Bacteriología

1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE
NICARAGUA.
UNAN-MANAGUA.
Presentado por : Lic. Magaly Ruiz
Bioanalista Clínico /Docente Horario
UNAN-Managua.
FUNDAMENTOS BÁSICOS DEL AREA DE BACTERIOLOGÍA DEL HOSPITAL SOLIDARIDAD.

2. TEMAS A EXPONER
1 GENERALIDADES DE LAS BACTERIAS.
2 UROCULTIVO.
3 CULTIVOS DE SECRECIÓN.
4 CULTIVO OTICO
5 HEMOCULTIVO
6
CULTIVO FARÍNGEO.
7 HISOPADO RECTAL.
8 LÍQUIDOS CORPORALES
9
PUNTA DE CATÉTER
10 CULTIVO URETRAL.

3. ¿Qué son las
bacterias ?
Son simples y no
tienen núcleo definido:
su material genético
(como el ADN) está
libre en el citoplasma,
es decir, el material
que está dentro de la
membrana plasmática
en la célula
 Las bacterias son microorganismos unicelulares.
 Se reproducen por fisión binaria. La mayoría son
de vida libre, a excepción de algunas que son de
vida intracelular obligada, como Chlamydias y
Rickettsias.
 Las bacterias integran el reino procariota (pro de
primitivo y cariota de núcleo).
 Como característica principal, los procariotas no
poseen compartimientos intracelulares
delimitados por membranas, por lo que carecen de
membrana nuclear, a diferencia de los eucariotas.
 Las procariotas se reproducen por división simple
(forma asexuada).
 Pueden poseer flagelos.
 El tamaño de las bacterias oscila entre las 0.5 y 3
µm.

4. Infección de vías urinarias
 El término IVU define la presencia de
microorganismos en las vías urinarias, siendo las
patologías más frecuentes cistitis (infección de la
vejiga) y pielonefritis (infección del riñón y su pelvis).
 Las IVU son de las enfermedades más frecuentes,
en particular en mujeres.
 Su prevalencia es dependiente de la edad y el
género. Casi 1% de los niños, muchos con
anomalías funcionales o anatómicas del aparato
urinario, presenta infección durante el período
neonatal.
 Se calcula que 20% o más de
la población femenina sufre
alguna forma de ITU en su
vida.
 La infección en la población
masculina es rara no muy
frecuente, ejemplo : cuando
el crecimiento de la próstata
empieza a obstaculizar el
vaciamiento de la vejiga.

5. MICROORGANISMO PARTES DE LA MICROBIOTA
DE LOS GENITALES Y DE LA URETRA.
 Estafilococos coagulasa negativa.
 Enterobacterias: Escherichia sp, Proteus
sp., Klebsiella sp, Enterobacter sp.
 Levaduras y Streptococcus sp.
 Escherichia coli (85%
aproximadamente), Proteus sp.
(especialmente Proteus mirabillis),
Klebsiella pneumoniae,
Enterococcus sp., Enterobacter sp.
 Pseudomonas sp., Serratia y
Acinetobacter generalmente en
pacientes hospitalizados con
sondas permanentes o con otra
patología de base.
 Levaduras, Staphylococcus
saprophyticus (generalmente en
mujeres en edad reproductiva).
Agentes productores de IVU
Nota: EGO patológico.
Paciente inmunodeprimido.
Px. diabético.
Px oncológico
Px Hospitalizado.

6. UROCULTIVO
RECOMENDACIONES.
Mujeres: Higienizar la zona genital con agua y jabón.
Secado de adelante hacia atrás, secarse con toalla
limpia.
Hombres: se debe retraer el prepucio e higienizar el
glande con agua y jabón.
Sin terapia antimicrobiana por lo mensos tres días
antes de la toma de muestra.
 La muestra para urocultivo debe
refrigerarse a 4 – 8 ºC inmediatamente
después de recolectada.
 Si el traslado al laboratorio demora
más de 15 minutos, debe colocarse el
recipiente con la orina dentro de un
contenedor con hielo.
La muestra de elección : es el chorro medio
miccional, entre 15 a 30 ml. El tiempo de
retención deseado es por lo menos 3 o 4 horas,
siendo la muestra más representativa la primera
orina de la mañana.

7. Enterobacterias.
No fermentadores.
*Gram positivos.
Gran Negativos.
Interpretación de Resultados.
Incubar en Aerobiosis
(Mck) durante 18- 24
horas.
Incubar en Aerobiosis
(ASC 5 %.
1. Todo cultivo puro (un solo tipo de bacteria)
con recuento mayor de 20,000 UFC x mL
(unidades formadoras de colonias por
mililitro de orina).
Una muestra se manda a repetir:
1. Todo cultivo en el que el recuento sea mayor
de 20,000 UFC x mL con más de una bacteria.
2. En caso que el recuento sea menor de 20,000
UFC X mL con una o más bacterias.
Lectura : contando el total de UFC y
multiplicarlas por el factor de dilución (1000)
Asa utilizada :
(las asas de platino utilizadas están calibradas
para tomar un volumen de 0.001 mL, o sea la
milésima parte de 1 mL, por lo tanto el factor
de dilución es 1000).

8. CULTIVO DE SECRECIÓN DE
HERIDAS.
1. Retirar la costra o pústulas en la piel con un bisturí y pinzas estériles,
previa limpieza con agua destilada o solución salina estéril, para
remover ésta con mayor facilidad.
2. En heridas, primero se debe realizar una limpieza en la superficie con
el propósito de remover la suciedad o tejido muerto.
3. Si en el interior de la herida hay pus, debe removerse haciendo uso de
hisopos o torundas de gasa estériles. El pus no es un material
apropiado para el cultivo por contener células vegetativas bacterianas
muertas o predominantemente semidestruídas.
4. Una vez removido el pus, la muestra debe tomarse con un hisopo
estéril, frotando vigorosa pero gentilmente las paredes de la herida, o
cavidad.
Toma de Muestra.
Esto tiene el propósito que las enzimas líticas y autolíticas
contenidas en el pus disminuyan su acción destructiva contra
las bacterias.

9. CULTIVO OTICO.
OTITIS EXTERNA:
1. Hacer una ligera tracción hacia arriba y atrás del
pabellón de la oreja e introducir un hisopo de algodón
estéril rotándolo suavemente.
2. Tome dos muestras. Una muestra servirá para realizar
un frotis y posterior tinción de Gram y la otra para el
cultivo.
3. En caso no de sembrar la muestra inmediatamente
introduzca el hisopo en un medio de transporte de
AMIES y transpórtela a temperatura ambiente.
4. Tome una nueva muestra con otro hisopo y realice un
frotis en una lámina portaobjeto

10. OTITIS MEDIA:
El oído medio es estéril. Cuando ocurre una infección a
este nivel, la muestra debe ser tomada por el médico, pues
requiere de la punción del tímpano (miringostomía).
Cualquier germen aislado de esta muestra debe ser
completamente identificado y reportado. El tipo de
microorganismo varía con la edad, pero usualmente se
encuentran los siguientes.

11. o Agar Sangre
o Agar Mac Conkey
o Agar Chocolate (*)
o Agar Sabouraud con Cloranfenicol (**)
o (*) Sólo en caso de cultivo de oído medio.
o (**) Sólo si observa levaduras sin seudohifas en
el frotis.
Medios de cultivo:
MICROORGANISMOS .
 Haemophilus influenzae:
 Streptococcus pyogenes
 Staphylococcus aureus.
 Enterobacterias
 Bacilos No Fermentadores
 Cándida spp
Siempre realizar su
respectivo Gram.

12. HEMOCULTIVOS
 La sangre para hemocultivos se obtiene de los pacientes
durante el período febril y antes de iniciar el tratamiento
con antimicrobianos.
 Lavarse las manos y usar guantes estériles. Para extraer
la muestra realizar limpieza y antisepsia de la piel primero
con alcohol iodado al 2% y seguidamente con alcohol al
70%.
 Extraer la sangre con jeringa estéril de manera que
obtengamos una relación 1/10 entre la sangre y el medio
de cultivo.
 En adultos 4-5-7 mL de sangre en frascos de 40-50-70mL
respectivamente.
 En niños 2-2.5mL de sangre en frascos de 20-25mL
respectivamente.
 Para neonatos existe una presentación de caldo con 9mL
al cual se adiciona 1 mL de sangre.
Obtención de la muestra

13.  En general, de los microorganismos involucrados, las bacterias
gramnegativas, ocupan el primer lugar, representadas por las
enterobacterias, seguidas de especies de estafilococos (S,aureus
resistente a la meticilina y Staphylococcus coagulasa negativa),
enterococos y especies de Candida. Ocasionalmente pueden
presentarse micobacterias, ricketsias y virus como agentes
etiológicos.
 Mundialmente, la septicemia bacteriana nosocomial constituye una
de las enfermedades infecciosas más graves ya que su mortalidad
oscila entre el 40 y el 60% de los casos.
 En el caso de las bacteremias y septicemias es necesario el cultivo
de sangre así como en las infecciones endovasculares el cultivo de
la punta de catéter para el diagnóstico microbiológico de los
mismos.

14. BACT / ALERT Los medios de cultivo combinan la tecnología
colorimétrica con sofisticados algoritmos para minimizar la
incidencia de falsos negativos debido a la entrada diferida en el
sistema BACT / ALERT® 3D. Los sensores especializados de emulsión
líquida (LES) en la parte inferior de cada botella de cultivo cambian
visiblemente de color en respuesta a cambios en el pH como
resultado del aumento de los niveles de CO2 producidos por los
microorganismos.
HACER UN PASE A
LOS MEDIOS DE
CULTIVO.

15. PUNTA DE CATETER
Cultivo de catéteres en infecciones endovasculares.
 El cultivo de catéteres asociados a infecciones endovasculares son
útiles cuando un paciente bajo terapia endovenosa desarrolla fiebre
o bacteremias sin un foco infeccioso clínicamente aparente.
 Pueden ser útil para distinguir entre una contaminación o infección
microbiana.
El método consiste en los siguientes pasos:
1. Una vez en el laboratorio se procede a inocular mediante rodamiento en
una placa de agar sangre la punta del catéter.
2. La placa de agar sangre debe ser incubada a una temperatura de 36ºC
durante un máximo de 72 horas con lecturas intermedias cada 24 horas.
Todo catéter debe venir acompañado de sus
respectivo hemocultivo si solo es la punta
de catéter, todo crecimiento bacteriano del
cultivo de catéter carece de significado
clínico.

16. Administración de la
terapia antimicrobiana.
Conceso 1996.
Streptococcus
agalactiae.( S. grupo B)

17. Hisopado Rectal.
 El Streptococcus agalactiae o estreptococo del grupo B
es un microorganismo Gram positivo, habitual de los
tractos genitourinario y gastrointestinal del ser humano.
¿ Cual es el
Microrganismo
buscado en un
Hisopado rectal ?
Streptococcus agalactiae.
S. Grupo B
Prueba Presuntiva :
CATALASA ( Negativa)
Confirmativa:
Camp-Test : Positivo
Bacitracina ( R)
SXT ( R ).

18. Fundamento de las Pruebas de
Diagnostico.
1. Prueba de Camp-TEST
2.Catalasa
3.Bacitracina.
La bacitracina es un
antibiótico bactericida
inhibidor de la síntesis de
la pared celular.

19.  El estreptococo beta-hemolítico del grupo B
(SGB) es uno de los principales agentes
patógenos causantes de sepsis neonatal precoz.
Esta bacteria Gram positiva causa enfermedad
invasiva en neonatos.
 El germen puede también traspasar las
membranas ovulares intactas, y se lo ha
relacionado con muerte fetal y parto
pretérmino.
 La administración de antibióticos durante la
gestación resulta ineficaz para erradicar la
colonización vaginal, ya que, al suprimir el
tratamiento, la vagina vuelve a colonizarse a
partir del recto.
 La administración de antibióticos
intraparto a las gestantes
portadoras de EGB, es la única
medida eficaz actualmente
aceptada para interrumpir la
transmisión vertical del EGB y
evitar la sepsis neonatal.
 Si el reporte del tamizaje es
positivo, cuando inicie el trabajo de
parto administre Penicilina G
5.000.000 IV dosis inicial

20. CULTIVO DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO.
(LCR).
Generalidades.
 Liquido incoloro que baña las superficies externas del
encéfalo y la médula espinal .
 Actúa como amortiguador entre el sistema nervioso
central y los huesos circundantes
Transporte de la muestra:
INMEDIATAMENTE bajo condiciones de
temperatura ambiente.
Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis
son muy susceptibles a las temperaturas extremas
y a la desecación, por lo tanto las muestras clínicas
deben ser enviadas al laboratorio sin refrigerar.
SON MUESTRAS DE VIDAS HUMANAS
QUE ESTAN EN TUS MANOS….
Su procesamiento debe tener máxima
prioridad sobre cualquier otro tipo de
análisis.

21. Fuente: Manual de Procedimientos de
bacteriología medica, 2004

22. CULTIVO FARINGEO.
 Streptococcus beta hemolítico del grupo A (Streptococcus
pyogenes).
 Está asociada a faringoamigdalitis.
 El propósito de realizar el cultivo de exudado faríngeo es la
búsqueda de esta bacteria en vista que dependiendo de cada
país, entre un 7-10% está asociada a fiebre reumática y
glomerulonefritis.
 Este grupo también está asociado a abscesos amigdalinos,
angina de Ludwing y en los portadores de toxinas
eritrogénicas, a escarlatina.
¿Qué microorganismo
buscamos en un cultivo
faríngeo ?

23. 1. Incline ligeramente la cabeza del paciente
hacia atrás e ilumine bien la garganta.
2. Presione la lengua hacia abajo con
depresor de madera de modo que pueda
observarse la parte posterior de la
garganta.
3. Luego frote el hisopo de algodón estéril de
arriba abajo contra ambas amígdalas,
contra la parte posterior de la faringe y
contra cualquier mancha blanca que se
encuentre alrededor de las amígdalas.
4. Introduzca el hisopo en el medio de
transporte de Amies.
TOMA DE MUESTRA / CULTIVO FARINGEO.

24. CULTIVO FARINGEO.

25. Uretritis:
Consiste en la inflamación de la uretra, que ocasiona síntomas
como:
 Disuria
 secreción uretral mucopurulenta
 La secreción uretral es más cuantiosa y purulenta en la
uretritis gonocócica.
 A diferencia de la infección en la mujer, el 90 % de las
uretritis en el hombre son sintomáticas.
 La uretritis no gonocócica (UNG) es el cuadro más común
en el hombre y su principal agente etiológico es C.
trachomatis.
EXUDADO URETRAL MASCULINO.

26. EXUDADO URETRAL MASCULINO.
 Cuando exista exudado externo puede recogerse con torunda
estándar. El exudado puede estimularse exprimiendo la uretra
.
 Además se introducirá una torunda uretral suavemente con
movimiento de rotación hasta penetrar unos 2.4 cm dentro de
la uretra.
 Inmediatamente inocular en medio Tayer Martin .
La observación de algunos tipos
morfológicos puede ser diagnóstica en
algunos casos por ejemplo; diplococos
gramnegativos intracelulares / extracelulares
en polimorfonucleares en muestras de
secreción uretral es altamente sugestivo de
Neisseria gonhorroeae

27. ¿Qué mensaje te da el señor ? Reflexiona en tu corazón …….