Este documento proporciona instrucciones para el diagnóstico microbiológico de muestras respiratorias superiores mediante la toma de muestras de secreción faríngea. Describe los materiales y procedimientos requeridos para la toma de muestras, incluido el uso de hisopos estériles y medios de transporte. También cubre los criterios para rechazar una muestra, los medios de cultivo adecuados y la siembra para el aislamiento de patógenos como Streptococcus pyogenes.

1. Métodos y Técnicas de
Estudio Bacteriológico II
Diagnóstico microbiológico

2. Toma de muestra
• Las muestras de origen respiratorio puede ser: tracto inferior y
tracto superior.
• Las muestras que provenientes de tracto respiratorio inferior pueden
ser: lavado broncoalveolar, cepillado o aspírado bronquial o
aspirado transtraqueal (deben ser obtenidas por los especialistas).
• Las muestras que provenientes de tracto respiratorio superior
pueden ser: hisopados nasales, faríngeos, nasofaríngeos,
orofaríngeos (deben ser obtenidas por personal capacitado)
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3. Secreción faríngea
Materiales:
• Hisopos estériles
• Medio de transporte Stuart-Amies
• Bajalenguas
• EPP’s (Guantes látex, mascarilla, gorro, mandil, etc)
Procedimiento:
• Paciente debe hacer un enjuague bucal solo con agua para bajar la carga bacteriana
contaminante.
• Con ayuda del bajalengua ingresar con el hisopo del medio de transporte al fondo de la cavidad
bucal sin tocar otras zonas.
• Rotar el hisopo “enérgicamente”, priorizar zonas con exudado visible, enrojecidas o inflamadas.
• Luego ingresar en el medio de transporte para su conservación en el traslado al laboratorio.
• Repetir el procedimiento con un segundo hisopo pero al final realizar un extendido en una lámina
porta objetos destinada para la coloración Gram.
• Descartar el material usado y trasladar la muestra al laboratorio inmediatamente.

5. Envío-Transporte de muestra
• Enviar lo más rápidamente posible a Microbiología.
• Si se demora el transporte, conservar a temperatura 2 a 8 °C, hasta
un máximo de 24 horas.

6. Criterios para rechazar una muestra
• Tratamiento antibiótico previo.
• Mala conservación.
• Contaminación.
• No indicar origen de muestra.
• Mala toma de muestra.
• No contar con lámina para Gram.

7. Medios de cultivo
Aislamiento primario:
• Agar sangre, agar chocolate, agar azida, agar manitol salado.
• Se incubarán las placas de agar sangre/chocolate a 35-37 °C en
5% de CO2 durante 48-72 h.
• Se debe verificar la presencia de Streptococcus pyogenes (β
hemolítico grupo A). El objetivo: prevención de enfermedad
reumática

8. Siembra
Se utilizan los medios de:
• Agar sangre
• Agar chocolate
• Agar manitol salado
• Agar azida
• Caldo NaCl 6.5%**
Tipo de sembrado es en 4 cuadrantes, para obtener una
semicuantificación de crecimiento por cada uno de los cuadrantes.
** solo usar en la ID de alfa o gamma hemolíticos (prueba + en
enterococos).

9. Muchas gracias