Este documento proporciona información sobre el diagnóstico de anemias desde el punto de vista del laboratorio clínico. Explica las pruebas de laboratorio clave para diagnosticar y clasificar las anemias, incluidos los recuentos de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito, índices hematimétricos, recuento de reticulocitos, frotis de sangre periférica y examen de médula ósea. También cubre pruebas adicionales como hierro, ferritina, capacidad total de fijación de hierro y

1. ACTUALIZACION EN EL
DIAGNOSTICO DE ANEMIAS
Lic. Edgard Mauricio Huezo Arias

2. DIAGNOSTICO DE
ANEMIAS
• Es un signo o sintoma
• Se produce cuando se rompe el
equilibrio entre la producción y la
destrucción de los eritrocitos y la
masa de eritrocitos es insuficiente
para mantener adecuadamente
oxigenados los tejidos.

3. • Desde el punto de vista
fisiológico se define como una
oxigenación de los tejidos
(órganos) insuficiente.
• Desde el punto de vista del
laboratorio clínico se define
como una masa de eritrocitos
deficiente para trasportar
adecuadamente oxígeno a los
tejidos

4. MANIFESTACIONES CLINICAS

5. El médico para lograr este objetivo tiene a su disposición
pruebas complementarias dentro de las cuales las más
importantes son las de laboratorio clínico. el médico
determinará cuáles y cuándo emplear tal o cual prueba, pero en
todos los casos de anemia se deben utilizar un mínimo de
pruebas tanto para la clasificación como para el seguimiento

6. •Eritroblastos sufren 4 divisiones
celulares para producir 16
células hijas, que maduran,
expulsan el núcleo y se
convierten en Reticulocitos.
Este proceso se encuentra bajo
control de la Hormona
Eritropoyetina

8. Diagnostico de la Anemia desde el
punto de vista del Laboratorio
• Determinación de: Conteo de
Eritrocitos, Hematocrito,
Hemoglobina, Índices
Hematimetricos y Reticulocitos.
• Frotis de Sangre Periférica.
• Frotis de Medula Ósea.
• Determinación de Niveles de Ácido
Folico,Vit.B12, Hierro, Ferritina,
• Electroforesis de Hemoglobina

9. ERITROCITOS
Disco bicóncavo Esta forma proporciona un área superficial
mayor para que la Hemoglobina se combine con el
Oxigeno.
Son nutrientes importantes para la ordenada maduración de
los eritrocitos:
La deficiencia de cualquiera de ellos produce cambios
morfológicos reconocibles
• El Ácido Fólico y la Vit.B12 actúan como coenzimas en la
síntesis del ADN.
• El ADN constituye a los cromosomas, debe replicarse
para que la célula se divida.
• Si el ADN no puede sintetizarse durante la fase de división
celular, esta se retrasa.
• El Hierro
Consecuencia: Eritrocito de gran tamaño
• Hombre = 4.5 a 6.2 x 10e6/µL
• Mujer = 4.2 a 5.4 x 10e/µL

10. Hematocrito
Este término se deriva de las palabras
griegas. Haimato= sangre, Krites = separar
• El Dr. Wintrobe fue quien lleno un tubo con
sangre, lo centrifugo y luego midió la
cantidad de glóbulos rojos como un
porcentaje del volumen total de la sangre
menos la capa de células blancas y
plaquetas.
VALORES DE REFERENCIA
• Hombre = 39 a 51 %
• Mujer = 36 a 48 %

11. Hemoglobina
El citoplasma de los eritrocitos está compuesto en su
mayor parte de Hemoglobina.
La Hemoglobina se compone de 2 partes:
• 4 Cadena Proteínica de Globina
• Anillo Hem contiene: Hierro y Protoporfirinas
Consecuencia: Eritrocitos pequeños, distorsionados y
pálidos.
VALORES DE REFERENCIA
• Hombre = 13 a 17 Gr./dl
• Mujer = 12 a 16 Gr./dl

12. INDICES HEMATIMETRICOS
Volumen corpuscular medio
• Es una forma de expresar el tamaño de los eritrocitos.
• Promedio Normal: 82 a 92 micras cúbicas o fentolitros.
La fórmula usada para calcularlo:
VCM = Ht x 10
No. Eritrocitos
Básicamente estamos determinando el promedio del
tamaño de la célula. Los resultados del VCM
constituyen la base para clasificar una anemia:
• Normocíticos: Volumen Normal
• Macrocíticos: Volumen Aumentado de lo normal.
• Microcíticos: Volumen Disminuido de lo normal.

13. • Aunque frecuentemente es posible evaluar el tamaño
de un eritrocito en un frotis, en el microscopio solo
vemos 2 dimensiones
• Importante el dato del VCM que se obtiene de los
equipos automatizados ya que lo mide directamente,
no se calcula.
INTERFERENCIAS
• La combinación de Macroeritrocitos y Microeritrocitos
da como resultados un VCM Normal. Para confirmarlo,
se debe examinar un FSP.
• El VGM aumenta si se elevan los reticulocitos

14. Hemoglobina corpuscular media
HCM: corresponde al contenido de hemoglobina en cada
eritrocito. Es el promedio del peso de la Hb por glóbulo rojo.
Este índice es muy importante en el diagnóstico de pacientes
con anemias graves.
Valor Normal: 27 a 32 picogr.de Hb por Eritrocitos.
La formula usada es:
HCM = Hb x 10
No. Eritrocitos
Este parámetro tiene un valor limitado pues cambia
rápidamente cuando cambia el tamaño de las células rojas.
• La HCM elevada acompaña a la anemia Macrocítica.
• La HCM disminuida acompaña a la anemia Microcítica.
INTERFERENCIAS
• La hiperlipidemia eleva en forma falsa la HCM.
• La cuenta leucocitaria mayor de 50,000 x mmc eleva en
forma artificial el valor de la Hb, que a su vez eleva en
forma artificial la HCM.
• Las altas concentraciones de heparina elevan en forma
artificial la HCM.

15. Concentración de hemoglobina
corpuscular media
• CHCM: Es la concentración de la
hemoglobina comparada con el Ht.
• Es la medida de la Hipocromía.
• Cantidad de Hb que tiene un eritrocito en
relación a su volumen.
• Valor Normal : 31.5 a 35.5 Gr./dl
• La formula usada es:
• MCHC = Hb x 100
Ht

16. Este parámetro es usado con más frecuencia para evaluar el
funcionamiento de los equipos automatizados.
La CHCM disminuida significa que una unidad de volumen de
glóbulos rojos contiene menos Hb que lo normal:
• Deficiencia de Hierro
• Deficiencia síntesis de protoporfirinas (anemias
sideroblásticas).
• Talasemia
• La anemia Hipocrómica se caracteriza por un valor menor de
30 gr/dl
La CHCM elevada suele indicar esferocitosis; los glóbulos rojos
no contienen más de 37 Gr/dl de Hb, es lo que sucede en los
recién nacidos y lactantes.
INTERFERENCIAS
• La CHCM muestra una elevación falsa en presencia de
lipemia, aglutininas frías o fenómeno de Rouleaux o
concentraciones altas de Heparina.
• Independientemente de los cálculos, es imposible que existan
cifras mayores de 37 Gr/dl.

17. Índice de anisocitosis
• RDW-CV
• El Ancho de Distribución Eritrocitaria es la
medida de la variación en la distribución del
volumen de los eritrocitos
• es una prueba automatizada
• útil para investigar algunas alteraciones
hematológicas y vigilar la respuesta al
Tratamiento.
• Básicamente nos indica el grado de
Anisocitosis.
• Debe utilizarse con cautela.

18. • Definición: Es el coeficiente de
variación alrededor de la media (X)
correspondiente a la curva de
distribución del volumen de los
glóbulos rojos
• CV% = 1SD x 100
MCV

19. RETICULOCITOS
• Es un Eritrocito joven, inmaduro y sin núcleo que
contiene material reticular (RNA) que se tiñe de
color gris-azulado.
• Este retículo se observa en las células nuevas
durante 1 o 2 días antes de que la célula alcance su
madurez completa.
• Para que la cuenta de reticulocitos sea importante,
debe compararse con la cuenta total de eritrocitos.
• Los reticulocitos son los que salen a la circulación,
no salen como eritrocitos.
• Por lo que el número de reticulocitos en sangre
periférica es una evidencia de la Eritropoyesis
Aumentada igual a mayor numero de reticulocitos.
• Disminuida igual a menor número de reticulocitos.

20. • Nºde Reticulocitos x 100 = % de reticulocitos
1000 G. Rojos
• RR: 0.5 – 1.5 %
• Fórmula para valores absolutos:
% de Reticulocitos x Recuento de G. Rojos x mmc.
1000
• RR: 25,000 – 75,000 x mmc
Los reticulocitos en la actualidad se leen por
citometria de flujo, hay mucho equipos que lo
ofrecen.

22. • SIGNIFICADO CLINICO
• Reticulocitosis indica que existe mayor
producción de glóbulos rojos conforme la medula
ósea sustituye a las células que se pierden o se
destruyen en forma precoz.
• Existe en: Anemia Hemolítica por Ac. Problemas
en la membrana del eritrocito,
Hemoglobinopatías, deficiencia de enzimas
eritrociticas
• Los reticulocitos normalmente aumentan en los
lactantes y el embarazo.
• El paciente que ha sido transfundido
recientemente tiene una cuenta inferior por
dilución.
• La presencia de cuerpos de Howell-Jolly eleva
en forma artificial la cuenta cuando se utiliza el
método automatizado

23. • La cuenta de reticulocitos se utiliza
para distinguir las anemias
producidas por insuficiencia de la
medula ósea de las que son
causadas por hemorragia o
hemólisis.
• Para vigilar lo efectivo del Tx. De la
anemia perniciosa o la recuperación
de la función de la medula ósea en la
anemia aplasica

24. FROTIS DE SANGRE
PERIFERICA
• Se deben Evaluar las 3 Líneas:
• Línea Roja:
• Alteraciones en el Tamaño - Anisocitosis
• Alteraciones en la Forma - Poiquilocitosis
• Contenido de Hemoglobina - Normocrómica,
Hipocrómica, Anisocromía
• Inclusiones Eritrocitarias - Punteado Basófilo,
Basofilia Difusa, Cuerpos de Howell-Jolly, Anillos de
Cabot.

27. Ferritina
• Gran utilidad clínica, es poco utilizada en
nuestro medio
• Mide el depósito de hierro disponible para la
eritropoyesis (producción de eritrocitos) en la
medula ósea, el bazo y el hígado. Debido a que
la deficiencia de hierro es la causa más
frecuente de anemia, la ferritina se debe medir
en todos los pacientes con anemia, a no ser que
la causa sea muy obvia y ésta no sea necesaria.
• La ferritina permite identificar estados
deficientes, antes de que se presenten cambios
en el hemograma.

28. Sideremia
• Esta prueba estudia tres parámetros relacionados
con el hierro, principal componente de la
hemoglobina:
• hierro sérico
• capacitad total de fijación del hierro
• saturación de la transferrina.
• La prueba es complementaria a la medición de la
ferritina, mide el hierro utilizable, y usualmente se
modifica cuando lo hace la ferritina
• Esta prueba es de importancia en el diagnóstico
diferencial de las anemias por deficiencia de hierro y
las enfermedades crónicas y malignas.
• Se recomienda en los estudios de clasificación de
todos los pacientes con anemia.

29. Capacidad de Fijacion del Hierro
• La concentración cuantificada de hierro sérico, que consiste
principalmente en el Fe(III) fijado a la transferrina sérica, no
incluye el hierro contenido en el suero como hemoglobina
libre.
• Como lo normal es que sólo alrededor de un tercio de los
lugares de fijación del hierro de la transferrina estén
ocupados por Fe(III), la transferrina sérica tiene una
considerable capacidad de fijación férrica en reserva.
• Esta reserva recibe el nombre de capacidad de fijación
férrica insaturada o latente del suero. Combinando las
cuantificaciones de la UIBC con la concentración de hierro
sérico se obtiene la capacidad total de fijación férrica
(TIBC), que es la concentración máxima de hierro fijable
por las proteínas séricas, principalmente la transferrina.

30. Pruebas de función
renal
• En todo paciente con anemia se
debe estudiar la función renal con
el nitrógeno ureico o BUN, la
creatinina y el citoquímico de
orina. Muchas de las anemias
resistentes al tratamiento se
explican por fallas en la función
renal, que no fueron estudiadas
oportunamente a no ser que se
sospeche o se estudien
rutinariamente

31. Eritropoyetina
• Esta es la hormona que regula la producción de
sangre mediante mecanismos dependientes del
oxígeno a nivel del riñón.
• La eritropoyetina puede estar disminuida en
pacientes con enfermedades renales crónicas,
cáncer e inmunodeficiencia adquirida. Los
pacientes con estas enfermedades que presenten
anemia y/o niveles bajos de eritropoyetina son
candidatos para recibir la hormona por vía
parenteral (inyección subcutánea), reduciendo
significativamente el número de transfusiones
requeridas para el manejo de la anemia.

32. PRUEBAS SEROLOGICAS
• 1.- PRUEBA DE HAM : el fundamento de esta prueba lo
constituye la susceptibilidad de los eritrocitos HPN a la
lisis en suero humano acidificado; se considera la
prueba diagnóstica cuando resulta positiva. Su eficacia
es limitada, porque puede dar resultados falsos
negativos por el efecto de transfusiones previas, y falsos
positivos en la anemia diseritropoyética congénita tipo II
o HEMPAS.
• 2.- PRUEBA DE LA SUCROSA : la base de esta prueba
es la fijación del complemento mediante la disminución
de la potencia iónica del medio ambiente, que provoca la
hemólisis exagerada de los eritrocitos HPN. Este examen
es sensible, pero poco específico.
• 3.- PRUEBA DE LA TROMBINA ( Test de Crosby): es
más sensible, pero menos específica que la de Ham.
Está basada en el incremento de la hemólisis que tiene
lugar cuando se añade trombina a las células
suspendidas en suero acidificado.

33. Inducción de Drepanocitos
• En un medio carente de oxígeno (O2) la hemoglobina
S se hace menos soluble y forma agregados
cristalinos con la consiguiente formación de
drepanocitos. Se coloca una gota de sangre en un
portaobjetos, se le agrega metabisulfito de sodio 2%,
que es un reactivo consumidor de O2, se tapa con un
cubreobjetos y se sellan los bordes con petrolato; 8
en pocos minutos se puede observar el fenómeno. Si
no se agrega el metabisulfito habría que esperar entre
seis y 24 horas para que ocurriera

34. Otros estudios
• Sangre oculta en heces
• Helicobacter pilory
• Hormonas tiroideas

35. Medula ósea
• La sangre se produce en la medula ósea. El
estudio de la medula, ya sea por biopsia o
aspirado (mielograma), permite tener una
evaluación objetiva de los precursores de la
hematopoyesis (producción de sangre) en
general y de la eritropoyesis (producción de
eritrocitos) en particular.
• Esta prueba la realizan los hematologos

36. ELECTROFORESIS DE
HEMOGLOBINA
• Las hemoglobinopatías son trastornos
que afectan a la estructura, la función o la
producción de hemoglobina

37. Clasificación
Estructurales : Son el resultado de mutaciones al nivel de
alguno de los genes que codifican la síntesis de una
determinada cadena globínica:α, β, γ, ψ,yδ
1) Hemo-globinas con alteración de su movilidad
electroforética (Hb S, Hb C, Hb J, Hb D, Hb E)
2)hemoglobinas con alteración de la estabilidad (Hb Köln
entre otras)
3) hemoglobinas conaumento de la afinidad por el oxígeno,
4) hemoglobinas que no consiguen mantener elhierro en
estado reducido.
Talesemias: alteracion congenita, defecto en la sintesis de
Hb
La disminución de la síntesis decadenas alfa se denomina
alfa talasemia, la de cadenas beta, beta talasemia, lade
cadenas delta y beta simultáneamente, delta/beta
talasemia,

38. TECNICAS
• Electroforesis de hemoglobinas con diferentes
soportes y valores de pH.
• Cuantificación de las fracciones HbA2 y HbF.
• Pruebas de solubilidad hemoglobínica y
falciformación.
• Estudio de la estabilidad molecular de la
hemoglobina.
• Estudio de la afinidad de la hemoglobina por
el oxígeno.
• Escrutinio de mutaciones mediante PCR.

40. Etiologia de las anemias

41. CONCLUSIONES
• La anemia no es una enfermedad, es un signo
que acompaña a muchas enfermedades.
• El objetivo del médico frente al paciente con
anemia debe estar dirigido a establecer el
diagnóstico, incluido el tipo de anemia y su causa,
con el menor número posible de estudios de
laboratorio, en el tiempo más corto, con la menor
molestia para el paciente, idealmente
ambulatorio, y al menor costo posible.
• La mayoría de los pacientes con anemia
moderada pueden vivir, aun sin saber que son
anémicos, gracias a mecanismos de adaptación,
pero no vale la pena permanecer con un estado
clínico que en buena parte puede ser corregido.

42. • El profesional de laboratorio clinico,
tiene que tener criterio, ademas de
ser un apoyo en la recuperacion del
paciente
• De que vale tener la tecnologia de
punta si se comenten errores en las
fases pre analiticas, analiticas y pos
analiticas

43. Sorprendernos por algo es el primer
paso de la mente hacia el
descubrimiento.
Louis Pasteur (1822-1895) Químico
y microbiólogo francés.