Automatizacion en microbiologia

1.376 visualizaciones

Publicado el

0 comentarios
0 recomendaciones
Estadísticas
Notas
  • Sé el primero en comentar

  • Sé el primero en recomendar esto

Sin descargas
Visualizaciones
Visualizaciones totales
1.376
En SlideShare
0
De insertados
0
Número de insertados
22
Acciones
Compartido
0
Descargas
62
Comentarios
0
Recomendaciones
0
Insertados 0
No insertados

No hay notas en la diapositiva.
  • Step 1 is selecting New WalkAway Orders from the Command Center.
  • Get rid of all those Post-It notes stuck to your current instrument or bench! Automate your SOP by customizing follow-up of unusual results – consistent instruction is readily accessible by clicking on the drop down box. This helps support rotating staff that may be less experienced than routine staff.
  • The system will alert you if something is out of control
    Pull up the QC isolate and you are immediately directed to the antimicrobic that is out of control
  • The Duplicate Isolate epidemiology rule is customizable. It allows you to define the number of days between samples that must elapse before the isolate is considered to be a new isolate. You can also tell the system whether it should consider the same organism from different sources as a duplicate.
    (Defined in Utilities)
    We’ve expanded the bacterial incidence report so that it can be segmented by most of the coded fields within the system.
    You are now able to exclude the antimicrobics not on formulary from the % susceptible report and the % inhibited report.
    Note: In Utilities you set the formulary for the entire system.
  • Efficiency
    3 cards to cover >95% of your routine work
    Wide data base >330 species claimed
  • Full process control from the moment cards are prepared.
    System expects test cards in predefined order in the predefined cassette.
    Waits up to one hour for cassette.
    Will not allow other no other Maintain cassette to be entered until this cassette is found:
  • BACKGROUND
    World leaders in identification products
    Transfer of API/id 32 knowledge + new substrates
    Lead to higher accuracy, faster results and better discrimination between species.
    More claims
  • Rapid Result
    90% routine bacteria in 6 hrs
    GP 2-8 hrs
    GN 2-10 hrs
    Yeast 18 hrs
  • Ensuite, le gain de temps se situe également sur les périodes d’incubation, beaucoup plus courtes sur VITEK 2.
    Pour les antibiogrammes, ces temps sont inférieurs à 5h pour les Staph Oxa R et les Entérobactéries, un peu plus long pour les non fermentants, mais dans tous les cas, beaucoup plus rapides que les méthodes traditionnelles (18h - 24h).
    Ces délais de réponse sont particulièrement intéressants pour les services chauds en terme d’adaptation des traitements ou de gestion des isolements.
  • A blood culture is a laboratory test in which blood, taken from the patient, is inoculated into bottles containing culture media to determine whether infection-causing microorganisms (bacteria or fungi) have invaded the patient’s bloodstream.
  • This study was the most recent and most complete comparison of BacT/ALERT FAN media with BACTEC 9000 Resin media, published in a scientific journal. It compared all four bottles and studied the influence of delayed entry on the sensitivity of the systems. As shown in this table, BacT/ALERT recovered significantly more Enterobacteriaceae and Total organisms. Not shown in this slide, but published in the original article is that BacT/ALERT showed no loss of sensitivity after delayed entry, while the BACTEC did.
  • These data were presented at the latest General Meeting of the American Society of Microbiology (May 2002, Salt Lake City). A FAN media pair is compared to a Bactec 9000 Resin Aerobic – Lytic Anaerobic combination. Basically, the differences were very small. Nevertheless, we were surprised to see that the difference in yeasts (in favor of BacT/ALERT) was not statistically different.
  • This study compared the BacT/ALERT and the ESP system (currently sold by Trek Diagnostics). As you can see in this table, BacT/ALERT clearly outperformed ESP.
  • Automatizacion en microbiologia

    1. 1. AUTOMATIZACION EN MICROBIOLOGIA
    2. 2. Marco Terencio V 116-27 a.C. Insectos Vectores de enfermedades Avicena 981-1037 Describe síntomas y tratamiento de gusanos Hipócrates 460 -377 a.C. Enfermedad no es mágica Enfermedad alt. Fluido Vital y miasma Girolano Fracastoro 1478-1553 Transmisibilidad de las enfermedades Poema sobre la sífilis HISTORIA : MICROBIOLOGIA ZACARIAS JANSSEN 1590-1608 Construyo Sistema de Lentes compuestos GALILEO GALILEI 1564-1609 Construyo primer Microscopio simple ANTONY VAN LEEUWENHOEK 1632 – 1723 1676,observa y Dibuja bacterias de la saliva Carta 39, 17 Sept. 1683
    3. 3. EDWARD JENNER 1749 – 1823 Padre de la Imunología 1798: Preparó la vacuna contra la viruela humana. Realizó inoculaciones a humanos utilizando pústulas de viruela vacuna y comprobó que esta práctica protegía frente a la viruela humana. 26 de Octubre 1979 la O.M.S. da por erradicada esta enfermedad del mundo LOUIS PASTEUR 1822 – 1895 Padre de la Bacteriología 1856: Fermentación por levaduras 1857: Fermentación láctica 1861: Culmino con la teoría de Generación espontánea 1866: Pasteurización 1880: Identificó agente del Cólera en la gallina. 1881: Inmuniza ovejas contra el Carbunco 1885: Vacuna contra la Rabia ROBERTO KOCH 1843 – 1910 Nóbel Fis. y Med. (1905) Las enf. infecciosas son provocadas por microorganismos y elaboro técnicas para identificar y aislar bacterias 1876: Demuestra la etiología del Carbunco o Ántrax, Bacillus anthracis 1882: “Myco. Tuberculosis” 1881: Estudio esporas y diferencias de los bacilos 1881: técnicas de laboratorio: medios de cultivo sólidos 1883: descubre el Vibrión colérico en Egipto
    4. 4. JOSEPH LISTER (1827 – 1912) 1867: Las bases de la desinfección y antisepsia en cirugía, utilizando fenol y bicloruro de mercurio en en el lavado del instrumental quirúrgico, manos y heridas de pacientes Frederich Loeffler (1852-1915)-Klebs:descubre bacilo diftérico Karl Joseph Ebert (1835-1926): el agente causal de la fiebre tifoidea Armauer Hansen (1841-1912), Lepra Albert Neisser (1855-1916), aísla el Gonococo Arthur Nicolaier ,descubre el bacilo tetanico Kitasato y Yersin ,descubren el bacilo de la peste
    5. 5. Descubrimiento de la Penicilina (1929)  Fleming, Sir Alexander.Fleming, Sir Alexander. Observó que un moho que contaminaba una de sus placas de cultivo, había destruido la bacteria cultivada en ella, llamado Penicillium notatun. Descubrimiento de la Estreptomicina (1944) Schatz y Waksman: Descubren la estreptomicina. Producida por hongo Streptomyces griseus
    6. 6. HANS C. J. GRAM (1853 – 1938) 1884, Coloración GRAM TyndallTyndall (1820-1893) ,1877 Evidencia la presencia de(1820-1893) ,1877 Evidencia la presencia de formas microbianas resistentes al calor (esporasformas microbianas resistentes al calor (esporas bacterianas).bacterianas). Schaudinn y Hoffmann 1906 ; Descubren que Treponema pallidum , causa la Sífilis Paul Ehrlich ( 1854-1919 ) ,1910 desarrolla quimioterapéutico (Salvarsán) frente a la Sífilis
    7. 7. ROBERTO GALLO ( U.S.A. ) JEAN LUC MONTANIER ( FRANCIA ) 1984: Descubren el VIH 1915-1917 , Descubren los virus bacterianos “Bacteriófagos” D’Herrelle y Twort Schönlein (1839) :Schönlein (1839) : Describe asociación de HONGOSDescribe asociación de HONGOS concon la Tiña (infección en piel)la Tiña (infección en piel)
    8. 8. 1910: Comienza la era de la Biología Molecular 1979: Se sintetiza la insulina por técnicas de ADN. 1982: Se desarrolla la vacuna contra la Hepatitis B. Watson y Crick :1953 , Proponen la estructura de la doble hélice para el ADN. 1933 el primer Microscopio Electrónico de Transmisión. 1980 el primer Microscopio Electrónico de Barrido
    9. 9. El dinámico desarrollo de la microbiología en el siglo XX-XXI Descubrimientode Agentesinfecciosos Eradela Antibioticoterapia Prevención vacunas Epidemias B-lactamicos Aminoglucosidos Macrolidos Quinolonas Genética Microbiología Bioquímica Revolucióndel Laboratorio Biología Básica Ac. nucleicos Código genético Mecanismo de síntesis proteica Automatización Microbiología En Procedimientos Uso ordenadores de gestión Microbiología En diagnostico Hibridomas Ac. monoclonales específicos PCR
    10. 10. ¿PORQUE LLEGAR A LA AUTOMATIZACION?
    11. 11. Primer Método utilizado (1966), Estandarizado 0.5 Escala Mc Farland (Turbidez-inoculo)
    12. 12. Criterios de Interpretación (R, I, y S) Los escatogramas o scatterplots Para la interpretación de CIM y disco difusión . •Los aislamientos son analizados con los métodos estándar de difusión por disco y CIM del NCCLS. La CIM y su correspondiente diámetro de zona son delineados para cada aislamiento.
    13. 13. Panel de microdilucion en Caldo - CIM La prueba de microdilucion en caldo - CIM se realiza en placas de poliestireno (0.1 ml) . Una placa contiene de 7 a 8 diluciones de 12 diferentes antibióticos Una celdilla es control (+) (caldo+inoculo) Control (-) (solo caldo) Placas para Gram negativos y Gram (+) Caldo Muller Hinton recomendable Hay paneles específicos Caldo contiene Cationes Ca ++ y Mg ++ Cada lote examinado PH después de preparado (7.2 a 7.4) y Tº 25ºc Para neumococo suplementar 2-5% sangre caballo lisado Colocar standares de control de calidad
    14. 14. Grupo N acilo Anillo Tiazolidinico Posición aminoacídica 39 42 104 164 237 238 240 265 TEM-1 Ala Glu Arg Ala Gly Glu Thr TEM-2 TEM-3 Lys Ser TEM-4 Lys Ser Met TEM-5 Ser Thr Lys TEM-6 Lys His TEM-7 Lys Ser TEM-8 Lys Lys Ser Ser TEM-9 Lys Ser Met TEM-10 Ser Lys TEM-11 Lys His TEM-12 Ser TEM-13 Lys Met TEM-14 Lys Lys Ser Met TEM-15 Lys Ser Posición aminoacídica 69 165 244 275 276 TEM-1 Met Trp Arg Arg Asn TEM-31 (IRT-1) Cys TEM-30 (IRT-2) Ser TEM-32 (IRT-3) Ile TEM-35 (IRT-4) Leu Asp TEM-33 (IRT-5) Leu TEM-34 (IRT-6) Val TEM-36 (IRT-7) Val Asp TEM-37 (IRT-8) Ile Asp TEM-38 (IRT-9) Val Leu TEM-39 (IRT-10) Leu Arg Asp TEM-40 (IRT-I67) Ile TEM-41 Thr TEM-45 (IRT-14) Leu Gln Posición aminoacídica 35 179 205 238 240 SHV-1 Leu Asp Arg Gly Glu SHV-2 Ser SHV-2a Gly Ser SHV-3 Leu Ser SHV-4 Leu Ser Lys SHV-5 Ser Lys SHV-7 Ser Lys SHV-8 Asn SHV-11 Gln SHV-12 Gln Ser
    15. 15. BLEE B- Lactamasa relacionada País de origen En especies detectadas TEM TEM1 Y TEM2 FRANCIA Enterobacterias SHV SHV 1 / LEN ALEMANIA P. Aeruginosa / BGNNF CTX-M cefotaxaminasas KLUA Kluyvera Alemania/Argentin E. coli, Salmonella OXA OXA 10 Turquía/Francia P- aeruginosa PER FRANCIA P.- aeruginosa VEB PER Vietnam/Tailandia E. Coli TLA CME-1 MEXICO E. Coli GES/IBC Guayana/ Sudafr. K. Pneumoniae y Pseudomona BES Y. Enterocolitica Brasil S. marcescens SFO AmpA S. fonticola Japon E. cloacae
    16. 16. 1 Antibiótico en sangre 2 Bacterias sensibles a los antibióticos 3 Bacteria no sensible a los antibióticos 4 Bacterias muertas por antibióticos 6 Bacteria con resistencia creciente a antibióticos 7 Bacterias muertas por antibióticos 8 Población bacteriana con resistencia creciente al antibiótico
    17. 17. GENES DE RESISTENCIA BACTERIANA: 1 Plásmido 2 Antibiótico expulsado 3 Genes de resistencia antibiótica 4 Enzima que degrada al antibiotico 5 Antibiótico que ingresa 6 Antibiótico que ingresa 7 Enzima que altera el antibiótico 8 Antibiótico que ingresa 9 Cromosoma
    18. 18. MRSA O SARM O SUPERBUG STAFILOCOCO AUREUS RESISTENTE A LA METICILINA •E.U. 300,000 contraen infecciones en hospitalizacion /año •CDC ,número de muertes 12,000 por año •UCI ,aislamiento llega a 50% (R) a Meticilina, Penicilina, Tetraciclina y Eritromicina •Factores de riesgo: prolongada hospitalización, uso múltiple de antibióticos previos,etc. •En la comunidad niños ,ancianos y portadores enf. crónicas •Endémico en Hospitales ,Neumonía ,Infecc. qx, bacteriemias. En el Perú : UCI ,Unidad de Quemados, Oncologia y Cirugía, Resistencia del 58% (500 cepas aisladas-1995) En la actualidad brotes epidémico relacionado a la colonización Del personal de salud (MINSA)
    19. 19. VISA – Resistencia Intermedia a la Vancomicina (GISA) Susceptibilidad intermedia a la Vancomicina, CIM 8-16 ug /ml y completamente Resistentes a CIM >= 32 ug /ml VISA debido al engrosamiento de la pared celular que contiene precursores capaces de ligar Vancomicina extracelularmente. La mayoría contiene mecA ,las MIC de 4 ug /ml reportadas se consideraran VISA potenciales y se recomienda repetir pruebas Descrito 1996 en Japón En EU. en pacientes con MRSA, que reciben Vancomicina por tiempo prolongado, en diálisis. VRSA : STAPHYLOCOCCUS AUREUS RESISTENTE A VANCOMICINA , 2002 EN EE.UU.
    20. 20. HOSPITAL BASE VALDIVIA 2007 RESISTENCIA DEL ESTAFILOCOCO AUREUS
    21. 21. RESISTENCIA INDUCIBLE A CLINDAMICINA  bacterias poseen gen de B- Lactamasa y se exponen un agente B-Lactàmico. Esta acción antimicrobiana en la pared celular activa mecanismo genético en cascada que inicia la producción de B-Lactamasa. la producción cesa en ausencia de antimicrobianos en la pared
    22. 22. B-Lactamasa AmpC
    23. 23. Panorama actual  La aparición cada vez más frecuente y diversa de los mecanismos de resistencia microbiana, sobre todo en bacterias patógenas facultativas y oportunistas, ha traído consecuencias importantes en términos de morbilidad y mortalidad y millonarias pérdidas humanas y económicas  Resistencia incrementada en caso de staphilococcus, streptococcus y enterococcus y bacilos Gram negativos (enterobacterias y no fermentadores)  Dificultad para predecir los patrones de resistencia en pacientes críticos  El uso de la Terapia de amplio espectro de alto costo y numerosos efectos secundarios o adversos que se presentan
    24. 24. Panorama actual  La necesidad de entrega de resultados oportunos ,evita que la terapia inicial se prolonga innecesariamente  Mortalidad : Resultado > 72 hrs. da como consecuencia el aumento de mortalidad en pacientes críticos y sobrevida disminuye 30% por cada día de retardo a entrega de resultados
    25. 25. VIGILANCIA DE LA RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS Perú 2007 -INS HOSPITAL Aislados E. Pediátricas ( R ) Aislados H. Unanue (R) ANTIBIOT. Cefazolina Clindamicina 28 53.6 % 46 87 Eritromicina 29 69 46 91.3 Gentamicina 27 59.3 38 81.6 Oxacilina 29 58.6 43 90.7 Vancomicina 29 0 36 0 STAPHYLOCOCCUS AUREUS
    26. 26. VIGILANCIA DE LA RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS Perú 2007 -INS Escherichia coli-Resistencia Hospital aislado H. Unanue aislado I.M.P aislado E. Pediátricas Antibiot Amicacina 84 2.4 % 106 8.5 % 82 4.9 % Amox.Cl 227 63.9 83 18.1 79 55.7 Cefotaxima 69 31.9 66 27.3 78 32.1 Ceftriaxona 180 30.5 115 34.8 82 32.9 Cefuroxima 71 23.9 Ciprofloxac 74 65.4 116 30.4 45 33.3 ESBL 53 98.1 31 71 82 32.9 Nitrofurant 190 7.9 102 8.4 69 1.4 Trimet- Sulf 220 65.9 95 80 80 TEM-1 de E. coli 1.8 A de resolución
    27. 27. ANTIMICROBIANOS Perú 2007 – INS Pseudomonas aeruginosa Hospital aislado 2 de Mayo aislado H. Unanue Antibiótico Amicacina 72 37.5% 73 47.9% Aztreonam 75 33.3 71 80.3% Ciprofloxacina 73 46.6% 80 65 Gentamicina 76 46.1 72 65.3% Imipenem 64 43.8 Meropenem 52 50%
    28. 28. ANTIMICROBIANOS Perú 2007 – INS Klebsiella pneumoniae Hospital aislado IMP aislado H. Unanue aislado S. Bernales Antibiótico Amicacina 56 60.7% 42 11.9 31 19.4 Amp. Clav 48 22.9 75 77.3 31(A-S) 41.9 (A-S) Aztreonam 36 80.6 B-lactamasa 42 95.2 Cefalotina 75 76 Cefazolina 31 93.5 31 58.1 Cefotaxima 36 77.8 31 45.2 Ceftriaxona 63 81.1 31 45.2 Cefuroxima 31 51.6 Ciprofloxacin 52 21.2 66 45.5 31 25.8
    29. 29. Factores de riesgo de adquirir infecciones por cepas productoras de BLEE Desnutrición Bajo peso al nacer Gravedad de la infección Duración de la estadía en el hospital y en UCI Procedimientos invasivos Receptores oncológicos
    30. 30. Reservorios y vectores Termómetros Cánulas de oxígeno Mascaras y tubos de ventiladores mecánicos Jabón líquido Insectos Gel para ecografías Trabajadores de la salud
    31. 31. Papel de la Automatización  Los sistemas automatizados acortan los tiempos porque mejoran la sensibilidad analítica de los métodos  Capaces de detectar el desarrollo bacteriano en una suspensión con y sin antimicrobianos antes que el laboratorista detecte turbidez (fundamento de los sistemas automatizados)  Metodología: colorimetría – turbidimetria -fluorometria etc.
    32. 32. ventajas Especificación Impacto clínico Rapidez en el resultado de 3 a 10 horas. Inicio o cambio precoz del antimicrobiano costos hospitalización y análisis de laboratorio ,de usos de antibióticos Estandarización y control de calidad de la reproductibilidad intra e ínter laboratorio Disminución de la carga de trabajo Requieren manos personal en métodos del MIC CONDICIONES SOBRE SU UTILIZACION
    33. 33. ventajas Especificación Disminución de errores post analíticos Evita la transcripción errónea de resultados por el uso de programas Utilización de sistemas de expertos Permite actualizar anualmente las guias de NCCLS que permite el informe selectivo de los antimicrobianos. Monitorizar resultados inconsistentes
    34. 34. ventajas Especificación Patrones fenotipitos de resistencia Permite sospechar la presencia de B lactamasas de espectro extendido y cefalosporinas Facilita las estadísticas Almacenar y procesar información para una análisis de tendencias anuales de susceptibilidad Facilita el control en el uso de antimicrobianos Informe de resultados en línea con el comité farmacológico
    35. 35. desventajas Especificaciones Alto costo (3 veces mayor Que los manuales) El equipamiento y los insumos (paneles o tarjetas) - “tarifas diferenciadas o “uso para hospitalización y críticos” Requieren método de respaldo Frente a cualquier falla se necesita un back up o metodología manual de respaldo No existen normas NCCLS para sistemas automatizados, no aplicables a todas las bacterias Sin embargo se deben considerar los métodos empleados (puntos de corte o MIC)
    36. 36. desventajas Especificaciones Poca flexibilidad en los antimicrobianos ensayados Paneles o tarjetas están determinadas por el fabricante. Existen tarjetas especiales pero requiere consumo mínimo
    37. 37. desventajas Especificaciones Discrepancia con métodos convencionales de referencia Problemas: Haemophilus Influenza Neumococos, Gram (-) no fermentadores, y Anaerobios . Cefepime y Pseudomonas Vancomicina (I) en el caso de Enterococcus Imipenem ,falsa (R) o (S) con Pseudomona y Acinetobacter baumanii .
    38. 38. desventajas Especificaciones Discrepancia con métodos convencionales de referencia Problemas: B lactamasa en algunos Gram negativos requieren prolongada incubación para expresar ( R ) FDA recomienda para errores mayores (sistema informe R siendo (S) ,la tasa no > 1.5% ,la concordancia sea 90% , fallas de crecimiento =< 10%
    39. 39. SISTEMAS AUTOMATIZADOS  Diferentes grados de automatización  Métodos Calorimétricos, Turbidimetricos , Fluorescencia  Lectura a tiempos determinados  Lectores muy sensibles al crecimiento aumentan la velocidad de entrega de los resultados
    40. 40. Componentes Tecnológicos  Panel o tarjeta de Trabajo  Software Microbiológico Control de Calidad Cepas ATCC Motor de Base de Datos Estadístico y Epidemiológico Normas de la CLSI (antes NCCLS) Comunicación (Interfaz)
    41. 41. Biomeriux Vitek Siemens MicroScan Becton Dickinson BDPhoenix
    42. 42. Panel o Tarjeta de Trabajo Biomeriux Vitek Siemens MicroScan Becton Dickinson BDPhoenix
    43. 43. Caracteristicas de Paneles MICRO Scan Identificación solamente Sensibilidad solamente (BP o MIC) Combo (ID+ATB)
    44. 44. Tecnología del Panel  Paneles Convencionales – Colorimetrica y Turbidez – Gram Negativo / Gram Positivo  Paneles Cromogénicos – Colorimetrica Enzimatica  Identificación en 4 hrs – ID de Levaduras – HNID (Haemophilus, Neisseria, Moraxella y Gardnerella) – ID de Anaerobios  Paneles Rápidos Fluorescentes - Fluorescencia – Gram Negativo – Gram Positivo  Synergies Plus Panels – Fluorescencia y Turbidez – Gram Negativo – Gram Positivo  Paneles Especializados – Turbidez – MicroStrep Plus – ESBL confirmatorio
    45. 45. Colorimetrica y Turbidez Colorimetrica Enzimatica Fluorescente Fluorescente y Turbidez
    46. 46.  MIC (Concentración Mínima Inhibitoria)  Concentración del antibiótico in vitro por método cuantitativo.  4 – 5 diluciones por antibiótico  17 – 27 ATB /panel  BP (Breakpoint)  Susceptibilidad in vitro cualitativa (S, I, ó R)  Concentración de antibiótico equivalente a las reglas CLSI - breakpoints  1-2 diluciones por droga - 29-33 ATB por panel ANTIBIOGRAMA
    47. 47. PANEL ESβL plus  Confirmar la producción de Beta Lactamasas de Espectro Extendido en E. coli, Klebsiella oxytoca y Klebsiella pneumoniae.  La inoculación con la técnica de turbidimetría o de prompt. Incubar 20-24 hrs. A 35 ± 1°C sin CO2 en incubadora externa.  Determinación cualitativa con lectura manual de crecimiento en pocillos como turbidez o nebulosidad en todo el pocillo.  Interpretación del resultado (disminución 3 diluciones en Caz y Caz/CA ó Cft y Cft/CA): ESBL positivo ESBL negativo Se ingresa al software manualmente el resultado en el apartado de ESBL para confirmar el resultado si es positivo o negativo. ESBL panel (B1027-101)
    48. 48. PANEL MICro STREP plus  Determinar la sensibilidad de antimicrobianos para estreptococos aerobios no enterococos (incluidos St. pneumoniae).  Inoculación del panel (turbidimetría con tubo 0.5 de Mc Farland). TSA con 5% de sangre de carnero 25 ml de LHB (B1015-25) 0.5 McFarland = 0.08 ± 0.02 turbidímetro Incubar 20-24 hrs. a 35 ± 1 °C en una incubadora externa. Se ingresa al software manualmente el resultado donde el crecimiento se presenta como turbidez. Cualquier cambio de color en el medio no se considera crecimiento. Salina (B1015-12) 4-5 colonias 100 mcl Inoculador 2 veces MICro STREP panel (B1027-201)
    49. 49. PANELES Synergies Plus  Organismos Gram Negativos Gram Positivos  Tipos de Panel Combo, MIC sólamente, ID  Medio de cultivo Agar Sangre para Gram Negativos  Identificación 138 Gram negativos  Antibióticos 31 para Gram negativos  Tiempo de Lectura 2.5 hrs ID con base en la fluorescencia  MIC 4.5-16 hrs, Read-When-Ready  80% MIC en 6.5 hrs  Método de Lectura Sistema WalkAway®  Almacenamiento Temperatura Ambiente  Vida de Anaquel Un año  Reactivos Ninguno
    50. 50. ANTIBIÓTICOS EN PANELES SYNERGIES PLUS  Antibióticos que se liberarán en cuanto estén listos  Amikacina  Ampicillina  Ampicillina/Sulbactam*  Ceftazidima  Ceftriaxona  Cefuroxima  Ciprofloxacina  Gatifloxacina  Gentamicina  Imipenem  Levofloxacina  Meropenem  Moxifloxacina  Nitrofurantoina*  Norfloxacina  Piperacillina/Tazobactam*  Piperacillina*  Tobramicina  Trimetoprim/Sulfametoxazol Antibióticos de incubación convencional Amoxicillina/Clavulanato Aztreonam Cefazolina Cefepime Cefotaxime Cefotetan Cefoxitin Cefalotina Cloramfenicol Tetraciclina Ticarcillina Ticarcillina/Clavulanato * Antibióticos de incubación convencional en algunos paneles.
    51. 51. INOCULACIÓN DE PANELES 1-Desembolsar el Panel 2- Imprimir y pegar el código de barras al panel 3- Tomar la colonia 4- Un prompt para ID y sensibilidad. 5- Vaciar suspensión bacteriana al inoculador 6- Preparar una placa de pureza 7- Usar el Renok para inocular panel 8- Cargar el panel en el WA
    52. 52. Colorimetría, mide color de soluciones. Fluorometría, mide fluorescencia y luz dispersa y reemitida en varias direcciones. Turbidimetría, mide luz no dispersa a través de una solución turbia. Dual combinacion de dos tecnologias a la vez Lectura Visual sin equipo Equipo AS-4 Equipo WA 40/96 SI Siemens MicroScan
    53. 53. Centro de Comando LabPro Muestra lista de códigos de barra de nuevas ordenes del LIS
    54. 54. Paneles completados Paneles recién cargados Cargar Paneles Probabilidad del organismo
    55. 55. Interpretaciones CLSI Resultados suprimidos del reporte Texto de Alerta ordenado por prioridadInformaciones necesárias para tomar decisiones aparecen en la misma pantalla
    56. 56. Click + para exibir texto de instrucciones de alertas
    57. 57. Código de colores para resultados “Fuera de Control” Sumário y Edición de Resultados QC Entrada & información acción correctiva & manutención de archivos w/QC; apoya guias del CAP
    58. 58. LabPro: Epidemiologia Excluir drogas no-formulário Reporte ordenado por organismo Critério de aislados duplicados definidos por el usuário Reportes de Incidencia Bacteriana
    59. 59.  Sistema – Elaborado por el usuario – Automatizado programado día y hora  Interfaz – Unidireccional y/o bidireccional – Labpro – Labpro – Labpro – Sistema del Hospital – Labpro - Whonet Control de Calidad MicroScan Nacional : MINSA – INS Internacional m: NCCLS - USA
    60. 60. Streptococcus pneumoniae Resistente a Penicilina: Evaluación Cuantitativo ≥2,0 µg/ml RR <0,12 µg/ml SS II 0,12 - 1,0 µg/ml  Hansman & Bullen, 1967, en Australia.  Appelbaum et al., 1977; Jacobs et al., 1978; Koornhof et al., 1978, en África del Sur. CIM≥2,0 mg/ml de penicilina  Resistencia se incrementa a nivel mundial, España, Africa del Sur, Sudeste Asiático y Estados Unidos
    61. 61. VRE – Enterococo Resistente a Vancomicina  Resistencia intrínseca  Resistencia a las Cefalosporinas  “National Nosocomial Infections Surveillance System” (1999) – 2º en bactiremias – 2º en infecciones urinarias
    62. 62. EQUIPOS DE APOYO El Eddy Jet para realizar las siembras en espiral. El uso de una micro-jeringa desechable de gran precisión, evita la contaminación cruzada. Instrumento óptico que utilizado con un ordenador WXp o Vista se convierte en un potente contador de colonias. Con un software opcional se puede utilizar para un número ilimitado de nuevas aplicaciones.
    63. 63. EQUIPOS DE APOYO El Spin Air es el instrumento para el muestreo microbiológico del aire. El diseño especial de los orificios combinado con la lenta rotación de la cápsula permite el uso del 100% de la superficie comparado con el 5% de la misma que emplean los aparatos fijos. Para realizar diluciones volumétricas 1 a 10ml para muestras microbiológicas. También pueden realizar diluciones gravimétricas utilizando una balanza externa. reducen la mano de obra, ahorran tiempo y aseguran esterilidad y precisión.
    64. 64. Coloración GRAM Poly Stainer : automático para la tinción de Gram. totalmente programable Almacena diez programas diferentes, para definir el baño, el tiempo de inmersión y la agitación.
    65. 65. Phoenix  Sistema automatizado de identificación y sensibilidad  Comunicación con el equipo por iconos.  Capacidad de incubación de 100 paneles  Sistema de fácil inoculación  Control y calibración interna, no requiere mantenimiento.  Lectura : convencional, fluoro génico y cromogénico.  Medidas cinéticas de las reacciones: cada 20 min.  Funcionamiento autónomo, incluyendo el sistema experto BDXper.  Conexión al sistema Epicenter  Conexión al Sistema de Gestión de Laboratorio
    66. 66. Phoenix: Pantalla
    67. 67. Phoenix: Insumos  Panel y sellador: bandeja de poliestireno, moldeada sellada y autoinoculante. 136 pozos: 51 ID y 85 en AST.  Caldo Phoenix ID y AST  Indicador Azul de Alamar  Estación de Inoculación  Recipiente para paneles  Nefelómetro Crystal Spec o BD Phoenix Spec.  Pipeta 25 ul con micropuntas.
    68. 68. Phoenix: Insumos  Identificación: 45 substratos: convencionales, fluorogénicos y cromogénicos, Carbohidratos, fuentes de carbón o Esculina.  Sin adición de reactivos  5 bases de datos  Resultados a 2,3,4, 6 y 12 hrs.  Información de valores de confianza y reacciones de los substratos.  B-Lact en la parte ID para los paneles G+
    69. 69. Phoenix: Insumos  Paneles para ID/AST Combo o solo AST para 1x25: • Gram negativos: NMIC/ID • Gram positivos PMIC/ID • Streptococcus SMIC/ID • Panel de formato único: NID,PID,PMIC,NMIC,SMIC.  Temp. almacenamiento de reactivos: ambiente.  Bioseguridad: Cierre hermético  Resultados rápidos: 80% de los resultados de AST completo en < de 10h.
    70. 70. Phoenix: Insumos Sensibilidad:  Caldo AST/AST-S 8 ml, Azul de Alamar.  20 a 22 antibióticos por panel.  > de 3 diluciones por Antibiótico  Doble diluciones  ESBL incluido en cada panel G- con 2 métodos de detección  NMIC/ID, NMIC, PMIC/ID, PMIC, SMIC/ID, SMIC.
    71. 71. Phoenix: Medios de Obtenci n de Inoculoó
    72. 72. Phoenix: Inoculaci nó  Colonias puras, 18- 24 hr de incubación.  Hacer escala de McFarland 0.5 o 0.25.  Añadir una gota del indicador azul de Alamar.
    73. 73. Phoenix: Inoculaci nó  Transferir 25 ul o 50 ul de inoculo ID al caldo AST.  Servir ambas soluciones en el panel según corresponde ID o AST.  Cierre el panel: hermético.
    74. 74. Phoenix: Incubaci nó 1. Escanear el código de barras. 2. Teclear o escanear el numero de muestra. 3. Introducir el panel en el Phoenix.
    75. 75. Phoenix: Control de Calidad  Lectura de lotes automática  Cepas ATCC variadas
    76. 76. Phoenix: M todo de Identificaci né ó  Substratos: convencionales. Cromogenicos, fluoro génicos, Esculina H.C.  Base de datos después de 2,3,4,6, y 12 hrs. de incubación.
    77. 77. Phoenix: M todo de an lisisé á  Sensibilidad: Diluciones seriadas con MIC real doble dilución: mínimo 3 dil por antibiótico.  Lectura basada en: – Indicador de actividad metabólica: redox – Cambios de turbidez  Medición cinética cada 20 min. 6 – 16 hr.  .
    78. 78. Phoenix: Marcador de Resistencia  Marcadores de Resistencia: tests específicos (ESBL) o Características fenotípicas  No se requiere de Test de confirmación adicional  BDXpert utiliza estos marcadores para tomar acción apropiada o hacer recomendaciones.  Los marcadores son: – ß-Lactamasa de Staphylococcus (Nitrocefinasa) – MRSA (basado en Interpretacion de Oxacilina y Cefoxitin.) – VRE (basado en MIC Vancomicina). – Sinergia con aminoglicosidos en Enterococcus (Gentamicin500mcg/ml y Streptomycin1000mcg/ml) – ESBL
    79. 79. Epi Center Inter-conexión de Microbiología
    80. 80. EpiCenter: Informe Cl nicoí
    81. 81. EpiCenter: Estad stica y Epidemiolog aí í
    82. 82. EpiCenter: Graficos
    83. 83. EpiCenter: Cubo Dinamico.
    84. 84. DESARROLLADO PARA LA INVESTIGACIÓN ESPACIAL TARJEDAS PEQUEÑAS-SE INCOCULA CON UN SISTEMA DE VACÍO- ENTRE 4 Y 10 HORAS (JORNADA LABORAL) LECTURA CADA 60 MINUTOS
    85. 85. Tecnología – Tarjeta Trazabilidad Unión electrónica Por código de Barras Seguridad Unidades Selladas Rendimiento 64 pocillos Simplicidad Inóculo único
    86. 86. 1 Preparación de la Muestra 2 Entrada código barras 3 Carga del sistema
    87. 87. 123 especies 159 especies 52 especies Aumento de la productividad Completo menú ID 98% de la rutina ID realizable en una plataforma
    88. 88. Menú de antibióticos FLEXIBLE ~ 20 antibióticos por tarjeta + Rango MIC EXPANDIDO + Antibióticos deducidos
    89. 89. Manejo de ICONOS - Árbol de navegación
    90. 90. 1 Entrada cassette 2 tarjetas 3 Muestra Resultados para el médico
    91. 91. los resultados e Identificaciones precisas API referenciaAPI referencia
    92. 92. Equipado Sistema de Expertos™ Reporte correcto de Interpretación Alerta de mecanismos de resistencia
    93. 93. Tiempo respuesta - 80% aislamientos 95% de la rutina bacteriana en 6 horas Soporte a las decisiones terapéuticas Resultados rápidos - ID E. coli 5 K. pneumoniae 5 P. aeruginosa 6 P. mirabilis 4 E. faecalis 4 S. aureus 5 S. pneumoniae 5 S. epidermidis 6
    94. 94. Método tradicional 6 hrs Enterobacteriaceae 18-24hrs Todos los Microorganismos 9 hrs No-fermentadores < 5 hrs Staph Oxa R 3 Resultados en el dia - Sensibilidad Detección rápida de la resistencia Bacteriana  Rápido ajuste y rotación del tratamiento  Rápido aislamiento del paciente
    95. 95. La automatización en el aislamiento primario :Hemocultivos Desinfección adecuada de la zona , tiempo de espera de acción desinfectante,punción tradicional desinfección final del septum de la botella. Espera 2 min. Desinfectar septum
    96. 96. BACTERIEMIA Y FUNGEMIA “Presencia de Bacterias y/o levaduras y/o hongos en sangre indicando la falla del sistema inmune del huésped para localizar la infección en su foco primario o la falla del médico remover, drenar y/o esterilizar aquel foco.” “... La tasa de mortalidad está entre 20% al 50% ”
    97. 97. HEMOCULTIVOS Síntomas de sospecha de bacteremia :  Fiebre de origen desconocido (> 38°C) o hipotermia (<36°C)  shock, escalofríos  Infecciones severas (meningitis, endocarditis, neumonia, pielonefritis, Absceso abdominal…).  Frecuencia cardíaca acelerada  Alta o baja presión sanguínea  Aumento de la frecuencia respiratoria
    98. 98. Hemocultivos: importancia del volumen WEINSTEIN,M.REV INF DIS,1983 Nº DE EPISODIOS= 282 3 MUESTRAS DE 15 ml CADA UNA  1º= 91% POSITIV  2º= >99% POSITIV WASHINGTON, J.MAYO CLIN PROC. 1975 Nº DE EPISODIOS= 80 3 MUESTRAS DE 20 ml CADA UNA  1º= 80% POSITIV.  2º= 88% POSITIV  3º= 99% POSITIV
    99. 99. Criterios de interpretación MICROORGANISMOS QUE SIEMPRE REPRESENTAN BACTERIEMA S.pneumoniae, H.influenzae, N.meningitidis, S.agalactiae, Brucella spp, M.tuberculosis, Bacteroides spp, Fusobacterium spp, H.capsulatum, C.neoformans, Leptospira. MICROORGANISMOS QUE GENERALMENTE REPRESENTAN BACTERIEMIA S.aureus, enterobacterias, P.aeruginosa, S.pyogenes, C.albicans
    100. 100. Criterios de interpretación MICROORGANISMOS QUE PUEDEN SER CONTAMINANTES O REPRESENTAR BACTERIEMIAS VERDADERAS: Estreptococos grupo viridans, Clostridium spp, C.tropicalis. MICROORGANISMOS QUE GENERALMENTE REPRESENTAN CONTAMINACION: SCN, Bacillus spp, Corynebacterium spp, P.acnes, bacilos gram negativos no fermentadores (excluyendo a P.aeruginosa)
    101. 101. Dia 1 al 15Dia 1 al 15 Paso 2Paso 2 24 – 48 hrs24 – 48 hrs Paso 3Paso 3 24 – 72 hrs24 – 72 hrs.. Método tradicional Se requiere un máximo de 15 días para descartar un negativo Subcultivo Identificación y antibiograma
    102. 102. Tecnología Colorimétrica • Utilización de un sensor liquido tipo plasma. • Membrana de silicona impregnada al plasma de sensibilidad • Cambio sensitivo de CO2 diluido • Generación de color permanente.
    103. 103. Unidades de reflectancia 2 Uso para hemocultivos, fluídos corporales y micobacterias. La curva de crecimiento es automáticamente GRABADA ANALIZADA GUARDADA 0 1 2 3 4 5 6 7 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 Days t est ed Reflect ance Unit s 1 Sust ained accelerat ion 2 Rate 3 I nitial t hreshold 1 3 2 • Algoritmos – Independientes al tipo de medio monitoreado. – Immediata notificación de positivos. – Algoritmo de alto valor inicial. (ventaja en la entrada de botellas demoradas). Tecnología Colorimétrica
    104. 104. Bourbeau PP et al. Routine incubation of BacT/ALERT FA and FN blood culture bottles for more than 3 days may not be necessary. J Clin Microbiol. 2005;43:2506-2509 Importancia de la automatizacion Tiempo de recuperación  74% en Día 1  20% en Día 2  4% en Día 3  2% en Día 4  1% en Día 5 Estos resultados demuestran que el 98% de los aislamientos clínicamente significativos fueron recuperados en los 3 primeros días de incubación y el 94% dentro de los 2 días de incubación.
    105. 105. 1.Cockerill FR III, Wilson J.W., Vetter E.A., et al. Optimal testing parameters for blood cultures. Clin Infect Dis. 2004 ;38 :1724-1730 Importancia de la automatizacion Tiempo de recuperación Estos datos sugieren que períodos de incubación extendidos previamente recomendados para la detección de microorganismos fastidiosos que a veces causan endocarditis, incluyendo Brucella, Capnocytophaga y Campylobacter spp., y el grupo HACEK (Haemophilus, Actinobacillus, Cardiobacterium, Eikenella y Kingella spp.) no son necesarios CUANDO SE UTILIZA SISTEMAS DE HEMOCULTIVOS AUTOMATIZADOS DE MONITORIZACIÓN CONTINUA 99.5% de la infecciones de sistema circulatorio (no endocarditis) y 100% de los episodios de endocarditis fueron detectados con 5 días de incubación.
    106. 106. Impacto de la contaminación Un hemocultivos falso positivo puede conducir a un tratamiento antibiótico innecesario, mayor tiempo de hospitalización y mayores costos. Se ha estimado que cada hemocultivo contaminado puede llevar a un aumento en:  estadía del paciente - en 6 días en promedio,  el tiempo de terapia antibiótica – en 3 días,  el costo de la administración de antibióticos puede ser de hasta US$ 4400 Barenfanger et al. Clinical and Financial Benefits of Rapid Bacterial Identification and Antimicrobial Susceptibility Testing J. Clin. Micr, May 1999 p1415-1418
    107. 107. BACTEC 9050BACTEC 9050 Tecnología de monitoreo contínuo de la serie BACTEC ® 9000 Sistema no invasivo Capacidad de 50 viales Interfase gráfica de fácil uso: Pantalla de cristal líquido Teclado sencillo Lector de código de barras fijo ajuste de la intensidad de la alarma formato de fecha/hora
    108. 108. El material del sensor es una sustancia sensible a la concentración de CO2 El sensor genera una señal fluorescente, la cual es detectada por el analizador. La fluorescencia aumenta a medida que aumenta la concentración de CO2 Filtro de Detección SENSOR Filtro de Excitación LED Photodiode LED CO2 Fotodiodo
    109. 109. FELIZ NAVIDAD Y PROSPERO AÑO NUEVO
    110. 110. COSTOS DE UCI-HSR  HOSPITALIZACION 106.00 / día  OXIGENO 53.00 / día  DESCARTABLE 20.00 (sondas , mascaras)  MEDICAMENTOS 100.00 (Imipenem – asociados)  Materiales de asepsia 40.00  total 319.00 gasto por día  Promedio de estancia 5 días  Total = 1595.00  Sin considerar análisis de control y Rx (15.00)si amerita  Gases arteriales : 25.00 + hemograma 12.00 + coagulación 25.00 + bioquímica 18.00 (glucosa,urea,creatinina) +hemocultivo 45.00 + otros 17 =142.00
    111. 111. Importancia de la automatización Conclusiones  Tratamiento inicial acertadoTratamiento inicial acertado – Beneficios clínicosBeneficios clínicos – Menor morbi-mortalidadMenor morbi-mortalidad – Menor tiempo de internaciónMenor tiempo de internación – Menor toxicidadMenor toxicidad – Reducción de costosReducción de costos – Beneficios epidemiológicosBeneficios epidemiológicos  Disminuir presión de selección de cepas RDisminuir presión de selección de cepas R
    112. 112. Estudio de resistencia los antibacterianos en el Centro Medico Naval -2000  Escherichia coli ( R) 60% Penicilinas ,B lactamicos, , Cefalosporinas  Recomendamos estudiar con detalles la resistencia de Estafilococo aureus y tomar las medidas necesarias para evitar su desiminacion : (R) Penicilinas y Céfalosporinas: 70%  Necesario que el Dep. de Microbiologia realice una vigilancia permanente de la resistencia a los antimicrobianos y la aparición de cepas multiresistentes  Farmacia debe realizar estudios de utilización de antibióticos  El personal de enfermería alerta ante el problema de resistencia y establezca medidas para evitar la diseminación  Comité de Infecciones y la vigilancia Epidemiológica  Uso racional de antibióticos
    113. 113.  Programa de Evaluación Externa del Desempeño (PEED)  Vigilancia de la Resistencia Antimicrobiana  de bacterias patógenas asociadas a  Enfermedades Diarreicas Agudas, Infecciones Respiratorias Agudas e Infecciones Intrahospitalarias  INS - CNSP  LRN Enteropatógenos  LRN IRAs E IIH
    114. 114. GRACIAS POR NO DORMIR

    ×