Este documento describe las características de los bacilos gram negativos, incluyendo las enterobacterias (bacilos fermentadores de glucosa) y los bacilos gram negativos no fermentadores de glucosa. Detalla las características, factores de patogenicidad, cuadros clínicos e identificación por laboratorio de bacterias como Escherichia, Salmonella, Shigella, Klebsiella, Proteus, Yersinia, Pseudomonas y Stenotrophomonas. Además, proporciona una guía bibliográfica para consultar sobre este tema

1. BACILOS GRAM NEGATIVOS
OBJETIVO
Conocer las características bacteriologías epidemiológicas, determinantes de
patogenicidad, cuadros clínicas e identificación por el laboratorio de bacterias de
importancia clínica como enterobacterias (bacilos fermentadores de glucosa) y bacilos
gram negativos no fermentadores de glucosa.
1. BACILOS FERMENTADORES DE GLUCOSA:
ENTEROBACTERIAS
Para este tema debe desarrollar los siguientes puntos con base en la bibliografía dada al
en el presente texto.
1. Clasificación: Los géneros que contienen las especies más virulentas para el
hombre son: Escherichia, Shigella, Salmonella, Klebsiella, Proteus y Yersinia,
otros como Enterobacter, Serratia, Morganella y Providencia más frecuentemente
causales de infecciones intrahospitalarias
2. Describir morfología y tinción al Gram y características de crecimiento y
metabolismo
3. Nombrar los determinantes de patogenicidad
4. Definir y explicar los siguientes términos
a. Enterobacterias oportunistas
b. Enterobacterias enteropatógenas: nombrar las bacterias que siendo
enterobacterias se encuentran en este grupo
• Nombrar los cuadros clínicos causados por las enterobacterias oportunistas y las
enteropatógenas
Se adjunta clasificación de la familia Enterobacteriaceae
GUIA BIBLIOGRAFICA PARA CONSULTAR
1. Jawetz, Ernest. Microbiología médica. 17ª. ed. Editorial Appleton and Larg. 2002
2. Murray, Patrick R. Microbiología médica, 2da ed. Editorial Harcourt Brace, España,
1.997
3. Vélez, Hernán y col. Fundamentos de Medicina. Enfermedades Infecciosas. 6ª. ed.
Editorial Corporación para Investigaciones Biológicas. Medellín 2003.
4. Banfi A., W Lederann, J. Cofré, J. Cohen. Enfermedades infecciosas en Pediatria. Ed.
Mediterraneo. Chile. 1998.
5. Wilson Walter R. Diagnóstico y tratamiento de enfermedades infecciosas. 1ª ed.
Editorial Manual Moderno; México, 2002
6. Forbes, Betty et al. Diagnóstico Microbiológico. 11a ed. Editorial Médica
Panamericana; Argentina, 2004
1. Liebana Ureña Microbiologia Oral Editorial Mc Graw Hill Interamericana 2002
8. Mandell, Gerald. Enfermedades Infecciosas. Principios y práctica, Vol, 2. ed. Editorial.
Médica Panamericana, 1997
9. http://www.monografias.com/trabajos16/microbiologia-clinica/microbiologia-
clinica.shtml#BACTER

2. CLASIFICACION FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
Clasificación biológica Clasificación biomédica
La familia Enterobacteriaceaecomprende Enterobacterias Enterobacterias patógenas
más de 200 génerosque dan cabida a más de patógenas secundarias: son patógenos
2.000especies. Algunas de primarias: siempre oportunistas (ver patógeno
estasbacterias producen enfermedades. producenenfermedad en el oportunista). Producen infecciones
Sin embargo, esta clasificación no es hombre y en algunos animales. de heridas, infección urinaria...
práctica en medicina. incluso pueden producir sepsis.
Género Citrobacter Género Salmonella Género Citrobacter
Género Enterobacter Género Shigella Género Enterobacter
Género Escherichia Género Yersinia: es la más Género Escherichia
Género Hafnia conocida Yersinia
Género Klebsiella pestis(agente productor de
Género Lecreciella la peste bubónica), está
Género Leminorella sometida a vigilancia sanitaria
Género Morganella internacional.
Género Obesobacterium Escherichia colidiarreogénico Género Klebsiella
Género Proteus Género Morganella
Género Providencia Género Proteus
Género Salmonella Género Providencia
Género Serratia Género Serratia, etc.
Género Shigella
Género Tatumella
Género Yersinia, etc.
2. BACILOS NO FERMENTADORES DE GLUCOSA:
PSEUDOMONAS Y BACTERIAS NO FERMENTADORAS RELACIONADAS
Introducción

3. Pseudomonas y bacilos relacionados constituyen una mezcla de patógenos oportunistas
de los vegetales, animales y el hombre. Existe un gran número de géneros que incluyen
bacilos no fermentadores, pero relativamente son pocos los que se aíslan con cierta
frecuencia.
A Continuación se expone una lista de géneros bacilos Gram negativos no fermentadores
con significado clínico
Pseudomonas
Stenotrophomonas
Alkaligenes
Acinetobacter
Burholderia
Eikenella
Flavobacterium
Moraxella
Actinobacillus
Cardiobacterium
PSEUDOMONAS
Son organismos ubicuos que se encuentran en el suelo, materia orgánica en
descomposición, vegetación y agua. Sin embargo, también se encuentra en el medio
hospitalario en reservorios húmedos como alimentos, flores cortadas, instrumental, pisos,
baños, equipo de terapia respiratoria e incluso en soluciones desinfectantes.
La amplia distribución ambiental de estas bacterias esta favorecida por sus simples
requerimientos nutricionales para su desarrollo, incluso son capaces de crecer en el agua
destilada. Tienen capacidad de crecer prácticamente en cualquier medio y de resistir la
mayoría de los antimicrobianos empleados habitualmente.
El agua hirviendo y la desecación destruyen estas bacterias.
En general las infecciones por Pseudomonas tienen carácter primariamente oportunista.
La especie de Pseudomonas mas frecuentemente asociada con enfermedad humana es
la. Pseudomonas aeruginosa Puede causar del 10 al 20% de infecciones
intrahospitalarias compartiendo o reemplazando incluso al Staphylococcus aureus como
principal patógeno en pacientes con fibrosis quística, con enfermedades neoplásicas o
quemaduras severas.
FISIOLOGIA Y ESTRUCTURA.
Pseudomonas son bacilos gram negativos que se mueven por medio de flagelos polares,
aerobios, no esporulados.
El término NO FERMENTADORES está referido a que utilizan pocos hidratados de
carbono (glucosa entre otros) mediante metabolismo oxidativo y NO por vía fermentativa.
Esto se evidencia por el abundante desarrollo en 24 horas en TSI (agar triple azúcar
hierro) pero no acidifican la profundidad de este medio.
El oxigeno actúa como aceptor final de electrones y la enzima citocromo oxidasa presente
en Pseudomonas sirve para diferenciarlas de las enterobacterias.
Algunas Pseudomonas producen pigmentos difusibles como piocianina (azul verdoso),
Fluoresceína (amarillo) y piorrubina (rojo-pardo).
Cuando crecen en agar sangre son beta hemolíticos y oscurecen el medio donde crecen.
Su temperatura óptima de crecimiento es de 35° C pero puede hacerlo a 42° C.
El género Pseudomonas se compone de varias especies diferentes que se distinguen por
sus propiedades bioquímicas y genéticas.
FACTORES DE VIRULENCIA.

4. Las Pseudomonas poseen varios factores de virulencia entre los que se incluyen
componentes estructurales, toxinas y enzimas. Siendo difícil establecer el papel de cada
factor en la patogenia de la enfermedad, se cree que la virulencia de Pseudomonas es
multifactorial.
Pilis o fimbrias. Median la adherencia al epitelio respiratorio.
Cápsula. La cápsula polisacárida protege a la bacteria de la fagocitosis. Ayuda a la
colonización del epitelio respiratorio en pacientes con fibrosis quistica o enfermedades
respiratorias crónicas.
Diseminación. Debido a la movilidad por su flagelo polar.
Enzimas: Fosfolipasa C.
Proteasas: Elastasa.
Proteasa alcalina.
Fosfolipasa C: Descompone lípidos y leitina lo que facilita la destrucción tisular.
Elastasa: Cataliza la destrucción de las firas elásticas delas paredes de los vasos
Sanguíneos,lo que produce lesiones hemorrágicas (ectima gangreoso) que se encuentra
en las infecciones deseminadas por P. aeruginosa.
Proteasa alcalina: Producen destrucción tisular, inactivación de anticuerpos e
inactivaciónde neutrófilos.
Toxinas: Exotoxinas: Exotoxina A
Exotoxina S
Enterotoxina
Endotoxinas
Exotoxina A: Importante factor de virulencia producido por P.aeruginosa. Bloquea la
síntesis de proteínas de las células eucarióticas, de forma similar a la toxina diftérica, pero
la exotoxina A es menos tóxica.
Exotoxina S: También inhibe síntesis proteica pero ésta es termo estable.
Enterotoxina: Responsable de la diarrea asociada a infección intestinal.
Endotoxina: Asociada a Sepsis por la presencia de Lípidos A.
SINDROMES CLINICOS:
La P. aeruginosa puede infectar casi cualquier tejido corporal.
2. LESIONES LOCALIZADAS: Se puede encontrar infectando quemaduras y heridas,
tejido corneal, vías urinarias o pulmonares. Desde una lesión localizada puede
diseminarse por vía hematógena produciendo sepsis o infecciones focales en otros
tejidos.
3. BACTERIEMIAS Y ENDOCARDITIS. La bacteriemia por P: aeruginosa clínicamente
es indistinguible de otras bacteriemias por bacterias Gram negativas, aunque es de
elevada mortalidad.
Es común en pacientes con neutropenia, diabetes mellitus, quemaduras extensas y
neoplasias malignas hematológicas.
La mayoría de las bacteriemias se producen a partir de infecciones del tracto
respiratorio bajo, infecciones urinarias, la piel y tejidos blandos (quemaduras
infectadas.)
La endocarditis por P. aeruginosa es más común en adictos a drogas intravenosas.
Afecta más a la válvula tricúspide y es de curso crónico
4. INFECCIONES PULMONARES. Las infecciones por P. aeruginosa pueden ir desde
simple colonización o traqueobronquitis hasta bronconeumonía necrotizante grave. La
infección pulmonar por esta bacteria en pacientes con fibrosis quística se asocia a la
exacerbación de la enfermedad subyacente y en pacientes con neutropenia y otras

5. formas de inmunosupresión, debido al empleo de equipos de terapia respiratoria
contaminados.
5. INFECCIONES DEL OIDO: P. aeruginosa se asocia con otitis externa (oído de
nadador) con un factor de riesgo como es la natación, también se asocia a formas
más graves como son la otitis externa maligna y la otitis media crónica.
6. INFECCIONES DE QUEMADURAS: La colonización de quemaduras por P.
aeruginosa, seguida por lesión vascular localizada y necrosis tisular e incluso
bacteriemia no es infrecuente en pacientes con quemaduras graves. La superficie
húmeda de las quemaduras y la ausencia de respuesta neutrófila frente a la invasión
tisular, predispone a las infecciones por esta bacteria.
7. OTRAS INFECCIONES: P. aeruginosa también se asocia con infecciones del sistema
nervioso central, sistema músculo esquelético, tracto gastrointestinal e infección del
tracto urinario observado en pacientes con catéteres vesicales permanentes.
EPIDEMIOLOGIA
Las infecciones por P: aeruginosa se producen sobre todo en pacientes con las defensas
alteradas como son:
 Pacientes con quemaduras.
 Pacientes con enfermedades neoplásicas o alteraciones metabólicas.
 Pacientes sometidos a instrumentaciones y/o manipulación.
 Tratamientos prolongados con antimicrobianos, radioterapia, quimioterapia.
 Drogadictos intravenosos.
“La transmisión de paciente a paciente a través del personal hospitalario es mas
significativo que su transmisión por aire”
DIAGNOSTICO POR EL LABORATORIO.
TINCION DE GRAM: Bacilos gram negativo.
CULTIVO: Crece bien en agar sangre con colonias grandes, en forma de “ojo” de
pescado,color blancogrisaceas.
En agar MacConkey con colonias lactosa negativa, pequeñas.
En agar Muller Hinton P. aeruginosa produce un pigmento visible llamado piocianina.
IDENTIFICACION: Se realiza mediante la prueba de la citocromooxidasa que da positiva.
• Inoculación en SIM para observar movilidad.
Inoculación en agar TSI cuya lectura es K/K lo que demuestra que no hay proceso de
fermentación en este medio de cultivo.
Prueba de OXIDACION FERMENTACION (O-F): Se usa el medio de cultivo denominado
O-F que contiene glucosa y azul de bromotimol como indicador de pH. Como la
mayoría de los Bacilos gram negativos No fermentadores producen ácido sumamente
débil. Este medio contiene una concentración relativamente mayor de hidratos de
carbono para aumentar la producción de ácidos permitiendo que estos ácidos se
difundan por todo el medio, facilitando la visualización del viraje del indicador de pH.
Técnica para realizar la prueba OF: Se usan dos tubos que se inoculan por picadura y a
uno de ellos se le agrega aceite mineral. Tras incubación de 24 horas la producción de
ácido se detecta en el medio por el viraje de color de verde a amarillo.
Son tres las reacciones que se esperan a partir de la utilización de la glucosa en este
medio:
-.Proceso fermentativo de la glucosa: Si el tubo cerrado (con aceite mineral) y el tubo
abierto viran a amarillo, o sea reacción ácida en ambos tubos.
-.Proceso oxidativo de la glucosa: Si sólo el tubo abierto tiene reacción ácida.

6. -.No se utiliza la glucosa: Ninguno de los dos tubos presenta reacción ácida.
REPASO
Complete los siguientes cuadros y flujograma con el fin de reforzar el aprendizaje.
ESPECIE Gram Oxidasa Agar TSI Comportamiento
en agar Mac
Conkey
Enterobacterias
P.aeruginosa