacterias
de la saliva
Carta 39,
17 Sept.
1683

3. EDWARD JENNER
1749 – 1823
Padre de la
Imunología
1798: Preparó la
vacuna contra la
viruela humana.
Realizó inoculaciones
a humanos utilizando
pústulas de viruela
vacuna y comprobó
que esta práctica
protegía frente a la
viruela humana.
26 de Octubre 1979 la
O.M.S. da por
erradicada esta
enfermedad del mundo
LOUIS PASTEUR
1822 – 1895
Padre de la
Bacteriología
1856: Fermentación por
levaduras
1857: Fermentación
láctica
1861: Culmino con la
teoría de Generación
espontánea
1866: Pasteurización
1880: Identificó agente
del Cólera en la gallina.
1881: Inmuniza ovejas
contra el Carbunco
1885: Vacuna contra la
Rabia
ROBERTO KOCH
1843 – 1910
Nóbel Fis. y Med. (1905)
Las enf. infecciosas son
provocadas por
microorganismos y elaboro
técnicas para identificar y
aislar bacterias
1876: Demuestra la etiología
del Carbunco o Ántrax,
Bacillus anthracis
1882: “Myco. Tuberculosis”
1881: Estudio esporas y
diferencias de los bacilos
1881: técnicas de laboratorio:
medios de cultivo sólidos
1883: descubre el Vibrión
colérico en Egipto

4. JOSEPH LISTER (1827 – 1912)
1867: Las bases de la desinfección y antisepsia en
cirugía, utilizando fenol y bicloruro de mercurio en
en el lavado del instrumental quirúrgico, manos y
heridas de pacientes
Frederich Loeffler (1852-1915)-Klebs:descubre bacilo diftérico
Karl Joseph Ebert (1835-1926): el agente causal de la fiebre
tifoidea
Armauer Hansen (1841-1912), Lepra
Albert Neisser (1855-1916), aísla el Gonococo
Arthur Nicolaier ,descubre el bacilo tetanico
Kitasato y Yersin ,descubren el bacilo de la peste

5. Descubrimiento de la Penicilina (1929)
 Fleming, Sir Alexander.Fleming, Sir Alexander.
Observó que un moho que contaminaba
una de sus placas de cultivo, había
destruido la bacteria cultivada en ella,
llamado Penicillium notatun.
Descubrimiento de la Estreptomicina (1944)
Schatz y Waksman: Descubren la
estreptomicina. Producida por hongo
Streptomyces griseus

6. HANS C. J. GRAM (1853 – 1938)
1884, Coloración GRAM
TyndallTyndall (1820-1893) ,1877 Evidencia la presencia de(1820-1893) ,1877 Evidencia la presencia de
formas microbianas resistentes al calor (esporasformas microbianas resistentes al calor (esporas
bacterianas).bacterianas).
Schaudinn y Hoffmann 1906 ; Descubren que
Treponema pallidum , causa la Sífilis
Paul Ehrlich ( 1854-1919 ) ,1910 desarrolla
quimioterapéutico
(Salvarsán) frente a la Sífilis

7. ROBERTO GALLO ( U.S.A. )
JEAN LUC MONTANIER ( FRANCIA )
1984: Descubren el VIH
1915-1917 , Descubren los virus
bacterianos “Bacteriófagos”
D’Herrelle y Twort
Schönlein (1839) :Schönlein (1839) : Describe asociación de HONGOSDescribe asociación de HONGOS
concon
la Tiña (infección en piel)la Tiña (infección en piel)

8. 1910: Comienza la era de la Biología Molecular
1979: Se sintetiza la insulina por técnicas de ADN.
1982: Se desarrolla la vacuna contra la Hepatitis B.
Watson y Crick :1953 , Proponen la
estructura de la doble hélice para el ADN.
1933 el primer Microscopio Electrónico de
Transmisión.
1980 el primer Microscopio Electrónico de
Barrido

9. El dinámico desarrollo de la
microbiología en el siglo XX-XXI
Descubrimientode
Agentesinfecciosos
Eradela
Antibioticoterapia
Prevención
vacunas
Epidemias
B-lactamicos
Aminoglucosidos
Macrolidos
Quinolonas
Genética
Microbiología
Bioquímica
Revolucióndel
Laboratorio
Biología Básica
Ac. nucleicos
Código genético
Mecanismo de síntesis proteica
Automatización
Microbiología
En Procedimientos
Uso ordenadores de
gestión Microbiología
En diagnostico
Hibridomas
Ac. monoclonales
específicos
PCR

11. ¿PORQUE LLEGAR A LA AUTOMATIZACION?

13. Primer Método utilizado (1966), Estandarizado 0.5 Escala Mc
Farland (Turbidez-inoculo)

14. Criterios de Interpretación (R, I, y S)
Los escatogramas o scatterplots
Para la interpretación de CIM y disco difusión .
•Los aislamientos son analizados con los métodos estándar de
difusión por disco y CIM del NCCLS. La CIM y su correspondiente
diámetro de zona son delineados para cada aislamiento.

15. Panel de microdilucion
en Caldo - CIM
La prueba de microdilucion en caldo -
CIM se realiza en placas de poliestireno
(0.1 ml) .
Una placa contiene de 7 a 8 diluciones
de 12 diferentes antibióticos
Una celdilla es control (+)
(caldo+inoculo)
Control (-) (solo caldo)
Placas para Gram negativos y Gram (+)
Caldo Muller Hinton recomendable
Hay paneles específicos
Caldo contiene Cationes Ca ++ y Mg ++
Cada lote examinado PH después de
preparado (7.2 a 7.4) y Tº 25ºc
Para neumococo suplementar 2-5%
sangre caballo lisado
Colocar standares de control de calidad

16. Grupo N acilo
Anillo Tiazolidinico
Posición aminoacídica
39 42 104 164 237 238 240 265
TEM-1 Ala Glu Arg Ala Gly Glu Thr
TEM-2
TEM-3 Lys Ser
TEM-4 Lys Ser Met
TEM-5 Ser Thr Lys
TEM-6 Lys His
TEM-7 Lys Ser
TEM-8 Lys Lys Ser Ser
TEM-9 Lys Ser Met
TEM-10 Ser Lys
TEM-11 Lys His
TEM-12 Ser
TEM-13 Lys Met
TEM-14 Lys Lys Ser Met
TEM-15 Lys Ser
Posición aminoacídica
69 165 244 275 276
TEM-1 Met Trp Arg Arg Asn
TEM-31 (IRT-1) Cys
TEM-30 (IRT-2) Ser
TEM-32 (IRT-3) Ile
TEM-35 (IRT-4) Leu Asp
TEM-33 (IRT-5) Leu
TEM-34 (IRT-6) Val
TEM-36 (IRT-7) Val Asp
TEM-37 (IRT-8) Ile Asp
TEM-38 (IRT-9) Val Leu
TEM-39 (IRT-10) Leu Arg Asp
TEM-40 (IRT-I67) Ile
TEM-41 Thr
TEM-45 (IRT-14) Leu Gln
Posición aminoacídica
35 179 205 238 240
SHV-1 Leu Asp Arg Gly Glu
SHV-2 Ser
SHV-2a Gly Ser
SHV-3 Leu Ser
SHV-4 Leu Ser Lys
SHV-5 Ser Lys
SHV-7 Ser Lys
SHV-8 Asn
SHV-11 Gln
SHV-12 Gln Ser

17. BLEE B- Lactamasa
relacionada
País de origen En especies
detectadas
TEM TEM1 Y TEM2 FRANCIA Enterobacterias
SHV SHV 1 / LEN ALEMANIA P. Aeruginosa /
BGNNF
CTX-M
cefotaxaminasas
KLUA Kluyvera Alemania/Argentin E. coli, Salmonella
OXA OXA 10 Turquía/Francia P- aeruginosa
PER FRANCIA P.- aeruginosa
VEB PER Vietnam/Tailandia E. Coli
TLA CME-1 MEXICO E. Coli
GES/IBC Guayana/ Sudafr. K. Pneumoniae y
Pseudomona
BES Y. Enterocolitica Brasil S. marcescens
SFO AmpA S. fonticola Japon E. cloacae

18. 1 Antibiótico en sangre
2 Bacterias sensibles a los
antibióticos
3 Bacteria no sensible a los
antibióticos
4 Bacterias muertas por
antibióticos
6 Bacteria con resistencia creciente
a antibióticos
7 Bacterias muertas por
antibióticos
8 Población bacteriana con
resistencia creciente al antibiótico

19. GENES DE RESISTENCIA BACTERIANA:
1 Plásmido
2 Antibiótico expulsado
3 Genes de resistencia antibiótica
4 Enzima que degrada al antibiotico
5 Antibiótico que ingresa
6 Antibiótico que ingresa
7 Enzima que altera el antibiótico
8 Antibiótico que ingresa
9 Cromosoma

21. MRSA O SARM O SUPERBUG
STAFILOCOCO AUREUS RESISTENTE A
LA METICILINA
•E.U. 300,000 contraen infecciones en hospitalizacion /año
•CDC ,número de muertes 12,000 por año
•UCI ,aislamiento llega a 50% (R) a Meticilina, Penicilina,
Tetraciclina y Eritromicina
•Factores de riesgo: prolongada hospitalización, uso múltiple
de antibióticos previos,etc.
•En la comunidad niños ,ancianos y portadores enf. crónicas
•Endémico en Hospitales ,Neumonía ,Infecc. qx, bacteriemias.
En el Perú : UCI ,Unidad de Quemados, Oncologia y Cirugía,
Resistencia del 58% (500 cepas aisladas-1995)
En la actualidad brotes epidémico relacionado a la colonización
Del personal de salud (MINSA)

22. VISA – Resistencia Intermedia a la
Vancomicina (GISA)
Susceptibilidad intermedia a la Vancomicina, CIM 8-16 ug /ml
y completamente Resistentes a CIM >= 32 ug /ml
VISA debido al engrosamiento de la pared celular que contiene
precursores capaces de ligar Vancomicina extracelularmente.
La mayoría contiene mecA ,las MIC de 4 ug /ml reportadas se
consideraran VISA potenciales y se recomienda repetir
pruebas
Descrito 1996 en Japón
En EU. en pacientes con MRSA, que reciben Vancomicina por tiempo
prolongado, en diálisis.
VRSA : STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE A VANCOMICINA ,
2002 EN EE.UU.

23. HOSPITAL BASE VALDIVIA
2007
RESISTENCIA DEL
ESTAFILOCOCO AUREUS

24. RESISTENCIA INDUCIBLE A
CLINDAMICINA

bacterias poseen gen de B- Lactamasa
y se exponen un agente B-Lactàmico.
Esta acción antimicrobiana en la pared
celular activa mecanismo genético en
cascada que inicia la producción de
B-Lactamasa.
la producción cesa en ausencia de
antimicrobianos en la pared

27. B-Lactamasa AmpC

28. Panorama actual
 La aparición cada vez más frecuente y diversa de los
mecanismos de resistencia microbiana, sobre todo en
bacterias patógenas facultativas y oportunistas, ha traído
consecuencias importantes en términos de morbilidad y
mortalidad y millonarias pérdidas humanas y económicas
 Resistencia incrementada en caso de staphilococcus,
streptococcus y enterococcus y bacilos Gram negativos
(enterobacterias y no fermentadores)
 Dificultad para predecir los patrones de resistencia en
pacientes críticos
 El uso de la Terapia de amplio espectro de alto costo y
numerosos efectos secundarios o adversos que se
presentan

29. Panorama actual
 La necesidad de
entrega de resultados
oportunos ,evita que la
terapia inicial se
prolonga
innecesariamente
 Mortalidad :
Resultado > 72 hrs. da
como consecuencia el
aumento de mortalidad
en pacientes críticos y
sobrevida disminuye
30% por cada día de
retardo a entrega de
resultados

31. VIGILANCIA DE LA RESISTENCIA A LOS
ANTIMICROBIANOS Perú 2007 -INS
HOSPITAL Aislados E. Pediátricas
( R )
Aislados H. Unanue
(R)
ANTIBIOT.
Cefazolina
Clindamicina 28 53.6 % 46 87
Eritromicina 29 69 46 91.3
Gentamicina 27 59.3 38 81.6
Oxacilina 29 58.6 43 90.7
Vancomicina 29 0 36 0
STAPHYLOCOCCUS AUREUS

32. VIGILANCIA DE LA RESISTENCIA A LOS
ANTIMICROBIANOS Perú 2007 -INS
Escherichia coli-Resistencia
Hospital aislado H. Unanue aislado I.M.P aislado E. Pediátricas
Antibiot
Amicacina 84 2.4 % 106 8.5 % 82 4.9 %
Amox.Cl 227 63.9 83 18.1 79 55.7
Cefotaxima 69 31.9 66 27.3 78 32.1
Ceftriaxona 180 30.5 115 34.8 82 32.9
Cefuroxima 71 23.9
Ciprofloxac 74 65.4 116 30.4 45 33.3
ESBL 53 98.1 31 71 82 32.9
Nitrofurant 190 7.9 102 8.4 69 1.4
Trimet- Sulf 220 65.9 95 80 80
TEM-1 de E. coli
1.8 A de resolución

33. ANTIMICROBIANOS Perú 2007 – INS
Pseudomonas aeruginosa
Hospital aislado 2 de Mayo aislado H. Unanue
Antibiótico
Amicacina 72 37.5% 73 47.9%
Aztreonam 75 33.3 71 80.3%
Ciprofloxacina 73 46.6% 80 65
Gentamicina 76 46.1 72 65.3%
Imipenem 64 43.8
Meropenem 52 50%

34. ANTIMICROBIANOS Perú 2007 – INS
Klebsiella pneumoniae
Hospital aislado IMP aislado H. Unanue aislado S. Bernales
Antibiótico
Amicacina 56 60.7% 42 11.9 31 19.4
Amp. Clav 48 22.9 75 77.3 31(A-S) 41.9 (A-S)
Aztreonam 36 80.6
B-lactamasa 42 95.2
Cefalotina 75 76
Cefazolina 31 93.5 31 58.1
Cefotaxima 36 77.8 31 45.2
Ceftriaxona 63 81.1 31 45.2
Cefuroxima 31 51.6
Ciprofloxacin 52 21.2 66 45.5 31 25.8

43. Factores de riesgo de adquirir infecciones
por cepas productoras de BLEE
Desnutrición
Bajo peso al nacer
Gravedad de la infección
Duración de la estadía en el
hospital y en UCI
Procedimientos invasivos
Receptores oncológicos

44. Reservorios y vectores
Termómetros
Cánulas de oxígeno
Mascaras y tubos de ventiladores mecánicos
Jabón líquido
Insectos
Gel para ecografías
Trabajadores de la salud

46. Papel de la Automatización
 Los sistemas automatizados acortan los
tiempos porque mejoran la sensibilidad
analítica de los métodos
 Capaces de detectar el desarrollo bacteriano
en una suspensión con y sin
antimicrobianos antes que el laboratorista
detecte turbidez (fundamento de los sistemas
automatizados)
 Metodología: colorimetría – turbidimetria
-fluorometria etc.

47. ventajas Especificación
Impacto clínico Rapidez en el resultado
de 3 a 10 horas.
Inicio o cambio precoz del
antimicrobiano
costos hospitalización y
análisis de laboratorio ,de
usos de antibióticos
Estandarización y control
de calidad
de la reproductibilidad
intra e ínter laboratorio
Disminución de la carga
de trabajo
Requieren manos
personal en métodos del
MIC
CONDICIONES SOBRE SU UTILIZACION

48. ventajas Especificación
Disminución de errores
post analíticos
Evita la transcripción
errónea de resultados
por el uso de programas
Utilización de sistemas
de expertos
Permite actualizar
anualmente las guias de
NCCLS que permite el
informe selectivo de los
antimicrobianos.
Monitorizar resultados
inconsistentes

49. ventajas Especificación
Patrones fenotipitos de
resistencia
Permite sospechar la
presencia de B
lactamasas de espectro
extendido y
cefalosporinas
Facilita las estadísticas Almacenar y procesar
información para una
análisis de tendencias
anuales de
susceptibilidad
Facilita el control en el
uso de antimicrobianos
Informe de resultados
en línea con el comité
farmacológico

50. desventajas Especificaciones
Alto costo (3 veces mayor
Que los manuales)
El equipamiento y los
insumos (paneles o
tarjetas) - “tarifas
diferenciadas o “uso para
hospitalización y críticos”
Requieren método de
respaldo
Frente a cualquier falla se
necesita un back up o
metodología manual de
respaldo
No existen normas
NCCLS para sistemas
automatizados, no
aplicables a todas las
bacterias
Sin embargo se deben
considerar los métodos
empleados (puntos de
corte o MIC)

51. desventajas Especificaciones
Poca flexibilidad en los
antimicrobianos
ensayados
Paneles o tarjetas están
determinadas por el
fabricante.
Existen tarjetas
especiales pero requiere
consumo mínimo

52. desventajas Especificaciones
Discrepancia con
métodos convencionales
de referencia
Problemas:
Haemophilus Influenza
Neumococos, Gram (-)
no fermentadores, y
Anaerobios .
Cefepime y Pseudomonas
Vancomicina (I) en el caso
de Enterococcus
Imipenem ,falsa (R) o (S)
con Pseudomona y
Acinetobacter baumanii .

53. desventajas Especificaciones
Discrepancia con
métodos convencionales
de referencia
Problemas:
B lactamasa en algunos
Gram negativos requieren
prolongada incubación
para expresar ( R )
FDA recomienda para
errores mayores (sistema
informe R siendo (S) ,la
tasa no > 1.5% ,la
concordancia sea 90% ,
fallas de crecimiento =<
10%

54. SISTEMAS AUTOMATIZADOS
 Diferentes grados de automatización
 Métodos Calorimétricos,
Turbidimetricos , Fluorescencia
 Lectura a tiempos determinados
 Lectores muy sensibles al
crecimiento aumentan la velocidad de
entrega de los resultados

55. Componentes Tecnológicos
 Panel o tarjeta de Trabajo
 Software
Microbiológico
Control de Calidad Cepas ATCC
Motor de Base de Datos
Estadístico y Epidemiológico
Normas de la CLSI (antes
NCCLS)
Comunicación (Interfaz)

56. Biomeriux
Vitek
Siemens
MicroScan
Becton Dickinson
BDPhoenix

57. Panel o Tarjeta de Trabajo
Biomeriux
Vitek Siemens
MicroScan
Becton Dickinson
BDPhoenix

58. Caracteristicas de Paneles
MICRO Scan
Identificación solamente
Sensibilidad solamente
(BP o MIC)
Combo (ID+ATB)

59. Tecnología del Panel
 Paneles Convencionales – Colorimetrica y Turbidez
– Gram Negativo / Gram Positivo
 Paneles Cromogénicos – Colorimetrica Enzimatica
 Identificación en 4 hrs
– ID de Levaduras
– HNID (Haemophilus, Neisseria, Moraxella y Gardnerella)
– ID de Anaerobios
 Paneles Rápidos Fluorescentes - Fluorescencia
– Gram Negativo
– Gram Positivo
 Synergies Plus Panels – Fluorescencia y Turbidez
– Gram Negativo
– Gram Positivo
 Paneles Especializados – Turbidez
– MicroStrep Plus
– ESBL confirmatorio

60. Colorimetrica y
Turbidez
Colorimetrica
Enzimatica
Fluorescente Fluorescente y
Turbidez

61.  MIC
(Concentración
Mínima Inhibitoria)
 Concentración del
antibiótico in vitro
por método
cuantitativo.
 4 – 5 diluciones
por antibiótico
 17 – 27 ATB /panel
 BP (Breakpoint)
 Susceptibilidad in
vitro cualitativa (S,
I, ó R)
 Concentración de
antibiótico
equivalente a las
reglas CLSI -
breakpoints
 1-2 diluciones por
droga - 29-33 ATB
por panel
ANTIBIOGRAMA

62. PANEL ESβL plus
 Confirmar la producción de Beta Lactamasas de Espectro Extendido
en E. coli, Klebsiella oxytoca y Klebsiella pneumoniae.
 La inoculación con la técnica de turbidimetría o de prompt. Incubar
20-24 hrs. A 35 ± 1°C sin CO2 en incubadora externa.
 Determinación cualitativa con lectura manual de crecimiento en
pocillos como turbidez o nebulosidad en todo el pocillo.
 Interpretación del resultado (disminución 3 diluciones en Caz y
Caz/CA ó Cft y Cft/CA):
ESBL positivo ESBL negativo
Se ingresa al software
manualmente el
resultado en el apartado
de ESBL para confirmar
el resultado si es
positivo o negativo.
ESBL panel (B1027-101)

63. PANEL MICro STREP plus
 Determinar la sensibilidad de antimicrobianos para estreptococos
aerobios no enterococos (incluidos St. pneumoniae).
 Inoculación del panel (turbidimetría con tubo 0.5 de Mc Farland).
TSA con 5% de sangre de
carnero
25 ml de LHB (B1015-25)
0.5 McFarland =
0.08 ± 0.02
turbidímetro
Incubar 20-24
hrs. a 35 ± 1 °C
en una
incubadora
externa.
Se ingresa al software
manualmente el resultado
donde el crecimiento se
presenta como turbidez.
Cualquier cambio de color
en el medio no se
considera crecimiento.
Salina (B1015-12)
4-5 colonias
100 mcl
Inoculador
2 veces
MICro STREP panel
(B1027-201)

64. PANELES Synergies Plus
 Organismos Gram Negativos
Gram Positivos
 Tipos de Panel Combo, MIC sólamente, ID
 Medio de cultivo Agar Sangre para Gram Negativos
 Identificación 138 Gram negativos
 Antibióticos 31 para Gram negativos
 Tiempo de Lectura 2.5 hrs ID con base en la fluorescencia
 MIC 4.5-16 hrs, Read-When-Ready
 80% MIC en 6.5 hrs
 Método de Lectura Sistema WalkAway®
 Almacenamiento Temperatura Ambiente
 Vida de Anaquel Un año
 Reactivos Ninguno

65. ANTIBIÓTICOS EN PANELES
SYNERGIES PLUS
 Antibióticos que se liberarán
en cuanto estén listos
 Amikacina
 Ampicillina
 Ampicillina/Sulbactam*
 Ceftazidima
 Ceftriaxona
 Cefuroxima
 Ciprofloxacina
 Gatifloxacina
 Gentamicina
 Imipenem
 Levofloxacina
 Meropenem
 Moxifloxacina
 Nitrofurantoina*
 Norfloxacina
 Piperacillina/Tazobactam*
 Piperacillina*
 Tobramicina
 Trimetoprim/Sulfametoxazol
Antibióticos de incubación convencional
Amoxicillina/Clavulanato
Aztreonam
Cefazolina
Cefepime
Cefotaxime
Cefotetan
Cefoxitin
Cefalotina
Cloramfenicol
Tetraciclina
Ticarcillina
Ticarcillina/Clavulanato
* Antibióticos de incubación
convencional en algunos paneles.

66. INOCULACIÓN DE PANELES
1-Desembolsar
el Panel
2- Imprimir y pegar el
código de barras al
panel
3- Tomar la colonia 4- Un prompt para ID y
sensibilidad.
5- Vaciar suspensión
bacteriana al
inoculador
6- Preparar una
placa de pureza
7- Usar el Renok para
inocular panel
8- Cargar el panel en el
WA

67. Colorimetría, mide color de
soluciones.
Fluorometría, mide fluorescencia y
luz dispersa y reemitida en varias
direcciones.
Turbidimetría, mide luz no dispersa
a través de una solución turbia.
Dual combinacion de dos
tecnologias a la vez
Lectura
Visual sin equipo
Equipo AS-4
Equipo WA 40/96 SI
Siemens
MicroScan

70. Centro de Comando LabPro
Muestra lista de
códigos de barra de
nuevas ordenes del LIS

71. Paneles
completados
Paneles recién
cargados
Cargar Paneles
Probabilidad del organismo

72. Interpretaciones CLSI
Resultados suprimidos
del reporte
Texto de
Alerta
ordenado
por prioridadInformaciones necesárias para tomar decisiones
aparecen en la misma pantalla

73. Click +
para exibir texto
de instrucciones
de alertas

74. Código de
colores para
resultados
“Fuera de
Control”
Sumário y Edición de Resultados QC
Entrada &
información
acción correctiva &
manutención de
archivos w/QC;
apoya guias del CAP

75. LabPro: Epidemiologia
Excluir drogas no-formulário
Reporte
ordenado
por
organismo
Critério de
aislados
duplicados
definidos
por el
usuário
Reportes
de
Incidencia
Bacteriana

76.  Sistema
– Elaborado por el usuario
– Automatizado programado día y hora
 Interfaz
– Unidireccional y/o bidireccional
– Labpro – Labpro
– Labpro – Sistema del Hospital
– Labpro - Whonet
Control de Calidad MicroScan
Nacional : MINSA – INS
Internacional m: NCCLS - USA

77. Streptococcus pneumoniae
Resistente a Penicilina: Evaluación Cuantitativo
≥2,0 µg/ml
RR
<0,12 µg/ml
SS II
0,12 - 1,0 µg/ml
 Hansman & Bullen, 1967, en Australia.
 Appelbaum et al., 1977; Jacobs et al., 1978; Koornhof et al.,
1978, en África del Sur. CIM≥2,0 mg/ml de penicilina
 Resistencia se incrementa a nivel mundial, España, Africa del
Sur, Sudeste Asiático y Estados Unidos

78. VRE – Enterococo Resistente a
Vancomicina
 Resistencia intrínseca
 Resistencia a las Cefalosporinas
 “National Nosocomial Infections
Surveillance System” (1999)
– 2º en bactiremias
– 2º en infecciones urinarias

79. EQUIPOS DE APOYO
El Eddy Jet para realizar las siembras en espiral.
El uso de una micro-jeringa desechable de gran
precisión, evita la contaminación cruzada.
Instrumento óptico que utilizado con un ordenador WXp
o Vista se convierte en un potente contador de colonias.
Con un software opcional se puede utilizar para un
número ilimitado de nuevas aplicaciones.

80. EQUIPOS DE APOYO
El Spin Air es el instrumento para el muestreo
microbiológico del aire.
El diseño especial de los orificios combinado con
la lenta rotación de la cápsula permite el uso del
100% de la superficie comparado con el 5% de
la misma que emplean los aparatos fijos.
Para realizar diluciones volumétricas 1 a 10ml para
muestras microbiológicas.
También pueden realizar diluciones gravimétricas
utilizando una balanza externa. reducen la mano
de obra, ahorran tiempo y aseguran esterilidad y
precisión.

81. Coloración GRAM
Poly Stainer : automático para la
tinción de Gram.
totalmente programable
Almacena diez programas
diferentes, para definir el baño, el
tiempo de inmersión y la agitación.

84. Phoenix
 Sistema automatizado de identificación y sensibilidad
 Comunicación con el equipo por iconos.
 Capacidad de incubación de 100 paneles
 Sistema de fácil inoculación
 Control y calibración interna, no requiere mantenimiento.
 Lectura : convencional, fluoro génico y cromogénico.
 Medidas cinéticas de las reacciones: cada 20 min.
 Funcionamiento autónomo, incluyendo el sistema experto
BDXper.
 Conexión al sistema Epicenter
 Conexión al Sistema de Gestión de Laboratorio

85. Phoenix: Pantalla

86. Phoenix: Insumos
 Panel y sellador: bandeja de
poliestireno, moldeada sellada
y autoinoculante. 136 pozos:
51 ID y 85 en AST.
 Caldo Phoenix ID y AST
 Indicador Azul de Alamar
 Estación de Inoculación
 Recipiente para paneles
 Nefelómetro Crystal Spec o
BD Phoenix Spec.
 Pipeta 25 ul con micropuntas.

87. Phoenix: Insumos
 Identificación: 45 substratos:
convencionales, fluorogénicos y
cromogénicos, Carbohidratos,
fuentes de carbón o Esculina.
 Sin adición de reactivos
 5 bases de datos
 Resultados a 2,3,4, 6 y 12 hrs.
 Información de valores de
confianza y reacciones de los
substratos.
 B-Lact en la parte ID para los
paneles G+

88. Phoenix: Insumos
 Paneles para ID/AST Combo
o solo AST para 1x25:
• Gram negativos: NMIC/ID
• Gram positivos PMIC/ID
• Streptococcus SMIC/ID
• Panel de formato único:
NID,PID,PMIC,NMIC,SMIC.
 Temp. almacenamiento de
reactivos: ambiente.
 Bioseguridad: Cierre hermético
 Resultados rápidos: 80% de
los resultados de AST
completo en < de 10h.

89. Phoenix: Insumos
Sensibilidad:
 Caldo AST/AST-S 8 ml, Azul de
Alamar.
 20 a 22 antibióticos por panel.
 > de 3 diluciones por Antibiótico
 Doble diluciones
 ESBL incluido en cada panel G-
con 2 métodos de detección
 NMIC/ID, NMIC, PMIC/ID,
PMIC, SMIC/ID, SMIC.

90. Phoenix: Medios de Obtenci n de Inoculoó

91. Phoenix: Inoculaci nó
 Colonias puras, 18-
24 hr de incubación.
 Hacer escala de
McFarland 0.5 o
0.25.
 Añadir una gota del
indicador azul de
Alamar.

92. Phoenix: Inoculaci nó
 Transferir 25 ul o 50 ul
de inoculo ID al caldo
AST.
 Servir ambas
soluciones en el panel
según corresponde ID o
AST.
 Cierre el panel:
hermético.

93. Phoenix: Incubaci nó
1. Escanear el
código de barras.
2. Teclear o escanear el
numero de muestra.
3. Introducir el panel en el
Phoenix.

94. Phoenix: Control de Calidad
 Lectura de lotes
automática
 Cepas ATCC
variadas

95. Phoenix: M todo de Identificaci né ó
 Substratos: convencionales. Cromogenicos, fluoro
génicos, Esculina H.C.
 Base de datos después de 2,3,4,6, y 12 hrs. de
incubación.

96. Phoenix: M todo de an lisisé á
 Sensibilidad: Diluciones seriadas con MIC real
doble dilución: mínimo 3 dil por antibiótico.
 Lectura basada en:
– Indicador de actividad metabólica: redox
– Cambios de turbidez
 Medición cinética cada 20 min. 6 – 16 hr.
 .

97. Phoenix: Marcador de Resistencia
 Marcadores de Resistencia: tests específicos (ESBL) o
Características fenotípicas
 No se requiere de Test de confirmación adicional
 BDXpert utiliza estos marcadores para tomar acción
apropiada o hacer recomendaciones.
 Los marcadores son:
– ß-Lactamasa de Staphylococcus (Nitrocefinasa)
– MRSA (basado en Interpretacion de Oxacilina y
Cefoxitin.)
– VRE (basado en MIC Vancomicina).
– Sinergia con aminoglicosidos en Enterococcus
(Gentamicin500mcg/ml y Streptomycin1000mcg/ml)
– ESBL

99. Epi Center
Inter-conexión de Microbiología

100. EpiCenter: Informe Cl nicoí

101. EpiCenter: Estad stica y Epidemiolog aí í

102. EpiCenter: Graficos

103. EpiCenter: Cubo Dinamico.

104. DESARROLLADO PARA LA INVESTIGACIÓN ESPACIAL
TARJEDAS PEQUEÑAS-SE INCOCULA CON UN SISTEMA
DE VACÍO- ENTRE 4 Y 10 HORAS (JORNADA LABORAL)
LECTURA CADA 60 MINUTOS

105. Tecnología – Tarjeta
Trazabilidad
Unión electrónica
Por código de
Barras
Seguridad
Unidades
Selladas
Rendimiento
64 pocillos
Simplicidad
Inóculo único

106. 1 Preparación de la
Muestra
2 Entrada
código barras
3 Carga del sistema

107. 123 especies 159 especies 52 especies
Aumento de la productividad
Completo menú ID
98% de la rutina ID realizable
en una plataforma

108. Menú de antibióticos FLEXIBLE
~ 20 antibióticos por tarjeta +
Rango MIC EXPANDIDO +
Antibióticos deducidos

109. Manejo de ICONOS - Árbol de navegación

110. 1 Entrada
cassette
2 tarjetas 3 Muestra
Resultados para el médico

111. los resultados e Identificaciones precisas
API referenciaAPI referencia

112. Equipado Sistema de Expertos™
Reporte correcto de Interpretación
Alerta de mecanismos
de resistencia

113. Tiempo respuesta - 80% aislamientos
95% de la rutina bacteriana en 6 horas
Soporte a las decisiones terapéuticas
Resultados rápidos - ID
E. coli 5
K. pneumoniae 5
P. aeruginosa 6
P. mirabilis 4
E. faecalis 4
S. aureus 5
S. pneumoniae 5
S. epidermidis 6

114. Método
tradicional
6 hrs Enterobacteriaceae
18-24hrs Todos los
Microorganismos
9 hrs No-fermentadores
< 5 hrs Staph Oxa R
3 Resultados en el dia - Sensibilidad
Detección rápida de la resistencia Bacteriana
 Rápido ajuste y rotación del tratamiento
 Rápido aislamiento del paciente

115. La automatización en el aislamiento
primario :Hemocultivos
Desinfección adecuada de la zona , tiempo de espera de acción
desinfectante,punción tradicional desinfección final del septum de la botella.
Espera
2 min.
Desinfectar
septum

116. BACTERIEMIA Y FUNGEMIA
“Presencia de Bacterias y/o levaduras y/o hongos
en sangre indicando la falla del sistema inmune
del huésped para localizar la infección en su foco
primario o la falla del médico remover, drenar y/o
esterilizar aquel foco.”
“... La tasa de mortalidad está entre 20% al 50% ”

117. HEMOCULTIVOS
Síntomas de sospecha de bacteremia :
 Fiebre de origen desconocido (>
38°C) o hipotermia (<36°C)
 shock, escalofríos
 Infecciones severas (meningitis,
endocarditis, neumonia, pielonefritis,
Absceso abdominal…).
 Frecuencia cardíaca acelerada
 Alta o baja presión sanguínea
 Aumento de la frecuencia
respiratoria

118. Hemocultivos: importancia del volumen
WEINSTEIN,M.REV INF
DIS,1983
Nº DE EPISODIOS= 282
3 MUESTRAS DE 15 ml
CADA UNA
 1º= 91% POSITIV
 2º= >99% POSITIV
WASHINGTON, J.MAYO
CLIN PROC. 1975
Nº DE EPISODIOS= 80
3 MUESTRAS DE 20 ml
CADA UNA
 1º= 80% POSITIV.
 2º= 88% POSITIV
 3º= 99% POSITIV

119. Criterios de interpretación
MICROORGANISMOS QUE SIEMPRE
REPRESENTAN BACTERIEMA
S.pneumoniae, H.influenzae, N.meningitidis,
S.agalactiae, Brucella spp, M.tuberculosis,
Bacteroides spp, Fusobacterium spp,
H.capsulatum, C.neoformans, Leptospira.
MICROORGANISMOS QUE GENERALMENTE
REPRESENTAN BACTERIEMIA
S.aureus, enterobacterias, P.aeruginosa,
S.pyogenes, C.albicans

120. Criterios de interpretación
MICROORGANISMOS QUE PUEDEN SER
CONTAMINANTES O REPRESENTAR
BACTERIEMIAS VERDADERAS:
Estreptococos grupo viridans, Clostridium
spp, C.tropicalis.
MICROORGANISMOS QUE GENERALMENTE
REPRESENTAN CONTAMINACION:
SCN, Bacillus spp, Corynebacterium spp,
P.acnes, bacilos gram negativos no
fermentadores (excluyendo a P.aeruginosa)

121. Dia 1 al 15Dia 1 al 15
Paso 2Paso 2
24 – 48 hrs24 – 48 hrs
Paso 3Paso 3
24 – 72 hrs24 – 72 hrs..
Método tradicional
Se requiere un máximo de 15 días
para descartar un negativo
Subcultivo Identificación y
antibiograma

122. Tecnología Colorimétrica
• Utilización de un sensor
liquido tipo plasma.
• Membrana de silicona
impregnada al plasma de
sensibilidad
• Cambio sensitivo de CO2
diluido
• Generación de color
permanente.

123. Unidades de reflectancia
2
Uso para hemocultivos, fluídos corporales y micobacterias.
La curva de crecimiento es automáticamente
GRABADA
ANALIZADA
GUARDADA
0 1 2 3 4 5 6 7
6000
5000
4000
3000
2000
1000
0
Days t est ed
Reflect ance Unit s
1 Sust ained accelerat ion
2 Rate
3 I nitial t hreshold
1
3
2
• Algoritmos
– Independientes al tipo
de medio
monitoreado.
– Immediata
notificación de
positivos.
– Algoritmo de alto
valor inicial. (ventaja
en la entrada de
botellas demoradas).
Tecnología Colorimétrica

124. Bourbeau PP et al. Routine incubation of BacT/ALERT FA and FN
blood culture bottles for more than 3 days may not be necessary. J
Clin Microbiol. 2005;43:2506-2509
Importancia de la automatizacion
Tiempo de recuperación
 74% en Día 1
 20% en Día 2
 4% en Día 3
 2% en Día 4
 1% en Día 5
Estos resultados demuestran que el 98% de los aislamientos
clínicamente significativos fueron recuperados en los 3 primeros días
de incubación y el 94% dentro de los 2 días de incubación.

125. 1.Cockerill FR III, Wilson J.W., Vetter E.A., et al. Optimal testing
parameters for blood cultures. Clin Infect Dis. 2004 ;38 :1724-1730
Importancia de la automatizacion
Tiempo de recuperación
Estos datos sugieren que períodos de incubación extendidos
previamente recomendados para la detección de
microorganismos fastidiosos que a veces causan endocarditis,
incluyendo Brucella, Capnocytophaga y Campylobacter spp., y el
grupo HACEK (Haemophilus, Actinobacillus, Cardiobacterium,
Eikenella y Kingella spp.) no son necesarios
CUANDO SE UTILIZA SISTEMAS DE HEMOCULTIVOS
AUTOMATIZADOS DE MONITORIZACIÓN CONTINUA
99.5% de la infecciones de sistema circulatorio (no
endocarditis) y 100% de los episodios de endocarditis
fueron detectados con 5 días de incubación.

126. Impacto de la contaminación
Un hemocultivos falso positivo puede conducir a un
tratamiento antibiótico innecesario, mayor tiempo de
hospitalización y mayores costos.
Se ha estimado que cada hemocultivo contaminado
puede llevar a un aumento en:
 estadía del paciente - en 6 días en promedio,
 el tiempo de terapia antibiótica – en 3 días,
 el costo de la administración de antibióticos puede ser
de hasta US$ 4400
Barenfanger et al. Clinical and Financial Benefits of Rapid Bacterial Identification and
Antimicrobial Susceptibility Testing J. Clin. Micr, May 1999 p1415-1418

127. BACTEC 9050BACTEC 9050
Tecnología de monitoreo contínuo de la
serie BACTEC ® 9000
Sistema no invasivo
Capacidad de 50 viales
Interfase gráfica de fácil uso:
Pantalla de cristal líquido
Teclado sencillo
Lector de código de barras fijo
ajuste de la intensidad de la
alarma
formato de fecha/hora

128. El material del sensor es
una sustancia sensible a
la concentración de CO2
El sensor genera una
señal fluorescente, la cual
es detectada por el
analizador.
La fluorescencia aumenta
a medida que aumenta la
concentración de CO2
Filtro de
Detección
SENSOR
Filtro de
Excitación
LED
Photodiode
LED
CO2
Fotodiodo

129. FELIZ NAVIDAD Y PROSPERO
AÑO NUEVO

130. COSTOS DE UCI-HSR
 HOSPITALIZACION 106.00 / día
 OXIGENO 53.00 / día
 DESCARTABLE 20.00 (sondas , mascaras)
 MEDICAMENTOS 100.00 (Imipenem – asociados)
 Materiales de asepsia 40.00
 total 319.00 gasto por día
 Promedio de estancia 5 días
 Total = 1595.00
 Sin considerar análisis de control y Rx (15.00)si amerita
 Gases arteriales : 25.00 + hemograma 12.00 +
coagulación 25.00 + bioquímica 18.00
(glucosa,urea,creatinina) +hemocultivo 45.00 + otros 17
=142.00

131. Importancia de la automatización
Conclusiones
 Tratamiento inicial acertadoTratamiento inicial acertado
– Beneficios clínicosBeneficios clínicos
– Menor morbi-mortalidadMenor morbi-mortalidad
– Menor tiempo de internaciónMenor tiempo de internación
– Menor toxicidadMenor toxicidad
– Reducción de costosReducción de costos
– Beneficios epidemiológicosBeneficios epidemiológicos
 Disminuir presión de selección de cepas RDisminuir presión de selección de cepas R

133. Estudio de resistencia los antibacterianos en
el Centro Medico Naval -2000
 Escherichia coli ( R) 60% Penicilinas ,B lactamicos, ,
Cefalosporinas
 Recomendamos estudiar con detalles la resistencia de
Estafilococo aureus y tomar las medidas necesarias para
evitar su desiminacion : (R) Penicilinas y Céfalosporinas:
70%
 Necesario que el Dep. de Microbiologia realice una vigilancia
permanente de la resistencia a los antimicrobianos y la
aparición de cepas multiresistentes
 Farmacia debe realizar estudios de utilización de antibióticos
 El personal de enfermería alerta ante el problema de
resistencia y establezca medidas para evitar la diseminación
 Comité de Infecciones y la vigilancia Epidemiológica
 Uso racional de antibióticos

134.  Programa de Evaluación Externa del
Desempeño (PEED)
 Vigilancia de la Resistencia Antimicrobiana
 de bacterias patógenas asociadas a
 Enfermedades Diarreicas Agudas, Infecciones
Respiratorias Agudas e Infecciones
Intrahospitalarias
 INS - CNSP
 LRN Enteropatógenos
 LRN IRAs E IIH

137. GRACIAS
POR NO DORMIR