Microooo

1. Curso de
MICROBIOLOGIA
Q.F. Luis Fernandez

2. La microbiología
Es la rama de la biología encargada del estudio de los microorganismos,
seres vivos pequeños (de origen griego mikros "pequeño“, bios, "vida" y
logía, “tratado”), también conocidos como microbios o Microorganismos.
Es la ciencia de la biología dedicada a estudiar los organismos que son sólo
visibles a través del microscopio: organismos procariotas y eucariotas
simples.

3. Bacteriología
Ficología
Micología
Protozoologia
Parasitología
Virología
La microbiología

4. La microbiología
Definiciones
Anticuerpo
• Un anticuerpo, también
llamado
inmunoglobulina, es una
proteína producida por el
sistema inmunitario
como respuesta a la
detección de la presencia
de una sustancia
percibida como ajena al
organismo.
Comensal
• El término comensalismo
hace referencia a un tipo
de relación entre dos
organismos diferentes
que «comparten mesa».
En este tipo de relación,
ninguna de las partes
saca provecho de la otra
ni se provocan perjuicio
mutuo alguno. Se trata
por tanto de una relación
neutra.
Disbiosis
• También denominada
disbacteriosis, hace
referencia a un
desequilibrio en el
número o tipo de
colonias microbianas que
han colonizado al
hombre. Se da más en el
tracto digestivo, pero
puede producirse en
cualquier parte en la que
haya una superficie
expuesta o una
membrana mucosa. La
disbiosis pude afectar a
la digestión, absorción de
nutrientes, producción
de vitaminas y control de
microorganismos
dañinos.

5. La microbiología
Definiciones
Enterotipo
• La comunidad
microbiana asentada
en nuestro intestino
es una combinación
única de diferentes
tipos y cantidades de
bacterias. No se trata
de una mezcla
bacteriana
permanente, sino de
un conjunto en
constante evolución
que puede verse
influenciado por
nuestra dieta, factores
ambientales,
tratamientos
farmacológicos, etc.
Fermentación
• Se trata de un proceso
químico por el cual un
organismo convierte
el azúcar y los
carbohidratos
presentes en los
alimentos en ácido o
alcohol.
Flora intestinal
• Nombre que recibían
antiguamente las
comunidades
bacterianas alojadas
en nuestro intestino.
Los investigadores
prefieren emplear el
término de
microbiota intestinal,
ya que las bacterias
no pertenecen al
mundo vegetal.

6. La microbiología
Definiciones
Probiótico
• Según la definición
del 2001 de la OMS y
la FAO, los
probióticos son
«microorganismos
vivos que, cuando se
administran en la
cantidad adecuada,
confieren beneficios
de salud al
huésped.»
Normalmente, se
consumen en
alimentos
fermentados como
los yogures.
Prebiotico
• Los prebióticos son
componentes
funcionales no
digeribles de los
alimentos (como
algunos tipos de
fibras) que estimulan
la actividad y el
crecimiento de
ciertos grupos
específicos de
bacterias, como las
bifidobacterias y las
bacterias lácticas.
Simbiosis
• Se llama simbiosis a
la relación
establecida entre
dos organismos que
se necesitan
mutuamente para
sobrevivir. Las
bacterias tienen una
larga historia de
simbiosis. Han
evolucionado
conjuntamente en
simbiosis con otros
microbios y con sus
huéspedes.

7. La microbiología
Principios Básicos de Rotulación y Almacenamiento
• Cancerígenos y Teratogénicos
• Mutagénicos
• Corrosivos e Inflamables
Nivel de
Riesgo
• Envases de Plástico
• Rotulación de Corrosivo
• Ubicación en los Estantes Bajos
Almacena
miento de
Álcalis
• Envases de Vidrio
• Rotulación de corrosivo
• Ubicación en los estantes bajos
Almacena
miento de
Ácidos

8. La microbiología
Principios de Bioseguridad
Se considerara todas las muestras que ingresen al
laboratorio como de alto riesgo contaminante
Se informara por escrito al profesional a cargo del
laboratorio de cualquier accidente o exposición por
mas leve que sea
Se informara al personal del laboratorio sobre las
reglas para trabajar con agentes patógenos y los
riesgos que implica su mala praxis
De ser factible se realizara la inmunización del
personal que labore en dicha institucion

9. La microbiología
BPL
El acceso a los laboratorios debe ser restringido
Para la manipulación de cepas se deberá utilizar guantes de un solo
uso
Se debe proveer al personal indumentaria adecuada para su trabajo como
mandiles, tocas, lentes de seguridad, mascarillas o mascaras adecuadas
entre otros
No utilizar zapatos abiertos, sandalias, tacones u otro similar
No esta permitido bebes, comer, fumar o masticar en las
instalaciones del laboratorio
Prohibido pipetear con la boca, siempre se deberá usar propipeta
Siempre se deberá trabajar con alcohol de 70° y para limpieza de
ambientes solución de hipoclorito de sodio
En todos los sectores deberá haber bolsas de determinado color (por
ejemplo negras) para el descarte de residuos comunes, recipientes con la
etiqueta de riesgo biológico y bolsas de otro color (por ejemplo, rojas)

10. La microbiología
Se debe disponer de cámaras de bioseguridad biológica mínimo
de clase II en las áreas de procesamiento de materiales, estudios
microbiológicos, micobacterias, procesamiento de cultivos, entre
otros procesos críticos
Cámara de Bioseguridad

11. La microbiología
El Microscopio

12. La microbiología
• El revólver no está girado totalmente
• El diafragma del condensador está totalmente
cerrado o totalmente descentrado
Queda el campo
oscuro o con muy poca
luz
• El cubreobjetos está hacia abajo.
• El cubreobjetos es muy grueso para un objetivo
de gran aumento
No se puede enfocar la
muestra preparada
• La lente frontal del objetivo está mojada o sucia.
• La lente superior del ocular está húmeda o sucia
La imagen aparece
velada y no se puede
enfocar bien
• El diafragma del condensador está totalmente
abierto. Cerrar hasta que pasen 2/3 o 1/4 del haz
de luz
Aunque el microscopio
está enfocado, no se
observan detalles
Errores en Microscopia

13. La microbiología
• Hay que abrir más el diafragma de la lámpara
• Con objetivo de poco aumento: Hay que quitar la lente
frontal del condensador
El campo visual
no está iluminado
completamente
• El diafragma del condensador está demasiado cerrado y se
enfocan rayas o suciedades del cubre y del portaobjetos
• Las lentes del ocular están sucias. Al girar el ocular, las
manchas también se desplazan.
En la imagen
aparecen
manchas.
• Ha llegado a su posición tope. Hay que llevarlo al medio y
mover el macro
• La grasa se ha endurecido
El movimiento del
micrométrico no
sigue más
Errores en Microscopia

14. La microbiología
Bioseguridad, Toma de
Muestra
Consideraciones
Generales
Se deberá evitar la contaminación del material obtenido con la
microbiota del paciente
El material recogido debe ser representativo del proceso infeccioso
El paciente deberá cumplir con los requerimientos previos para la toma
de muestra
Consideraciones
Generales

15. La microbiología
Muestras
Aerobias
•Frasco Estéril
•Tapa Rosca
•Medio Aerobio
(Atmosfera
convencional)
Muestras
Anaerobias
•Frasco Estéril
•Tapa Rosca
•Medio
Anaerobio
(Medio TAB)
Consideraciones de
Muestreo
Dejar a temperatura ambiente el menor tiempo posible

16. La microbiología
Muestra de Abscesos (Pus)
• El muestreo se realiza mediante la punción y según el caso, con
la muestra obtenida se inocula un frasco de transporte
anaeróbico o se transfiere en un tubo seco estéril de tapa rosca.
Muestra de Punción y aspiración de heridas
• Se efectúa la punción del borde externo de la herida y, según el
caso, por piel sana, se inocula un volumen mínimo de solución
fisiológica estéril y con el líquido de lavado obtenido se inocula
un frasco de transporte anaeróbico o se transfiere en un tubo
seco estéril de tapa rosca.

17. La microbiología
Hisopados nasales
• Tomar muestra de ambos orificios de la nariz, introduciendo
un hisopo estéril y rotándolo. Este hisopo, luego, se debe
introducir en un tubo con solución fisiológica.
Hisopados axilares, perianales o rectales
• Tomar muestra rotando un hisopo estéril por ambas axilas,
por el margen anal-piel (perianal) o en el caso de hisopados
rectales introducirlo en el recto. Este hisopo, luego, se debe
introducir en un tubo con solución fisiológica o medio de
transporte si fuera el caso

18. La microbiología

19. La microbiología

20. La microbiología

21. La microbiología
Son considerados microbios todos los seres vivos microscópicos, estos
pueden estar constituidos por una sola célula (unicelulares), así como
pequeños agregados celulares formados por células equivalentes (sin
diferenciación celular); estos pueden ser eucariotas (células con núcleo) tales
como hongos y protistas, procariotas (células sin núcleo definido) como las
bacterias].
PROCARIOTA EUCARIOTA

22. La microbiología

23. La microbiología
Bacilos Gram negativos
Dentro de los bacilos gram negativos anaerobios facultativos fermentadores de
glucosa, están comprendidas las siguientes familias patógenas para el ser Humano
Enterobacteriaceae
Vibrionaceae
Aeromonadaceae

24. La microbiología
Enterobacterias
ALGUNAS CARACTERISTICAS PRINCIPALES
Los miembros de esta familia son bacilos gram negativos, de longitud
variable.
Son móviles por flagelos peritricos (Ejm: Proteus mirabilis) o no móviles
(Ejm: Klebsiella, Shigella).
No son exigentes en sus requerimientos nutricionales y desarrollan en
medios con extracto de carne o peptona, sin necesidad de la adición de
NaCl u otros suplementos y crecen bien en agar Mac Conkey.
Son aerobios y anaerobios facultativos por lo que crecen bien en aero y
anaerobiosis.

25. La microbiología
Enterobacterias
HABITAD NATURAL
Esta familia se encuentra ampliamente distribuidos en la naturaleza, en
plantas y suelo, agua e intestino de humanos y animales.
Algunas especies ocupan un nicho ecológico muy limitado: por ejemplo,
Salmonella entérica serovar Typhi se encuentra en aguas y causa fiebre
tifoidea sólo en humanos.
Otras causan enfermedades humanas de distinto tipo. Pueden colonizar
asintomáticamente el intestino.
Pero también producen infecciones urinarias, del tracto respiratorio,
septicemia, entre otros.

26. La microbiología
Enterobacterias
Patologías
Humanas
Abscesos
Neumonías
Meningitis
Septicemias
Infecciones en
heridas
Tracto Urinario
Tracto Digestivo
Muchos de estos
también son
componentes
importantes de la
microbiota
intestinal normal

27. La microbiología
Bacilos Gram negativos - Enterobacterias
Enterobacterias–Problemas Gastrointestinales
Enterobacterias – Problemas en otros sitios

28. La microbiología
Bacilos Gram negativos - Enterobacterias
Enterobacterias – Problemas Gastrointestinales
Enterobacterias – Problemas en otros sitios

29. La microbiología
Sin embargo la microbiología tradicional se ha ocupado especialmente de los
microorganismos patógenos entre bacterias, virus y hongos, dejando a otros
microorganismos en manos de la parasitología y otras categorías de la
biología.
Escherichia coli

30. La microbiología - Escherichia coli
Escherichia coli coloniza el intestino del hombre
pocas horas después del nacimiento y se considera
de flora normal
Existen descritos seis grupos de E. coli productora
de diarrea:
1. enterotoxigénica (ETEC)
2. Enterohemorrágica (EHEC)
3. Enteroinvasiva (EIEC)
4. Enteropatógena (EPEC)
5. Enteroagregativa (EAEC)
6. Enteroadherente (DAEC).
La bacteria se puede aislar e identificar tradicionalmente
con base en sus características bioquímicas o serológicas,
pero también se pueden estudiar sus mecanismos de
patogenicidad mediante ensayos en cultivos celulares o
modelos animales

31. La microbiología - Escherichia coli
E. coli Bacilo gram negativo
Anaerobio facultativo
Familia de las
Enterobacterias

32. La microbiología - Escherichia coli

33. La microbiología - Escherichia coli

34. La microbiología - Escherichia coli
E. coli enterotoxigénica
Las ETEC colonizan la mucosa
del intestino delgado por medio
de pilis o fimbrias que tienen
diversas formas denominadas
CFA (colonization factor
antigens), siendo su principal
mecanismo de patogenicidad la
síntesis de alguna o ambas
enterotoxinas llamadas toxina
termolábil (LT) y toxina
termoestable (ST).

35. La microbiología - Escherichia coli
E. coli enterotoxigénica
Las cepas ETEC son
una causa frecuente de
diarrea en lactantes de
países en desarrollo, así
como la causa mas
común de diarrea en
individuos de países
industrializados que
viajan a zonas menos
desarrolladas del
mundo.
Epidemiología
Presenta de 8 a 12
evacuaciones al día por
un periodo de 4 a 5 días.
Las cepas de ETEC son
una causa importante de
diarrea en niños
menores de 5 años de
edad y la causa mas
frecuencia de diarrea del
viajero.
Cuadro
Clínico

36. La microbiología - Escherichia coli - enterotoxigénica
Diagnostico
Se usan equipos comerciales para detección de la toxina LT. Las colonias sospechosas de E. coli se
suspenden en una solución extractiva por 30 minutos a 37ºC y luego se le realiza una prueba de
coaglutinación para detectar la toxina

37. La microbiología - Escherichia coli
La capacidad toxigénica de las
cepas es necesaria para que el
paciente desarrolle colitis
hemorrágica y diarrea con
sangre, ya que la citotoxina STX
es el principal mecanismo de
patogenicidad de EHEC y su
síntesis está relacionada con la
presencia del bacteriófago STX,
que está insertado en el
genoma.
E. coli enterohemorrágica

38. La microbiología - Escherichia coli
E. coli enterohemorrágica
Se da en países de
clima templado como
USA, Canadá,
Inglaterra, Argentina y
Japón. Los serotipos
involucrados mas
comúnmente son: O26,
O111, O121, O145 y
O157
Epidemiología
Colitis hemorrágica:
Diarrea de inicio brusco
con dolor abdominal.
Las evacuaciones
líquidas se acompañan
de una descarga
hemorrágica. Síndrome
urémico hemolítico.
Cuadro Clínico

39. La microbiología - Escherichia coli - enterohemorrágica
Diagnostico
El serotipo más frecuente es el O157:H7. Las bacterias de este serotipo no fermentan el sorbitol, o lo hacen
lentamente, y por ello se las identifica en el agar MacConkey sorbitol. Por el contrario, la mayoría de las
bacterias que se encuentran en heces, fermentan el sorbitol, mientras que EHEC O157:H7 no lo hace
A las colonias incoloras en este medio se les realizan pruebas bioquímicas confirmatorias de E. coli (TSI, LIA,
SIM) y se les efectúa serología para detectar el antígeno O 157
Si la serología es positiva, se completa la marcha con ODC, citrato, ß-glucuronidasa y se efectúa la detección
del antígeno H7. Si la serología es negativa y las pruebas bioquímicas corresponden a Escherichia coli, se
realiza la prueba de ß-glucuronidasa, para descartar la presencia de una EHEC

40. La microbiología - Escherichia coli - Enteropatógena
EPEC fue el primer grupo que se identificó serológicamente y se asoció con casos de
diarrea en infantes, siendo la adherencia su principal factor de patogenicidad. El
proceso de adherencia íntima entre la bacteria y la membrana de las células del
epitelio intestinal, seguida de la destrucción de la microvellosidad, con polimerización
de actina, que lleva a la alteración del citoesqueleto en el sitio de la unión de la
bacteria, debido al aumento de los niveles de calcio intracelular y de proteína cinasa C,
ha sido denominado adherencia y esfacelamiento

41. La microbiología - Escherichia coli
E. coli Enteropatógena
Se presenta como una
enfermedad de niños
menores de 2 años.
En México, Brasil y África
del sur entre el 30 y 40%
de las diarreas son
producidas por EPEC.
Epidemiología
Afecta la mucosa intestinal.
Perdida de disacaridasas.
Produce diarrea secretora y
se puede asociar con fiebre
y sino se controla conduce a
deshidratación y finalmente
la muerte.
Cuadro
Clínico

42. La microbiología - Escherichia coli - Enteropatógena
Diagnostico
La investigación se realiza en casos muy puntuales: neonatos, lactantes menores de un año,
cardiópatas, brotes intrahospitalarios o diarreas crónicas severas, como por ejemplo, en los
pacientes con SIDA.
Comprenden un grupo de 21 serotipos de E. coli. Se utilizan primero antisueros polivalentes y luego
los monovalentes.

43. La microbiología - Escherichia coli - Enteroinvasiva
El grupo EIEC y Shigella spp están relacionados genética y bioquímicamente ya que son
descarboxilasa negativas, no móviles y lactosa negativas. El mecanismo de
patogenicidad de EIEC es la invasión del epitelio del colon; para ello el primer paso es
la adherencia de la bacteria a las vellosidades de la mucosa requiriendo de mucinasa y
adhesinas, para después entrar por endocitosis a la célula, y posterior multiplicación
de la EIEC dentro de la célula y diseminación a células sanas adyacentes

44. La microbiología - Escherichia coli
E. coli Enteroinvasiva
Las cepas EIEC se asocian más
con brotes que con casos
aislados, en los cuales la
transmisión puede ser de
persona a persona, por
ingestión de alimentos y agua
contaminada, convirtiéndose
en un patógeno importante en
niños mayores de seis meses
Epidemiología
Los síntomas característicos en
personas infectadas por EIEC son
diarrea acuosa, con sangre y
moco, pero algunos casos sólo
presentan diarrea, ésta en
ocasiones es indiferenciable de
la que produce ETEC.
Cuadro
Clínico

45. La microbiología - Escherichia coli - Enteroinvasiva
Diagnostico
El diagnóstico de EIEC se hace por prueba in vivo como la de Sereny, que es la inoculación de un cultivo puro
de la bacteria en un ojo de un cobayo en el cual después de 24 a 96 h se produce una ulceración en el ojo,
pero también hay métodos inmunológicos y moleculares
Estas cepas pertenecen a unos 11 serotipos. Dan negativa la prueba de la lisina y son generalmente inmóviles,
poco sacarolíticas y agasógenas. Algunas veces pueden dar reacción cruzada de aglutinación con el antígeno
O de Shigella
Recientemente, se ha propuesto una prueba de enzimoinmunoensayo, para detectar las proteínas de
membrana externa responsables de la invasión y el empleo de sondas, para detectar los genes que las
codifican

46. La microbiología
Shigella
Shigella
Enterobacteria
ceae
Gram
negativos
No
Esporas
No
móviles

47. La microbiología - Tipos
SHIGELLA
Boydii
Dysenteriae
Flexneri
Sonnei
SEROGRUPO A
SEROGRUPO B
SEROGRUPO C
SEROGRUPO D
Shigella

48. La microbiología - Habitad
El intestino humano es reconocido como el hábitat y
reservorio natural de Shigella spp
También se ha aislado de primates, como monos y
chimpancés.
Shigella se transmite en forma directa por vía fecal-oral en condiciones
higiénicas deficientes y la infección puede adquirirse por ingesta de agua
o alimentos contaminados con heces humanas
Shigella

49. La microbiología – Dosis Infectiva
La dosis infectiva es muy baja, ya que 10 a 100
microorganismos son suficientes para causar enfermedad
Distintos estudios postularon que esto podría atribuirse
parcialmente a la presencia de sistemas de resistencia al ácido que
permiten la supervivencia en el ambiente del estómago
Se ha demostrado que Shigella spp. es capaz de inhibir la expresión de
péptidos antimicrobianos, que se producen constantemente en la
mucosa del tracto intestina
Shigella

50. La microbiología - Morbilidad y Mortalidad
La morbilidad y mortalidad asociadas a las infecciones por
Shigella spp. son un problema importante de salud en el mundo,
especialmente en países en desarrollo, donde las condiciones
sanitarias son inadecuadas
Shigella

51. La microbiología - Patogenia
Puede atravesar el epitelio intestinal
Puede evadir la degradación por
macrófagos
Puede diseminarse a las células
intestinales adyacentes
Shigella

52. La microbiología - Patogenesis
La infección por S. flexneri es un proceso de múltiples etapas.
La bacteria atraviesa el epitelio intestinal, no a través de la membrana apical de los
enterocitos, sino causando su propia internalización por parte de las células M.
Desde allí es translocada a la mucosa intestinal, donde es capturada por los
macrófagos. Las células M son células especializadas que continuamente toman
partículas del lumen y las translocan a la mucosa, donde se dispara la respuesta
inmune

53. La microbiología - Patogenesis
Dentro de los macrófagos, Shigella spp. evade la degradación induciendo un mecanismo
similar a la apoptosis, que desencadena señales proinflamatorias
Las bacterias libres invaden las células epiteliales desde la membrana basolateral, se mueven
en el citoplasma por polimerización de la actina y se desplazan a células vecinas. Las señales
proinflamatorias activan la respuesta inmune innata con células “natural killers” y atracción de
polimorfonucleares (PNM). El influjo de PMN desintegra el epitelio facilitando la invasión de
un mayor número de bacterias. Finalmente los PMN fagocitan y matan a las bacterias
patógenas, contribuyendo a la resolución de la infección

54. La microbiología - Virulencia
Los determinantes de patogénesis de Shigella spp. están codificados en el cromosoma de la
bacteria y en un gran plásmido de virulencia. El plásmido lleva la información genética para la
síntesis de la maquinaria molecular necesaria para la invasión de tejidos y para la
supervivencia intracelular41, 42.
El elemento principal de esta maquinaria es un sistema de secreción tipo III (T3SS), que le
permite a la bacteria translocar un grupo de aproximadamente 25 proteínas efectoras desde
su citoplasma a la célula eucariota, donde interfieren con varios procesos de las células del
hospedero

55. La microbiología - Clínica
Edad de la Persona
Estado Nutricional
Dosis Infectante
Serotipo del Microorganismo

56. La microbiología - Sintomatología
Diarrea Fiebre
Dolores
Abdominales
Disentería
Se han descrito cuadros con convulsiones en niños menores de
2 años con fiebre alta
Algunas personas pueden ser portadoras asintomáticas de Shigella
spp. y transmitir la bacteria a otros pacientes susceptibles

57. La microbiología
Salmonella

58. La microbiología
Salmonella
Salmonella
Enterobacteria
ceae
Gram
negativos
No
Esporas
Móviles
(Peritricos)
Anaerobio Facultativo

59. La microbiología - Tipos
Flagelos

60. La microbiología - Tipos
SALMONELLA
Entérica
Bongori
S.Typhi / S. Paratyphifico
S. Salamae / S. Arizonae

61. La microbiología - Habitad
El intestino humano es reconocido como el hábitat para la
Salmonella spp
El reservorio de las Salmonella (S. Typhimurium y Enteritidis) está
constituido por animales domésticos y algunos salvajes, entre los
cuales están las aves de corral, ganado porcino y bovino, algunos
roedores y mascotas como las tortugas, perros y gatos.
La Salmonella se transmite en forma directa por vía fecal-oral en
condiciones higiénicas malas y la infección puede adquirirse por
ingesta de agua o alimentos contaminados.

62. La microbiología - Dosis Infectiva
La dosis Infectiva es de 10x10(5) a 10x10(8) UFC/g, pero puede ser tan baja como 1 UFC/g
dependiendo de la edad, la salud del huésped y características de la cepa
Las salmonellas son sensibles al calor, pueden sobrevivir en superficies como cerámica,
vidrio y acero inoxidable
Se calcula que la inoculación debe ser superior a un millón de gérmenes
El patógeno tiene la capacidad de resistir el pH del estómago, sales biliares y el peristaltismo, por lo
que coloniza el intestino delgado e invade los ganglios linfáticos mesentéricos, provocando una
infección localizada; la Salmonella evade las defensas intracelulares de las células intestinales sin ser
destruida y comienza a dividirse dentro de fagocitos que se ubiquen en esa zona.

63. La microbiología Morbilidad y Mortalidad
La salmonelosis puede afectar a personas de todas las edades, pero la incidencia y la
gravedad de la enfermedad es mayor en niños pequeños, ancianos y personas
inmunodeprimidas o que padecen enfermedades debilitantes.
Los niños menores de 10 años y las personas inmunodeprimidas parecen tener mayor
riesgo de contraer enfermedades graves de los reptiles.
En países desarrollados como Estados Unidos, se registran aproximadamente entre
500 y 600 casos mortales de salmonelosis por año.
El índice de mortalidad general para la mayoría de las formas de salmonelosis es
inferior al 1%; no obstante, algunas serovariedades o síndromes son más propensos a
causar la muerte. Durante los brotes, aproximadamente el 10% de todos los casos y el
18% de los casos en ancianos terminan en enfermedades invasivas

64. La microbiología - Patogenia
Inicio de la invasión, donde se da la adherencia a células epiteliales del íleon y células M,
esto permite una migración transepitelial hasta llegar al sitio donde se encuentran los
fagocitos. Posterior a esto se induce la fagocitosis tanto por parte de los fagocitos
profesionales, como por aquellos no profesionales, esto se consigue a través de la
expresión de las islas de patogenicidad a Salmonella
Continua con la diseminación del patógeno, siendo posible que la Salmonella ingrese a
vasos linfáticos o sanguíneos, lo que le permite distribuirse en sangre y linfonodos
mesentéricos, desde donde pueden llegar a medula ósea, hígado o bazo; además se sabe
que
La Inflamación, aca los neutrófilos cumplen un papel de importancia tanto en el proceso
inflamatorio, como en la diarrea. Las células infectadas producen citoquinas que atraen
células polimorfonucleares (PMN) que liberan prostaglandinas capaces de elevar los
niveles de cAMP, estas producen como efecto final una interrupción de la absorción de
Na+ y el incremento de la secreción de Cl-, y esto lleva a una pérdida de agua por parte de
la célula
1
2
3

65. La microbiología - Patogenia
S. entérica puede permanecer de forma crónica en
las células del sistema mononuclear fagocitario
hasta por un año, posterior a la primoinfección
La enteropatogénesis ocasionada por el Salmonella y la diarrea que se
manifiesta a partir de ella se ha atribuido a la expresión de las proteínas
SipA y SipC, que se manifiestan mientras el patógeno se encuentra en las
células M y en enterocitos, lo cual ocurre posterior a 15 minutos de la
inoculación; este fenómeno precipita el inicio del proceso inflamatorio que
luego de una hora a logrado atraer suficientes PMN, favoreciendo el que
estos activen vías apoptoticas en las células del epitelio intestinal, en un
tiempo que oscila entre una hora y tres horas; siendo este el gatillo para el
inicio del proceso diarreico

66. La microbiología - Virulencia
El antígeno Vi parece no actuar
como un prerrequisito de invasión a
las células epiteliales, sino más bien
como un factor protector de los
antígenos O contra la acción de los
anticuerpos o el complemento
Por otra parte, se ha demostrado que
el antígeno O aumenta la virulencia de
la bacteria cuando la infección ocurre
por una ruta en la cual éstas son
expuestas a macrófagos capaces de
matar a la Salmonella.
En varias especies de Salmonella se
ha demostrado que existe un
plásanido necesario para causar la
infección más allá de las placas de
Peyer del intestino, en los nódulos
linfáticos mesentéricos y en el bazo
han propuesto que los plásmidos de
virulencia están involucrados en la
adherencia e invasión de las células de
mamíferos, y que estos plásmidos
pueden integrarse en el cromosoma
bacteriano, lo que evita la expresión
del fenotipo de virulencia.

67. La microbiología - Virulencia – Control de la Capacidad
Infectante
Alimentos
sanitizados
Contaminación
Cruzada de
Alimentos
Higiene de
Materiales
Alimentos
cocidos
superior a 70
°C

68. La microbiología - Clínica
Edad de la Persona – Niños y
Ancianos
Pacientes Inmunocomprometidos
Dosis Infectante
Características de la Cepa

69. La microbiología - Clinica Importante
Gastroenteritis:
Casi todos los serotipos de salmonella del grupo I pueden producir la
gastroenteritis, siendo los más frecuentemente aislados la S. typhimurium, S.
enteritidis.
El sindrome inicia 48 horas posteriores al consumo de alimentos
contaminados; en la mayoría de las personas inmunocomprometidas el
cuadro dura entre 4-8 días, en inmunosupresion o aquellos que presenten
alguna condición concomitante la clínica se vuelve más severa.
Después de la resolución de la condición el promedio de tiempo como
portador es de 4 a 5 semanas; en el caso de neonatos se ha visto que el
tiempo como portador es de hasta 6 meses.
Los principales síntomas asociados a esta condición son: dolor abdominal
intenso, diarrea, fiebre de 38,5 °C, náuseas y vómito

70. La microbiología - Clinica Importante
Bacteremia:
Esta es ocasionada principalmente por Salmonella del grupo I, y se consideran
altamente invasoras la S. choleraesuis y la S. dublin, además muy próximas a
estas están todas las S.typhimurium y S. enteritidis.
La Salmonella parece tener especial afinidad por los tejidos endoteliales, por lo
que la infección de la aorta asociada a la fístula aorto-duodenal es una condición
bien conocida; la infección por salmonella de los grandes vasos lleva a la
formación de aneurismas micóticos

71. La microbiología - Clinica Importante
Fiebre entérica:
Dentro de las fiebres entéricas, la fiebre tifoidea es la más conocida y la más
severa, esta es producida por la Salmonella typhi. Otros síndromes menos
severos son conocidos como fiebre paratifoidea, y se asocian a S. paratyphi A y C
Existe un período de incubación de 21 días (10 en promedio) y las
manifestaciones clínicas en pacientes no tratados se dividen en semanas de
acuerdo a su evolución.
Durante la primera semana se observa fiebre progresiva y escalonada, asociada a
cefalea intensa, anorexia y astenia; entre la semana 2 y 3 la fiebre se estabiliza y
se vuelve continua, la cefalea es persistente y el estado de conciencia se altera, el
paciente entra en un estado de sopor (tiphus), aparecen síntomas meníngeos,
lesiones en la piel del tronco de tipo maculo papulosa de color salmón (manchas
rosadas), en cerca del 50 % de los casos se presenta hepatoesplenomegalia

72. La microbiología - Sintomatología
Diarrea
Fiebre y Dolor
de cabeza
Dolores
Abdominales
Nauseas y
Vómitos
comienzan entre 6 y 72 horas después de la exposición y duran de 4 a 7
días, dependiendo de factores del huésped

73. La microbiología
Streptococcus pyogenes

74. La microbiología - Streptococcus pyogenes
Bacteria gram +, con presencia de una capa de peptidoglucanos alrededor de su
membrana citoplasmática.
Entre sus principales características se encuentran la forma de coco esférico, de
1 a 2 μm de diámetro, está ordenado en cadenas cortas, no es móvil, no
produce esporas, es anaerobio facultativo

75. La microbiología - Streptococcus pyogenes

76. La microbiología
Estreptococo
Esféricas u
Ovoides
Gram
Positivos
No
Esporas
Inmóviles
Streptococcus pyogenes
Patógeno

77. La microbiología - Tipos
Los estreptococos se dividen en diversos grupos según su apariencia en los cultivos de laboratorio y
sus diferentes componentes químicos.
Estreptococos
Grupo A
Grupo B
Grupo D
Viridians

78. La microbiología - Habitad
Los únicos reservorios conocidos en la naturaleza de S. pyogenes son la piel y las
membranas mucosas del ser humano.
La portación asintomática es mayor en niños (15%-26%) que en adultos (5%). S.
pyogenes es claramente un patógeno humano.
La infección natural en animales es muy rara (prácticamente inexistente) y la
infección experimental requiere de inóculos extremadamente elevados. En institutos
que atienden pacientes crónicos la colonización puede a llegar al 17%
La bacteria puede encontrarse en el aire y en objetos inanimados, como polvo, ropa,
muebles en sitios donde hay pacientes infectados con S. pyogenes.
Puede sobrevivir en objetos inanimados hasta 4 semanas.

79. La microbiología Morbilidad y Mortalidad
Las personas que se
encuentran mayormente
afectadas son aquellas que se
encuentran
inmunocomprometidas
(diabetes mellitus, VIH/Sida,
entre otros).
Como también las que tienen
alguna vía de entrada por
trauma, quemadura y que se
encuentran en edades en
rangos menores de 5 años y/o
mayores de 60 años
Porque la diabetes mellitus genera
inmunosupresión a través de diversos
mecanismos:
Disminución de síntesis y liberación de
interleucina 1 e interleucina 6 (IL-1, IL-6) por
monocitos y macrófagos en respuesta a los
lipopolisacáridos bacterianos.
Disminuye la quimiotaxis y la capacidad fagocítica
de las células polimorfonucleares (PMN).
Disminuye los niveles del complemento,
especialmente C4
Es importante mencionar que la DM retarda la
cicatrización, lo que permite la entrada a un mayor
número de patógenos, por lo que cualquier herida
puede representar una vía de entrada para

80. La microbiología - Patogenia
Una vez dentro de la célula y al haber inhibido al sistema inmune del huésped
continúa el proceso de patogénesis mediante la secreción de sus toxinas y
otras enzimas entre las cuales cabe resaltar:
la estreptocinasa, enzima proteolítica que transforma el plasminógeno a
plasmina; de esta forma, propicia un estado anticoagulante.
La hialuronidasa, que degrada el ácido hialurónico del tejido conectivo.
La estreptolisina O que es una citolisina dependiente de colesterol, la cual
forma poros en las membranas celulares e inhibe la maduración de los
autofagosomas y con ello la fagocitosis.

81. La microbiología - Patogenia
La estreptolisina S que es una toxina reconocida como una de las
principales claves de la patogenia cutánea, ya que no sólo produce la
beta hemólisis de los eritrocitos, si no también en el rompimiento de las
uniones intracelulares en la piel, además de provocar apoptosis de los
macrófagos, neutrófilos y en últimos estudios se ha demostrado que
también está involucrada en la necrosis de los queratinocitos.
En este estudio se encontró que esta toxina acelera la apoptosis de los
queratinocitos después de 6 horas de infección epitelial.
Los queratinocitos son las células principales de la piel presentes desde
la capa basal hasta la capa cornea, por lo que su destrucción representa
una importante entrada para infecciones más profundas y aparición de
bacteremias.

82. La microbiología - Virulencia
estreptoquinasa (lisis de coágulos de fibrina)
hialuronidasa
estreptolisina O (lábil al oxígeno)
estreptolisina S (estable al oxígeno)
exotoxina pirogénica estreptocócica (Spe)
S. pyogenes secreta
factores de virulencia
al medio extracelular
como:

83. La microbiología - Virulencia
estreptoquinasa (lisis de coágulos de fibrina)
hialuronidasa
estreptolisina O (lábil al oxígeno)
estreptolisina S (estable al oxígeno)
exotoxina pirogénica estreptocócica (Spe)

84. La microbiología - Virulencia
Los estreptococos pueden evadir la fagocitosis inhibiendo la opsonización al
destruir o inactivar quimiorreceptores derivados del complemento y opsoninas por
parte de la C5a peptidasa
La proteína M, en ausencia de anticuerpos específicos de tipo es capaz de inhibir
la fagocitosis por parte de polimorfonucleares y monocitos.
También la cápsula de ácido hialurónico presente en algunas cepas mucoides
es un factor antifagocítico

85. La microbiología - Virulencia
La estreptolisina O es una citolisina lábil al oxígeno que se une al colesterol de
las membranas celulares de las células eucarióticas (entre ellas los fagocitos)
contribuyendo a su lisis por un mecanismo osmótico.
En el huésped carente de inmunidad, la estreptolisina O, la exotoxina A, y otros
componentes estimulan a las células humanas para producir el factor de necrosis
tumoral y la interleuquina 1.
Estas citoquinas inducen la hipotensión y estimulan la leucostasis y así dan lugar
al shock, que se caracteriza por daño microvascular, falla multiorgánica y en
algunos casos conduce a la muerte.

86. La microbiología - Factores de Virulencia
Streptococcus pyogenes

87. La microbiología - Clínica
Edad de la Persona – Niños y
Ancianos
Pacientes Inmunocomprometidos
Diabetes Mellitus
Serotipo

88. La microbiología - Clinica Importante
Las principales lesiones cutáneas generados por S. pyogenes son:
La celulitis, la erisipela y la fascitis necrotizante
La erisipela
Forma de infección superficial donde la infección por S. pyogenes se limita a las
capas superficiales de la epidermis y la dermis. Las manifestaciones clínicas (zona
eritematosa limitada, con lesiones de aspecto circular y brillante por edema)
estarían generadas por el inicio de la respuesta innata, donde el patógeno ya ha
sido detectado con la consecuente respuesta inflamatoria y secreción de citocinas,
además de toxinas y enzimas, como la hialuronidasa generadas por el S.
pyogenes

89. La microbiología - Sintomatología
La erisipela se caracteriza por manifestarse como:
1. Una placa eritematoedematosa, brillante y dolorosa
2. Fiebre y síntomas generales.
3. Puede aparecer en cualquier zona del cuerpo donde se encuentre la lesión o
herida que permite la entrada a la piel lesionada. Los sitios de mayor afección
son las piernas, dorso de los pies y cara; en algunos casos,
4. la persona puede presentar fiebre de 38ºC a 40ºC antes de que aparezca la
lesión cutánea y ésta se puede diferenciar de una celulitis gracias a las
siguientes características:
a. Las lesiones toman un aspecto circular alrededor del foco de la
lesión.
b. Bordes limitados.
c. Tienen un aspecto brillante edematoso y eritematoso.

90. La microbiología

91. La microbiología - Clínica Importante
Celulitis:
Al igual que la erisipela, la celulitis
puede manifestar síntomas generales
antes de que se den las lesiones
cutáneas. También puede aparecer en
cualquier parte del cuerpo con
predominio en piernas y cara, el área
afectada se manifiesta como una zona
eritemato-edematosa, dolorosa y
caliente; el área de la lesión no tiene
límites definidos y no posee un aspecto
circular de la lesión

92. La microbiología - Clínica Importante
Fascitis necrotizante:
La fascitis necrotizante suele ser, en mayor
medida, una infección polimicrobiana, pero
también puede darse el caso de una infección
monomicrobiana, resaltando entre las bacterias
involucradas a S. pyogenes. La lesión se
caracteriza por una rápida necrosis del tejido
subcutáneo y la fascia, con una mortalidad que
varía desde el 20% hasta el 60%, siendo la DM
el principal factor de mortalidad. La lesión
comienza con una zona eritematosa con
hiperalgesia cutánea, pudiéndose confundir
con una celulitis infecciosa; sin embargo, el
dolor de la fascitis necrotizante es
desproporcional con la herida en cuestión
siendo el motivo principal por el que las
personas acuden a recibir atención médica.

93. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
La tinción de células es una metodología importante generalmente utilizada en
el área de la biología.
Una de las tinciones más conocidas en microbiología es la desarrollada en
1884 por Hans Christian Gram, bacteriólogo danés, quien buscaba diferenciar
entre dos bacterias que causaban neumonía.
Este método ha permitido hacer una clasificación de las bacterias en dos
grandes grupos: Gram positivas y Gram negativas, dependiendo de la
capacidad que tengan para retener el colorante cristal violeta usado en la
tinción.
El método es ampliamente utilizado en los laboratorios de microbiología, por
ejemplo, en el diagnóstico clínico permitiendo elegir al médico el antibiótico a
usar.

94. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM

95. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
GRAM + GRAM -

96. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM

97. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
Durante la tinción, las bacterias Gram positivas se tiñen de morado, mientras
que las bacterias Gram negativas toman una coloración roja. Esto es debido
principalmente a las diferencias estructurales que presentan en su pared. Las
bacterias Gram negativas pierden el colorante cristal violeta con mayor
facilidad que las Gram positivas.
Las células que han perdido el cristal violeta se tiñen de color rojo con la
safranina que actúa como colorante de contraste. Existen algunos cultivos que
darán un resultado negativo en la tinción Gram cuando el cultivo va
envejeciendo, esto es particularmente común en cultivos de Bacillus y
Clostridium.

98. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
GRAM +

99. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
GRAM -

100. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM – PREPARACION DE REACTIVOS
• Solución A: Cristal Violeta, 2 g; etanol 95% (v/v), 20 mL
• Solución B: Oxalato de amonio, 0.8 g; agua destilada, 80 mL
• Mezclar A y B para obtener el reactivo de tinción Cristal Violeta. La solución se deja
reposar durante 24 h y se filtra con papel
Cristal
Violeta
• Yodo, 1.0 g; yoduro de potasio, 2.0 g; agua destilada, 300 mL
• Pulverizar el yodo y el yoduro de potasio en un mortero y agregar agua lentamente
hasta que el yodo se disuelva. Guardar en botellas ámbar, para protegerlo de la luz.
Lugol
• Solución madre: Safranina 2.5 g; etanol 95% (v/v) 100 mL
• Solución de trabajo: solución madre 10 mL; agua destilada 90 mL
Safranina

101. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM – PREPARACION DE REACTIVOS
• Etanol (95%, v/v), 500 mL; acetona, 300 mL
Etanol /
Acetona

102. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
La primera etapa es la preparación de un frotis bacteriano. Un frotis es la
extensión de una muestra o cultivo sobre un portaobjetos para separar lo
más posible los microorganismos, lo cual permitirá obtener una mejor
imagen de la morfología y agrupamiento celular.
La muestra extendida es posteriormente fijada al portaobjeto por calor
para evitar que sea arrastrada por las soluciones de colorantes y lavados
sucesivos.

103. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
Cubrir la preparación del frotis con unas gotas de cristal de violeta durante un
minuto.
Enjuagar suavemente rociando un pequeño chorro de agua sobre la parte
superior del portaobjetos, procurando no desprender la preparación, por
presión del agua.
Después aplique Lugol durante un minuto, lave suavemente con agua. El yodo
es corrosivo evite el contacto con la piel.
Decolorar por 10 segundos con una mezcla de alcohol y acetona (1:1), y
enjuagar rápidamente con agua. Si no se retira rápidamente el decolorante
desteñirá tanto a Gram positivas como Gram negativas.
Posteriormente contrastar con safranina durante 45 segundos, y finalmente
enjuagar con agua.

104. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
Observar al microscopio con el objetivo 100x, agregando aceite de inmersión
para lograr una buena resolución.
Nunca Olvidar que para llegar al objetivo de Recuerde que primero tendrán
100x primero se deberá utilizar alguno de los objetivos de menor aumento.

105. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM
BACTERIAS GRAM + BACTERIAS GRAM -

106. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM

107. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM +
• Responsable de abscesos, dermatitis, infecciones
localizadas y posibles gastroenteritis.
Staphylococcus
aureus
• Causante de infecciones supurativas en el trayecto
respiratorio, así como de fiebre reumática.
Streptococcus
pyogenes.
• Frecuente en casos de meningitis neonatal,
endometritis y neumonía.
Streptococcus
aglactiae.

108. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
• Responsable de neumonías e infecciones en las vías
respiratorias, así como otitis, meningitis y peritonitis.
Streptococcus
pneumoniae
• Bacterias responsables de los tétanos, entran al cuerpo
desde el suelo por traumatismos en las extremidades.
Clostridium
tetani
• Se trata de la conocida bacteria del ántrax, tanto en su
versión cutánea como en la pulmonar.
Bacillus
antracis
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM +

109. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
• Causante del botulismo clásico y el infantil, habita en el
suelo y en los alimentos mal conservados.
Clostridium
botullinum
• Esta bacteria segrega toxinas que destruyen la pared
celular, y es responsable de las gangrenas gaseosas, la
enteritis necrosante y la endometritis.
Clostridium
perfringes
• Usual en infecciones en vías biliares y urinarias, habita en el
colon humano.
Streptococcus
faecalis
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM +

110. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
• Habitante usual del colon humano, está involucrada en las
llamadas “diarreas del viajero”, así como en meningitis
neonatal, sepsis e infecciones urinarias.
Escherichia
coli
• Bacteria responsable de la enfermedad conocida como fiebre
tifoidea, suele transmitirse por vía fecal-oral: contaminación de
aguas, mala disposición de excretas o higiene defectuosa
Salmonella
Typhi
• Peligrosa bacteria causante de meningitis y meningocococemias,
coloniza las vías respiratorias humanas y asciende a las
meninges por vía sanguínea.
Neisseria
meningitidis
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM -

111. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
• Conocidísima por ser la causante de la gonorrea, común
enfermedad de transmisión sexual.
Neisseria
gonorrhoeae
• Suele ocasionar enterocolitis y septicemia con abscesos si
llega a pasar del intestino a la sangre.
Salmonella
enteritidis
• Bacilo usualmente aerobio, es responsable de numerosas
meningitis, otitis, sinusitis, bronconeumonías, celulitis y
artritis séptica.
Haemophilus
influenzae
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM -

112. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
• Responsable de la llamada “fiebre del conejo” o tularemia, se transmite al
hombre mediante vectores (ácaros u otro tipo de exoparásitos) de los
conejos, ciervos y animales semejantes.
Francisella
tularensis.
• Bacilo anaeróbico, transmitido por la mordedura de animales
domésticos infectados, tales como perros y gatos. Se disemina a través de
la piel e infecta el sistema respiratorio, causando también celulitis.
Pasteurella
multocida
• Ocasiona la brucelosis, una enfermedad del ganado que se transmite al
hombre por contacto con los animales o por ingesta de lácteos sin
pasteurizar.
Brucella
abortus.
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM / GRAM -

113. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM - IMPORTANCIA
la tinción de Gram se ha convertido en una de las tinciones diferenciales
más usadas en la Microbiología, como herramienta básica para el
diagnostico preliminar y presuntivo del agente infeccioso.
Esta coloración diferencial clasifica a las bacterias en dos grandes grupos:
Grampositivas y Gram negativas con base a las diferencias estructurales de
sus paredes celulares.

114. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM - IMPORTANCIA
Las características fenotípicas que presentan algunas bacterias contribuyen
a su diagnostico presuntivo: la observación de cocos grampositivos
dispuestos en racimos sugieren la presencia de estafilococos; la disposición
de cocos Grampositivos en cadena indica estreptococos; diplococos
Grampositivos en forma de lanceta o con extremos alargados son
característicos de S. pneumoniae cuando se observan en esputos,
diplococos Gram negativos arriñonados o reniformes son característicos de
las especies de Neisseria, bacilos Grampositivos ordenados en letras chinas
o empalizadas son típicos del Corynebacterim, bacilos Gram negativos
curvos en muestras de heces diarreicas indican especie de Vibrio, o si
también se ven en forma de sacacorchos sugieren especies de
Campylobacter

115. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
TINCIÓN DIFERENCIAL DE GRAM - IMPORTANCIA
Además de proveer al microbiólogo y al clínico las características fenotípicas
de la bacteria en cuanto a tamaño, forma, agrupación y características
tintoriales, esta tinción es importantísima ya que en algunos casos permite la
instauración del tratamiento rápido y oportuno.

116. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - INTRODUCCION
Los medios de cultivo son conjunto de nutrientes, factores de crecimiento
y componentes adicionales que crean las condiciones necesarias para el
desarrollo de los microorganismos.
La diversidad metabólica de los microorganismos es muy variable que la
cantidad de medios de cultivo es enorme, no existe un medio de cultivo
universal adecuado para todos los microorganismos

117. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - COMPONENTES
• Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En el
agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se obtiene
de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a excepción
de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. Un gel de
agar al 1-2% se licua alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40ºC,
dependiendo de su grado de pureza.
AGAR
• Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o vegetales
(p.e. carne, hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor y
posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos
preparados deshidratados son a menudo empleados en la elaboración de los
medios de cultivo. Los más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el
de malta.
EXTRACTOS

118. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - COMPONENTES
• Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y sales
minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de
proteínas animales o vegetales (soja caseína carne, etc.). Las peptonas
son muy ricas en pépticos y aminoácidos, pero pueden ser deficientes en
determinadas vitaminas y sales minerales.
PEPTONAS
• Con frecuencia es necesario añadir a los medios de cultivo de algunos patógenos
sustancias como sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo, sobre
todo para conseguir el primer aislamiento a partir del hospedador. La sangre no puede
ser esterilizada, y por tanto debe de ser obtenida en condiciones asépticas directamente
de un animal sano, y adicionada al medio de cultivo después de que este haya sido auto
clavado. Los fluidos corporales no solo aportan factores de crecimiento sino que también
aportan sustancias que neutralizan a inhibidores del crecimiento de algunas bacterias.
FUIDOS
CORPORALES

119. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - COMPONENTES
• Para mantener el pH dentro del rango optimo del crecimiento
bacteriano a veces, es necesario añadir algunos componentes al medio
de cultivo. Debido a que la mayoría de as bacterias son neutrófilas, se
suelen emplear sales del tipo de los fosfatos bisodicos ò bipotásicos u
otras sustancias como las peptonas para prevenir la desviación del pH.
AMORTIGUADORES
• Con el objeto de poder detectar variaciones en el pH debido a
fermentaciones u otros procesos, se hace necesario a veces añadir
indicadores acido-base que nos lo indiquen.
INDICADORES DE
PH

120. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - COMPONENTES
• Con el objetivo de crear en los medios de cultivo condiciones que
permitan el desarrollo de los gérmenes microaerofilos ò anaerobios se
añaden estos agentes reductores siendo, los mas empleados la cisteína
y el tioglicolato entre otros.
AGENTES
REDUCTORES
• La adición de determinadas sustancias a un medio de cultivo puede
convertirlo en selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal violeta,
sales biliares, azida sódica, telurito potasico, antibióticos, etc., a la
concentración adecuada hará que actúen como agentes selectivos
frene a determinados microorganismos.
AGENTES
SELECTIVOS

121. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
TIPOS MEDIOS GENERALES
MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO
MEDIOS SELECTIVOS
MEDIOS DIFERENCIALES

122. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Por lo general son medios líquidos, pudiendo ser
semisólidos en algunos casos, que contienen sustancias
que estimulan el crecimiento de los microorganismos y
permiten el desarrollo de la población microbiana a
partir de un número reducido de células de
determinados gérmenes que pueden encontrarse en
presencia de otros que, hallándose en condiciones
favorables, pudieran frenar el desarrollo de los primeros
Enriqueci
miento

123. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
A estos medios se le adiciona sustancias para que
solo crezcan ciertas bacterias y estas, al actuar
sobre alguna de las sustancias adicionadas,
permiten observar macroscópicamente ciertas
propiedades de crecimiento que ayudan a
diferenciar sus colonas de otras especies
diferentes.
Diferenci
ales

124. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Toleran el crecimiento de
gran variedad especies de
microorganismos y a la vez
facilitan la identificación de
colonias de interés, de tal
forma garantiza que estén
los nutrientes mínimos
necesarios para su desarrollo.
Generales
En su mayoría son sólidos,
contienen sustancias que
inhiben el crecimiento de
determinados tipos de
microorganismos, o sea,
previene el crecimiento de
especies acompañantes
indeseables.
Selectivos

125. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Mac
Conkey
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y
anaerobios facultativos a partir de muestras clínicas, aguas y alimentos.
Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la
lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los
agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. El agar es el agente
solidificante. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un
viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las
sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

126. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Sangre
Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de numerosos microorganismos. Al ser
suplementado con sangre ovina, permite el crecimiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis.
La infusión de músculo de corazón y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo, que
permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, aún de aquellos
nutricionalmente exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el
agente solidificante. El agregado de 5-10 % sangre ovina desfibrinada estéril promueve el
desarrollo de bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales y la adecuada observación
de las reacciones de hemólisis.

127. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Chocolate
Este medio permite el crecimiento de microorganismos exigentes en sus requerimientos
nutricionales, por ejemplo especies de Streptococcus, Haemophilus y Neisserias
patógenas.
El medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de peptona, tripteína,
extracto de levadura, extracto de corazón y almidón. El agregado de sangre y
suplemento con solvente aporta nutrientes, vitaminas y minerales adicionales. El cloruro
de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante

128. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Sabouraud
Este medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos
patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.
El Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos,
particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo). En el medio de
cultivo, la peptona, la tripteína y la glucosa son los nutrientes para el desarrollo de
microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH
ácido, inhiben el desarrollo bacteriano y favorecen el crecimiento de hongos y levaduras.

129. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
EMB
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de
bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite
el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo microbiano. La
diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos
que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno;
éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias Gram
positivas. El agar es el agente solidificante.

130. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
S-S
Este Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella
spp. y de algunas especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros
materiales en los cuales se sospeche su presencia.
En el medio de cultivo la pluripeptona y el extracto de carne aportan los nutrientes para
el desarrollo microbiano. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el desarrollo de
una amplia variedad de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el
desarrollo invasor del Proteus spp. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable. El
tiosulfato de sodio permite la formación de SH2 que se evidencia por la formación de
sulfuro de hierro. El rojo neutro es el indicador de pH y el agar es el agente solidificante.

131. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Manitol
Salado
Este medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y
diferenciación de estafilococos a partir de diversas muestras.
En el medio de cultivo, el extracto de carne, la peptona de carne y la tripteína,
constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales que promueven el
desarrollo microbiano. El manitol es el hidrato de carbono fermentable. El cloruro de
sodio (que se encuentra en alta concentración) es el agente selectivo que inhibe el
desarrollo de la flora acompañante, el rojo fenol es el indicador de pH y el agar es el
agente solidificante.

132. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Manitol
Salado
Este medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y
diferenciación de estafilococos a partir de diversas muestras.
Se trata de un medio altamente selectivo por la alta concentración salina y diferencial
debido a la capacidad de fermentación del manitol por los microorganismos. Las
bacterias que crecen en un medio con alta concentración de sal y fermentan el manitol,
producen ácidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH del
color rojo al amarillo. Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden
o no fermentar el manitol.

133. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
MEDIOS DE CULTIVO - TIPOS
Agar
Manitol
Salado
Este medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y
diferenciación de estafilococos a partir de diversas muestras.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias
amarillas rodeadas de una zona del mismo color. Los estafilococos que no fermentan el
manitol, se visualizan como colonias rojas, rodeadas de una zona del mismo color o
púrpura. Este medio de cultivo es recomendado para el aislamiento de estafilococos
patogénicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productos farmacéuticos, cosméticos y
otros materiales de importancia sanitaria

134. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Las pruebas bioquímicas permiten determinar las características metabólicas de
las bacterias objeto de identificación. Algunas de estas pruebas son técnicas
rápidas, ya que evalúan la presencia de una enzima preformada y su lectura varia
entre unos segundos hasta unas pocas horas.

135. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Otras pruebas requieren para su lectura
el crecimiento del microorganismo con
una incubación previa de 18 a 48h; a este
grupo pertenecen la mayoría de las
pruebas que detectan componentes
metabólicos o aquellas que determinan
la sensibilidad de un microorganismo a
una sustancia dada tras cultivo en medios
de identificación que contienen el
sustrato a metabolizar.

136. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
No obstante, algunas de estas
pruebas pueden realizarse de forma
rápida tras incubación de unas 2-6h;
en general, se trata de reacciones
enzimáticas cromogenicas o pruebas
convencionales modificadas (hay
discos o tabletas comercializados con
substratos cromogenicas para uso
individualizado).

137. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación preliminar, con lectura inmediata:
Prueba de la Catalasa
La catalasa es un enzima presente en la mayoría de los microorganismos que
poseen citocromos.
Las bacterias que sintetizan catalasa hidrolizan el peróxido de hidrogeno en agua y
oxigeno gaseoso que se libera en forma de burbujas.
El principal objetivo de esta prueba es separar Micrococacceae (positiva) de
Streptococcus spp. y Enterococcus spp. (negativa).

138. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación preliminar, con lectura inmediata:
Prueba de la Catalasa

139. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación preliminar, con lectura inmediata:
Prueba de la Oxidasa
Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de
la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromo oxidasa que activa la
oxidación del citocromo el cual es reducido por el oxígeno molecular
produciéndose agua o peróxido de hidrogeno según la especie bacteriana.
El oxígeno actúa por tanto como aceptor final de electrones en la cadena
transportadora de electrones. Por lo general, el sistema citocromo oxidasa solo se
encuentra en las bacterias aerobias, algunas anaerobias facultativas y,
excepcionalmente, en alguna microaerofila (Vibrio fetus), pero las bacterias
anaerobias estrictas carecen de actividad oxidasa.

140. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación preliminar, con lectura inmediata:
Prueba de la Oxidasa
Asimismo, la presencia de oxidasa va ligada a la producción de catalasa, ya que
esta degrada el peróxido de hidrogeno que se produce como consecuencia de la
reducción del oxígeno y cuya acumulación es toxica.

141. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación preliminar, con lectura inmediata:
Prueba de la Oxidasa

142. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la Hidrolisis del hipurato
Demuestra la capacidad de algunas bacterias para hidrolizar el hipurato de sodio a
acido benzoico y glicina por la acción de la enzima hipuricasa. Como indicador de la
reacción se utiliza ninhidrina. Esta prueba se utiliza en la identificación de
Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Gardnerella vaginalis y Streptococcus
agalactiae.

143. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la β-galactosidasa (ONPG)
Esta prueba demuestra la presencia de la enzima βgalactosidasa. Hay bacterias que a
pesar de poseer enzimas que hidrolizan la lactosa (β - galactosidasas), no pueden
actuar sobre ella porque les faltan las enzimas extracelulares apropiadas
(permeasas). Para conocer si un microorganismo es productor de β-galactosidasa,
basta añadir el compuesto orgánico O-nitrofenil β-D-galactopiranosido (ONPG) que
es incoloro. Si la bacteria posee las enzimas hidrolizantes (β -galactosidasa), el
compuesto se transforma en ortonitrofenol, un derivado cromogenico de color
amarillo. Todas las bacterias fermentadoras lentas de la lactosa son β -galactosidasa
positivas.

144. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la β-galactosidasa (ONPG)

145. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la Aminopeptidasa:
PYR. La L-pirrolidonil-β-naftilamida sirve como sustrato para la detección de
pirrolidonil peptidasa. Se utiliza principalmente en la identificación de Streptococcus
pyogenes y Enterococcus spp. También en la diferenciación de Staphylococcus
lugdunensis de otros estafilocos coagulasa negativa.

146. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la Ureasa.
Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea formando dos moléculas
de amoniaco por acción del enzima ureasa. Esta actividad enzimática es característica
de todas las especies de Proteus y se usa sobre todo para diferenciar este género de
otras enterobacterias que dan negativo o positivo retardado. La prueba también se
utiliza para diferenciar Physobacter phenylpyruvicus de Moraxella spp. Helicobacter
pylori y Brucella spp. también hidrolizan la urea. Esta prueba puede ayudar en la
identificación de Cryptococcus spp. que produce un resultado positivo después de una
incubación prolongada.

147. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de la Ureasa

148. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de Indol
Mediante esta prueba se detecta la liberación de indol en un cultivo bacteriano. Dicha
liberación se debe a la degradación del aminoácido triptófano mediante el enzima
triptofanasa

149. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 6 horas:
Prueba de Indol

150. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de Oxido-Fermentación
Mediante esta prueba se va a determinar si la utilización de los hidratos de
carbono por parte de un microorganismo se realiza por vía oxidativa
(proceso aeróbico, presencia de oxígeno) o por vía fermentativa (proceso
anaeróbico, ausencia de oxígeno).

151. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de Reducción de nitratos.
Sirve para determinar la
capacidad de un organismo de
reducir el nitrato en nitritos. Se
utiliza para asignar bacterias a la
familia Enterobacteriaceae, en la
diferenciación de Moraxella
catarrhalis del género Neisseria y
en la identificación de bacilos
grampositivos aerobios.

152. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de Rojo de metilo
El rojo de metilo es un indicador de pH. Actúa entre pH 4,2 y 6,3 variando
desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Mediante esta prueba se
comprueba la capacidad de un microorganismo de producir y mantener
estables los productos terminales ácidos de la fermentación de la glucosa
por la vía de la fermentación acido mixta. Se utiliza como parte de la
identificación a nivel de especie de los bacilos entéricos gramnegativos.

153. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba Voges-Proskauer.
Permite observar si el microorganismo
fermenta la glucosa por la vía
butanodiolica. Si es así, se forma un
producto intermedio (acetoina) que
forma un complejo de color rojizo con
el α-naftol. Se usa en la identificación a
nivel de especie de bacilos entéricos
gramnegativos, Aeromonas spp., y
Vibrio spp.

154. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de Agar hierro de Kligler
Mediante esta prueba se puede determinar:
 La capacidad de un microorganismo de metabolizar un hidrato de carbono
específico (en este caso glucosa, lactosa o ambas) incorporado en un medio de
crecimiento básico.
 Producción o no de gases: CO2 e H2 como productos finales del metabolismo de
los hidratos de carbono.
 Producción de acido sulfhídrico (SH2). El medio de Kligler contiene como hidratos
de carbono la glucosa y la lactosa. Existe otro medio, el triple sugar iron (TSI) que
posee un tercer hidrato de carbono, la sacarosa.

155. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Fermentación de azucares.
Las bacterias anaerobias o anaerobias facultativas a menudo fermentan
carbohidratos ácidos orgánicos y gas (H2 o CO2). Estos pueden detectarse
incluyendo en el medio un indicador de pH.

156. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de la Coagulasa
Permite determinar la capacidad de
coagular el plasma por la acción de la
enzima coagulasa. Se utiliza para
diferenciar S. aureus (coagulasa
positivo) de otras especies de
Staphylococcus. La prueba de la
coagulasa en tubo se puede leer tras
incubación de 4h, pero si es negativa
debe incubarse hasta 24h.

157. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de la Fenilalanina-desaminasa.
Esta prueba determina la capacidad de un microorganismo para desaminar el
aminoácido fenilalanina en acido fenilpiruvico por la actividad enzimática de la
fenilalanina desaminasa, con la consiguiente acidez resultante. Esta actividad
enzimática es característica de todas las especies de los géneros Proteus,
Providencia y Morganella por lo que se utiliza para separar estos tres géneros de
otros géneros de enterobacterias.

158. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de ADNasa.
Se basa en la capacidad que poseen ciertas bacterias para hidrolizar
enzimáticamente el ADN produciendo una mezcla de mono y polinucleótidos

159. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de la Lipasa
Se basa en la capacidad que tienen ciertas bacterias de descomponer las grasas en
ácidos grasos y glicerol, por acción de la enzima lipasa

160. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de Utilización de citrato
Esta prueba sirve para determinar si un microorganismo es capaz de utilizar
citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como única
fuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando una alcalinización del
medio. Entre las enterobacterias estas características se dan en los siguientes
géneros: Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de
Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella, Yersinia, Salmonella Typhi y
Salmonella paratyphi son incapaces de crecer utilizando citrato como única
fuente de carbono.

161. Metodología de Identificación y
Diagnostico Microbiológico
PRUEBAS DE IDENTIFICACION BIOQUIMICA
Pruebas utilizadas en la identificación con lectura en rango de 18 a 48 horas:
Prueba de la Lecitinasa.
La prueba de la lecitinasa pone de manifiesto la producción de dicha enzima
por determinados microorganismos, capaces de actuar sobre la lecitina,
sustancia orgánica nitrogenada y fosfatada, contenida principalmente en la
yema de huevo.