UPCH

1. Identificación de Biomoléculas
PRACTICA No. 3
La materia viva de las células está compuesta principalmente de carbono, hidrógeno, oxígeno y
nitrógeno, los cuales están organizados en moléculas grandes, denominados polímeros tales
como los carbohidratos, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos.
La presente práctica tiene por objetivo demostrar la presencia de carbohidratos, proteínas y
lípidos en algunas muestras biológicas, mediante pruebas colorimétricas de tipo cualitativo.
MATERIAL
• reactivo de Molish
• H2SO4 concentrado
• CuSO4 al 0.1%
• NaOH al 10%
• solución de gelatina (2%)
• solución de almidón (2%)
• leche
• aceite
• Solución de sacarosa (2%)
• clara de huevo (2%)
• al tubos de ensayo
• papel de seda blanco(3cm x 10 cm)
• goteros
• etiquetas
PROCEDIMIENTO
A. Determinación de carbohidratos (Reactivo de Molish)
Esta prueba se realizará utilizando 4 tubos de ensayo los que debe rotular como A, B, C y
D.
Agregue al tubo A 3 ml de agua, al B 3 ml de sacarosa al 2%, al C 3 ml de almidón al 2% y
al tubo D 3ml de leche. A continuación adicione 2 gotas del reactivo de Molish (alfa -
naftol) y luego agite los tubos. Posteriormente añada dejando caer por las paredes del
tubo inclinado 1 ml de H2SO4 concentrado, en forma lenta. Si la prueba es positiva
aparecerá un anillo púrpura - violeta en la interfase.
Anote los resultados.
Responda las siguientes preguntas:
1) ¿Se produjo algún cambio en los tubos A, B, C y D al finalizar el experimento? Por
qué?

2. 2) ¿Qué función cumple el tubo A?
3) ¿Para qué sirve el tubo B?
4) En base a lo observado en el tubo D ¿qué podemos afirmar?
5) ¿Por qué se adiciona H2SO4 en forma lenta al tubo?
6) Comparando los resultados obtenidos, qué podemos afirmar con respecto al reactivo
B. Determinación de proteínas
Esta prueba se lleva a cabo usando el reactivo de Biuret. Tome 4 tubos de ensayo y
rotúlelos como E, F, G y H.
Al tubo E agregue 3 ml de agua, al F 3 ml de solución de gelatina, al G 3 ml de leche y al
tubo H 3 ml de solución de clara de huevo. Luego añada 2 ml de NaOH al 10%, agite los
tubos luego añada lentamente 1 ml de CuSO4 al 0.1%. Si es necesario añada hasta 10
gotas. Un color violeta o rosado indica que la prueba es positiva.
Responda las siguientes preguntas:
1) ¿En qué tubo hay proteínas?
2) ¿Qué podríamos afirmar sobre el reactivo si hubiese habido reacción en el tubo E?
3) ¿Pará qué sirve la gelatina del tubo F?
4) ¿Qué puede concluir de los resultados obtenidos en los tubos F, G y H?
C. Determinación de lípidos
Marque las tiras de papel con las letras I, J y K . Deje caer una gota de agua en la tira I,
una gota de aceite en la tira J, una gota de leche en la tira K . Deje secar durante 10
minutos o más si es necesario, observe la región donde dejó caer la gota en cada una de
las tiras, si observa translúcida dicha región la prueba es positiva.
Responda las siguientes preguntas:
¿Qué muestras dan una respuesta positiva?
1) ¿Qué podemos afirmar de la leche en relación a su composición?
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