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Cinética Enzimática




 DRA. VALESKA ORMAZABAL V.
  DEPTO. CIENCIAS BÁSICAS
   FACULTAD DE MEDICINA
  CRUSO MEDICINA MED.207
            2012
Energía de fijación
Significado de los parámetros cinéticos
Significancia de la km.

1.    Km: concentración de sustrato necesaria para alcanzar la mitad de la
      velocidad máxima (Vmáx).
           1.  Si una enzima tiene una Km pequeña, alcanza su máxima eficiencia
                catalítica a bajas concentraciones de sustrato.
           2.  Si una enzima tiene una Km alta alcanza su máxima eficiencia
                catalítica a altas concentraciones de sustrato.
2.    Sólo si k2 es pequeño con respecto a k1/k-1. Km es una medida de afinidad
      del complejo enzima sustrato.
Función de los aa. en la
                      Célula


Síntesis de proteínas             Degradación   Energía
Función de los aa. en la
                           Célula


    Síntesis de proteínas              Degradación              Energía




       Km de las                        Km de las
   aminoacil-tRNA 2,2                 Transaminasas
          µM                              30mM

     ¿ Cómo la célula se asegura que los aa van a ser utilizados
primordialmente en la síntesis de proteínas y no van principalente a
                           degradación?
R: La respuesta se encuentra al contemplar las propiedades cinéticas
           de las enzimas que participan en cada evento.
Significado de los parámetros cinéticos
    1. Constante catalítica: kcat( S-1) o Núnero de recambio


                       kcat= Vmáx
                                 [Et]


k cat: Es el número de procesos de reacción que cada sitio activo realiza
por unidad de tiempo
Función lítica sobre
                                          las bacterias


Acetilcolinesterasa      Lisozima
kcat: 14000 (sec-1)   kcat: 0,5 (sec-1)
Significado de los parámetros cinéticos
2. Constante de especificidad: kcat/Km. Es una medida de eficiencia
catalítica de una enzima . Evalúa la velocidad en que una enzima se
encuentra con un sustrato en solución.
Para comparar actividades enzimáticas se
      utilizan parámetros cinéticos
Corte transversal del sitio activo de la enzima
  superoxido dismutasa. kcat/Km 2,8x109
Factores que afectan la Actividad
          Enzimática


• Inhibidores
• pH
• Temperatura
Inhibidor Competitivo (reversible)




                                     Km Aumenta
Un inhibidor competitivo produce cambios en la Km, sin afectar la Vmáx
PURO




             Ki[ESI]




Ki=Ki[ES]
Mixta (KI> K[ESI])             Mixta (KI< K[ESI])




Km aumenta
Vmax diminuye                               Km diminuye
                                            Vmax diminuye

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  • 1. Cinética Enzimática DRA. VALESKA ORMAZABAL V. DEPTO. CIENCIAS BÁSICAS FACULTAD DE MEDICINA CRUSO MEDICINA MED.207 2012
  • 2.
  • 4.
  • 5.
  • 6. Significado de los parámetros cinéticos Significancia de la km. 1.  Km: concentración de sustrato necesaria para alcanzar la mitad de la velocidad máxima (Vmáx). 1.  Si una enzima tiene una Km pequeña, alcanza su máxima eficiencia catalítica a bajas concentraciones de sustrato. 2.  Si una enzima tiene una Km alta alcanza su máxima eficiencia catalítica a altas concentraciones de sustrato. 2.  Sólo si k2 es pequeño con respecto a k1/k-1. Km es una medida de afinidad del complejo enzima sustrato.
  • 7. Función de los aa. en la Célula Síntesis de proteínas Degradación Energía
  • 8. Función de los aa. en la Célula Síntesis de proteínas Degradación Energía Km de las Km de las aminoacil-tRNA 2,2 Transaminasas µM 30mM ¿ Cómo la célula se asegura que los aa van a ser utilizados primordialmente en la síntesis de proteínas y no van principalente a degradación? R: La respuesta se encuentra al contemplar las propiedades cinéticas de las enzimas que participan en cada evento.
  • 9. Significado de los parámetros cinéticos 1. Constante catalítica: kcat( S-1) o Núnero de recambio kcat= Vmáx [Et] k cat: Es el número de procesos de reacción que cada sitio activo realiza por unidad de tiempo
  • 10. Función lítica sobre las bacterias Acetilcolinesterasa Lisozima kcat: 14000 (sec-1) kcat: 0,5 (sec-1)
  • 11. Significado de los parámetros cinéticos 2. Constante de especificidad: kcat/Km. Es una medida de eficiencia catalítica de una enzima . Evalúa la velocidad en que una enzima se encuentra con un sustrato en solución.
  • 12. Para comparar actividades enzimáticas se utilizan parámetros cinéticos
  • 13. Corte transversal del sitio activo de la enzima superoxido dismutasa. kcat/Km 2,8x109
  • 14. Factores que afectan la Actividad Enzimática • Inhibidores • pH • Temperatura
  • 15.
  • 16.
  • 17.
  • 19. Un inhibidor competitivo produce cambios en la Km, sin afectar la Vmáx
  • 20.
  • 21. PURO Ki[ESI] Ki=Ki[ES]
  • 22. Mixta (KI> K[ESI]) Mixta (KI< K[ESI]) Km aumenta Vmax diminuye Km diminuye Vmax diminuye Ki[ESI]
  • 23.