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“Es hora de empezar a vivir la vida que has
imaginado.”
Henry James
COLUMBUS UNIVERSITY
SEDE REGIONAL DE CHIRIQUÍ
FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD
LICENCIATURA EN DOCTOR EN MEDICINA Y CIRUGÍA
PROYECTO SEMESTRAL
“ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO Y BIOQUÍMICO DE LAS
LECHES DE SOJA, ALMENDRA Y CABRA, DAVID,
CHIRIQUÍ, COLUMBUS UNIVERSITY, JULIO, 2019.”
PRESENTADO POR:
ACOSTA, MELANIE 4-807-1670
GUTIÉRREZ, ALANIS 1-746-28
PIMENTEL, EILYN 4-802-1732
SALINA, ELIZABETH 4-800-826
DAVID, CHIRIQUÍ
28 DE SEPTIEMBRE DE 2019
Introducción
La leche más conocida, consumida y estudiada es la de vaca, pero hay otras
alternativas, como lo son la de soja, almendra y cabra, que están presentes en la
dieta de muchas familias panameñas; sin embargo, pocos estudios se han realizado
en torno a estas. Es por esta razón que la presente investigación se basa en el
estudio cualitativo de estas leches comerciales.
El proyecto busca dar veracidad a la calidad de los productos lácteos que se
ofrecen al consumidor, con el fin de velar por su seguridad alimentaria y a la vez
proveer nuevos conocimientos en temas de pruebas microbiológicas e
identificación de macromoléculas.
•¿Cuáles son los componentes
microbiológicos y bioquímicos de las
leches de soja, almendra y cabra?
Planteamiento del Problema
Objetivos
Objetivo General
• Analizar los aspectos microbiológicos y bioquímicos de las leches
de soja, almendra y cabra.
Objetivos Específicos
• Aplicar pruebas para identificar lípidos y proteínas en lácteos
derivados de cabra, almendra y soja.
• Realizar pruebas microbianas para dar validez a la calidad de las
medidas de inocuidad alimentaria en las leches.
• Establecer cuál de las tres leches es la que presenta una mejor
calidad para el consumo.
HIPÓTESIS
•POSITIVA
Las leches que no proceden de la vaca,
como la de cabra, almendra y soja
poseen tanto lípidos como proteínas
necesarias para la buena alimentación
de la población chiricana y están libres
de agentes microbianos dañinos debido
a los procesos industriales a los que se
someten.
•NEGATIVA
Las leches que no provienen de la vaca,
como la de cabra, almendra y soja no
poseen tanto lípidos como proteínas
necesarias para la buena alimentación
de la población chiricana
y poseen agentes microbianos
dañinos a pesar de los
procesos industriales a los que se
someten.
Metodología
Tipo de Investigación
•Básico
•Exploratorio
Diseño de la Investigación.
•Experimental.
Las muestras
•Muestra #1 (almendra)
•Muestra #2 (soja)
•Muestra #3(cabra)
Procedimientos
Análisis de resultados.
Prueba de Lípidos
Prueba de Proteínas
•Ensayo Xantoprotéico
•Solubilidad
•Ensayo de Millón
•Ensayo de Precipitación
•Desnaturalización
•Identificación de Caseína
•Ensayo de coloración con Biuret
•Reacción con Ninhidrina
Prueba Microbiológica
Prueba de Lípidos
Análisis de resultados
Prueba de Lípidos
Prueba 1
1 mL l de leche
+5 gotas de
Sudán III
Prueba 2
1 mL de leche +
5 gotas de
Sudán III
Prueba 3
1 mL de leche +
5 gotas Sudán
III
Leche #1: Tornó
a un color rojo
intenso.
Leche #2: Tornó
a un color
naranja intenso.
Leche #3: Tornó
a un color
amarillo puro.
Leche #1: Tornó
a un color rojo,
pero mas claro
que de la prueba
1 y después de 5
minutos cambió a
un rojo intenso.
Leche #2: Tornó
a un color
naranja intenso.
Leche #3: Tornó
a un color
amarillo puro.
Leche #1: Tornó
a un color rojo
intenso.
Leche #2: Tornó
a un color
naranja intenso.
Leche #3: Tornó
a un color
amarillo puro.
Prueba de Proteínas
Análisis de Resultados
Ensayo Xantoproteico
MUESTRA #1
MUESTRA #2
Prueba #1
2 mL de leche + 5
gotas de HNO3
+ NH4OH
Prueba #2
2 mL de leche + 5
gotas de HNO3
+NH4OH
Prueba #3
2 mL de leche + 5
gotas de HNO3
+NH4OH
Se formaron dos
fases, la primera
con un color
blancuzco con un
poco de amarillo
claro y la
segunda fase se
observa turbio .
En esta segunda
prueba tambien
se formo 2 fases,
pero esta ves, la
primera fase es
mas amarila que
blanca y la
segunda fase un
poco mas turbio.
La última prueba
salió igual que la
segunda prueba.
#1 #2 #3
MUESTRA #2
Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3
Después del
baño María se
observó trazas
de color
amarillo.
Después del
baño María se
observó trazas
de color
amarillo.
Después del
baño María se
observó trazas
de color
amarillo.
MUESTRA #3
Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3
Luego
del baño
maría hubo 2
fases, una
blancuzca y
otra amarilla.
Luego
del baño
maría hubo 2
fases, una
blancuzca y
otra amarilla.
Luego
del baño
maría hubo 2
fases, una
blancuzca y
otra amarilla.
Prueba
#1
Prueba
#2
Prueba
#3
Solubilidad: Muestra #1
Muestra Solvente Resultados
Agua fría Es soluble
Agua caliente Es soluble
Solución de NaCl Es soluble
Solución de NaOH 20% Es soluble
Solubilidad: Muestra #2
Muestra Solvente Resultados
Agua fría Soluble
Agua caliente Es soluble
Solución de NaCl Es soluble
Solución de NaOH 20% Es soluble, el color cambia.
Solubilidad: Muestra #3
Muestra Solvente Resultados
Agua fría Insoluble y precipita
Agua caliente Insoluble y precipita
Solución de NaCl Insoluble y precipita
Solución de NaOH 20%
Insoluble
Análisis de Resultados
Ensayo de Millón: Muestra # 1
* Se realizaron 3 pruebas a todas las leches para asegurar la veracidad del resultado
Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3
Descripción
 Hubo aparición de un
precipitado blanco en el baño
María que luego tornó a rojo.
Ensayo de Millón: Muestra # 2
Prueba # 1 Prueba # 3
Prueba # 2
Descripción
 Se formó precipitado blanco
que tornó en menor
cantidad a rojo.
Ensayo de Millón: Muestra #3
Descripción
 La leche se cuaja.
Prueba
#1
Prueba
#3
Prueba
#2
Ensayo de Precipitación: Muestra #1
• Con Solución de AgNO3 al 5%:
Prueba #1 Prueba #3
Prueba #2
Descripción
 la solución aún es lechosa pero hay
formación de un precipitado apenas
visible.
 Con solución de Cu SO4 :
Prueba
#1
Descripción
Prueba
#3
Prueba
#2
 La superficie de la muestra se vuelve blancuzca y en la
base del tubo aún la muestra sigue de color blanco.
• Con solución de Pb( CH3COO)2 :
Prueba
#1
Prueba
#2
Prueba
#3
Descripción
 hay un precipitado blanco en la parte inferior del
tubo de ensayo y una solución transparente sobre la
superficie.
Ensayo de Precipitación: Muestra #2
• Con solución de AgNO3 al 5% :
Prueba
#1
Prueba
#3
Prueba
#2
Descripción
 El precipitado se diferencia del resto
de la solución
• Con solución de CuSO4:
Prueba # 1 Prueba # 3
Prueba # 2
• Con solución de Pb (CH3COO)2 :
Prueba #1 Prueba #3
Prueba #2
Descripción
 La muestra de leche contenida en
el tubo de ensayo se corta a
medida que adicionamos el
reactivo.
Ensayo de Precipitación: Muestra #3
• Con solución de AgNO3 al 5%:
Prueba #1
Prueba #3
Prueba #2
Descripción
 El precipitado es poco denso y es
difícil de diferenciarlo del resto de la
solución.
• Con solución de CuSO4:
Prueba
#3
Prueba
#1
Prueba
#2
Descripción
 Prueba #1: la mayor parte de la muestra de leche
se tornó celeste, sin embargo aún hay una
pequeña cantidad de la muestra de color blanco
en la base del tubo de ensayo.
• Con solución de Pb(CH3COO)2:
Prueba
#3
Prueba
#1
Prueba
#2
Descripción
 al añadir el acetato de plomo Pb(CH3COO)2 a la
muestra de leche, esta se volvía más líquida.
Desnaturalización de Proteínas
Efecto Calor
• Muestra #1: No se observa
coagulación.
• Muestra #2: No se observa
coagulación.
• Muestra #3: No se observa
coagulación.
#1
#2
#3
Desnaturalización de Proteínas
Efecto Alcohol Etílico
• Muestra #1: No se observa coagulación.
• Muestra #2: No se observa coagulación.
• Muestra #3: Se observa un poco de
coagulación, grumos pequeños.
Muestra #1
Muestra #3
Muestra #2
Identificación de Caseína
Muestra#1
• No se
obtuvo
residuo.
Muestra #2
• No se
obtuvo
residuo.
Muestra#3
• Se obtuvo
un
residuo
blanco.
1
3
2
Ensayo de Coloración con Biuret
Muestra #2 (Soja).
Muestra #1 (Almendra). Muestra #3 (Cabra).
Figura #1- Enlace peptídico.
Prueba de proteínas y
péptidos cortos.
• Sales complejas
violetas (Cu 2+ + -NH-).
1mL de muestra+ 1 mL de
NaOH + 7 gotas de
CuSO4.
Reacción con Ninhidrina
Muestra # 2 (Soja)
Muestra #1 (Almendra) Muestra #3 (Cabra)
C9-H6-O4.
3 mL de muestra + 20 gotas de Ninhidrina.
Púrpura de Ruhemann.
Figura N°2 tipos de aminoácidos.
Prueba Microbiológica
Prueba Microbiológica
Muestra#3 (Cabra).
Muestra #2(Soja).
Muestra #1 (Almendra).
Detectar la presencia de patógenos.
Cled Agar(Gram + y Gram -)
Mac Conkey Agar (Gram -)
Clave de lectura e interpretación de colonias
crecidas en varios medios de cultivo.
Cultivo en Placa de Agar MacConkey.
Figura N° 3. Cultivo bacteriológico.
Muestra #3 (Cabra).
Conclusiones
• Según la prueba con Sudán III la leche de cabra tiene
más lípidos que la de almendra y soja.
• Las pruebas de proteínas demostraron que las leches
contienen grupos fenilo y alfa-aminoácidos.
• Solo la leche de cabra tiene caseína.
• En las leches de origen vegetal no detectamos patógenos,
por el contrario, la leche de cabra tenía Escherichia coli.

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  • 3. Introducción La leche más conocida, consumida y estudiada es la de vaca, pero hay otras alternativas, como lo son la de soja, almendra y cabra, que están presentes en la dieta de muchas familias panameñas; sin embargo, pocos estudios se han realizado en torno a estas. Es por esta razón que la presente investigación se basa en el estudio cualitativo de estas leches comerciales. El proyecto busca dar veracidad a la calidad de los productos lácteos que se ofrecen al consumidor, con el fin de velar por su seguridad alimentaria y a la vez proveer nuevos conocimientos en temas de pruebas microbiológicas e identificación de macromoléculas.
  • 4. •¿Cuáles son los componentes microbiológicos y bioquímicos de las leches de soja, almendra y cabra? Planteamiento del Problema
  • 5. Objetivos Objetivo General • Analizar los aspectos microbiológicos y bioquímicos de las leches de soja, almendra y cabra. Objetivos Específicos • Aplicar pruebas para identificar lípidos y proteínas en lácteos derivados de cabra, almendra y soja. • Realizar pruebas microbianas para dar validez a la calidad de las medidas de inocuidad alimentaria en las leches. • Establecer cuál de las tres leches es la que presenta una mejor calidad para el consumo.
  • 6. HIPÓTESIS •POSITIVA Las leches que no proceden de la vaca, como la de cabra, almendra y soja poseen tanto lípidos como proteínas necesarias para la buena alimentación de la población chiricana y están libres de agentes microbianos dañinos debido a los procesos industriales a los que se someten. •NEGATIVA Las leches que no provienen de la vaca, como la de cabra, almendra y soja no poseen tanto lípidos como proteínas necesarias para la buena alimentación de la población chiricana y poseen agentes microbianos dañinos a pesar de los procesos industriales a los que se someten.
  • 8. Las muestras •Muestra #1 (almendra) •Muestra #2 (soja) •Muestra #3(cabra)
  • 10. Análisis de resultados. Prueba de Lípidos Prueba de Proteínas •Ensayo Xantoprotéico •Solubilidad •Ensayo de Millón •Ensayo de Precipitación •Desnaturalización •Identificación de Caseína •Ensayo de coloración con Biuret •Reacción con Ninhidrina Prueba Microbiológica
  • 12. Análisis de resultados Prueba de Lípidos Prueba 1 1 mL l de leche +5 gotas de Sudán III Prueba 2 1 mL de leche + 5 gotas de Sudán III Prueba 3 1 mL de leche + 5 gotas Sudán III Leche #1: Tornó a un color rojo intenso. Leche #2: Tornó a un color naranja intenso. Leche #3: Tornó a un color amarillo puro. Leche #1: Tornó a un color rojo, pero mas claro que de la prueba 1 y después de 5 minutos cambió a un rojo intenso. Leche #2: Tornó a un color naranja intenso. Leche #3: Tornó a un color amarillo puro. Leche #1: Tornó a un color rojo intenso. Leche #2: Tornó a un color naranja intenso. Leche #3: Tornó a un color amarillo puro.
  • 14. Análisis de Resultados Ensayo Xantoproteico MUESTRA #1 MUESTRA #2 Prueba #1 2 mL de leche + 5 gotas de HNO3 + NH4OH Prueba #2 2 mL de leche + 5 gotas de HNO3 +NH4OH Prueba #3 2 mL de leche + 5 gotas de HNO3 +NH4OH Se formaron dos fases, la primera con un color blancuzco con un poco de amarillo claro y la segunda fase se observa turbio . En esta segunda prueba tambien se formo 2 fases, pero esta ves, la primera fase es mas amarila que blanca y la segunda fase un poco mas turbio. La última prueba salió igual que la segunda prueba. #1 #2 #3
  • 15. MUESTRA #2 Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3 Después del baño María se observó trazas de color amarillo. Después del baño María se observó trazas de color amarillo. Después del baño María se observó trazas de color amarillo.
  • 16. MUESTRA #3 Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3 Luego del baño maría hubo 2 fases, una blancuzca y otra amarilla. Luego del baño maría hubo 2 fases, una blancuzca y otra amarilla. Luego del baño maría hubo 2 fases, una blancuzca y otra amarilla. Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3
  • 17. Solubilidad: Muestra #1 Muestra Solvente Resultados Agua fría Es soluble Agua caliente Es soluble Solución de NaCl Es soluble Solución de NaOH 20% Es soluble
  • 18. Solubilidad: Muestra #2 Muestra Solvente Resultados Agua fría Soluble Agua caliente Es soluble Solución de NaCl Es soluble Solución de NaOH 20% Es soluble, el color cambia.
  • 19. Solubilidad: Muestra #3 Muestra Solvente Resultados Agua fría Insoluble y precipita Agua caliente Insoluble y precipita Solución de NaCl Insoluble y precipita Solución de NaOH 20% Insoluble
  • 20. Análisis de Resultados Ensayo de Millón: Muestra # 1 * Se realizaron 3 pruebas a todas las leches para asegurar la veracidad del resultado Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3 Descripción  Hubo aparición de un precipitado blanco en el baño María que luego tornó a rojo.
  • 21. Ensayo de Millón: Muestra # 2 Prueba # 1 Prueba # 3 Prueba # 2 Descripción  Se formó precipitado blanco que tornó en menor cantidad a rojo.
  • 22. Ensayo de Millón: Muestra #3 Descripción  La leche se cuaja. Prueba #1 Prueba #3 Prueba #2
  • 23. Ensayo de Precipitación: Muestra #1 • Con Solución de AgNO3 al 5%: Prueba #1 Prueba #3 Prueba #2 Descripción  la solución aún es lechosa pero hay formación de un precipitado apenas visible.
  • 24.  Con solución de Cu SO4 : Prueba #1 Descripción Prueba #3 Prueba #2  La superficie de la muestra se vuelve blancuzca y en la base del tubo aún la muestra sigue de color blanco.
  • 25. • Con solución de Pb( CH3COO)2 : Prueba #1 Prueba #2 Prueba #3 Descripción  hay un precipitado blanco en la parte inferior del tubo de ensayo y una solución transparente sobre la superficie.
  • 26. Ensayo de Precipitación: Muestra #2 • Con solución de AgNO3 al 5% : Prueba #1 Prueba #3 Prueba #2 Descripción  El precipitado se diferencia del resto de la solución
  • 27. • Con solución de CuSO4: Prueba # 1 Prueba # 3 Prueba # 2
  • 28. • Con solución de Pb (CH3COO)2 : Prueba #1 Prueba #3 Prueba #2 Descripción  La muestra de leche contenida en el tubo de ensayo se corta a medida que adicionamos el reactivo.
  • 29. Ensayo de Precipitación: Muestra #3 • Con solución de AgNO3 al 5%: Prueba #1 Prueba #3 Prueba #2 Descripción  El precipitado es poco denso y es difícil de diferenciarlo del resto de la solución.
  • 30. • Con solución de CuSO4: Prueba #3 Prueba #1 Prueba #2 Descripción  Prueba #1: la mayor parte de la muestra de leche se tornó celeste, sin embargo aún hay una pequeña cantidad de la muestra de color blanco en la base del tubo de ensayo.
  • 31. • Con solución de Pb(CH3COO)2: Prueba #3 Prueba #1 Prueba #2 Descripción  al añadir el acetato de plomo Pb(CH3COO)2 a la muestra de leche, esta se volvía más líquida.
  • 32. Desnaturalización de Proteínas Efecto Calor • Muestra #1: No se observa coagulación. • Muestra #2: No se observa coagulación. • Muestra #3: No se observa coagulación. #1 #2 #3
  • 33. Desnaturalización de Proteínas Efecto Alcohol Etílico • Muestra #1: No se observa coagulación. • Muestra #2: No se observa coagulación. • Muestra #3: Se observa un poco de coagulación, grumos pequeños. Muestra #1 Muestra #3 Muestra #2
  • 34. Identificación de Caseína Muestra#1 • No se obtuvo residuo. Muestra #2 • No se obtuvo residuo. Muestra#3 • Se obtuvo un residuo blanco. 1 3 2
  • 35. Ensayo de Coloración con Biuret Muestra #2 (Soja). Muestra #1 (Almendra). Muestra #3 (Cabra). Figura #1- Enlace peptídico. Prueba de proteínas y péptidos cortos. • Sales complejas violetas (Cu 2+ + -NH-). 1mL de muestra+ 1 mL de NaOH + 7 gotas de CuSO4.
  • 36. Reacción con Ninhidrina Muestra # 2 (Soja) Muestra #1 (Almendra) Muestra #3 (Cabra) C9-H6-O4. 3 mL de muestra + 20 gotas de Ninhidrina. Púrpura de Ruhemann. Figura N°2 tipos de aminoácidos.
  • 38. Prueba Microbiológica Muestra#3 (Cabra). Muestra #2(Soja). Muestra #1 (Almendra). Detectar la presencia de patógenos. Cled Agar(Gram + y Gram -) Mac Conkey Agar (Gram -)
  • 39. Clave de lectura e interpretación de colonias crecidas en varios medios de cultivo.
  • 40. Cultivo en Placa de Agar MacConkey. Figura N° 3. Cultivo bacteriológico. Muestra #3 (Cabra).
  • 41. Conclusiones • Según la prueba con Sudán III la leche de cabra tiene más lípidos que la de almendra y soja. • Las pruebas de proteínas demostraron que las leches contienen grupos fenilo y alfa-aminoácidos. • Solo la leche de cabra tiene caseína. • En las leches de origen vegetal no detectamos patógenos, por el contrario, la leche de cabra tenía Escherichia coli.