El documento trata sobre los desafíos actuales de la inmunoterapia. La inmunoterapia emplea componentes del sistema inmunitario como células inmunes o sus productos para tratar enfermedades. Un desafío clave es el uso de células T reguladoras para inducir tolerancia inmune y suprimir respuestas patológicas. Sin embargo, generar células T reguladoras funcionales a gran escala plantea retos relacionados con su dosis, migración, fenotipo estable y calidad. Otro reto es a
el lugar santo y santisimo final.pptx y sus partes
Desafíos actuales de la inmunoterapia en
1. Evelyn Alvarez Salazar
Investigadora posdoctoral
Coordinación de Servicios a la Investigación
Laboratorio Nacional de Citometría de Flujo
INMUNOTERAPIA:
DESAFIOS ACTUALES
2. Terapia biológica que emplea diversos componentes del sistema inmunitario como las
células inmunes o sus productos (anticuerpos, citocinas, etc) para el tratamiento de
diversas enfermedades.
Dentro del concepto amplio de inmunoterapia también se considera la manipulación del
sistema inmunitario mediante vacunas para la prevención de enfermedades
infecciosas y alergias.
¿Qué es la inmunoterapia?
L o q u e s e p r e t e n d e c o n l a
Inmunoterapia es que ésta ayude a
contrarrestar la enfermedad, bien de
f o r m a d i r e c t a o i n d i r e c t a ,
potenciando el sistema inmunitario
del propio paciente, ofreciendo una
mayor especificidad y menores
efectos secundario.
3.
4. Terapia con microorganismos
Bacillus Calmette-Guérin (BCG)
T-VEC is made from a
genetically modified herpes
virus. The therapy is designed
to replicate inside melanoma
cells to kill those cells.
24. Braudeau et al. 2007
J Immunol 2012; 189:4705-4711
CÉLULAS T REGULADORAS E INDUCCIÓN DE LA TOLERANCIA
Sánchez et al. 2004
Bestard et al, Presence of FoxP3+ Regulatory T Cells Predicts Outcome
of Subclinical Rejection of Renal Allografts. Journal of the American
Society of Nephrology · June 2008
Infiltrado en el Injerto (TR)
En sangre periférica (TR)
25. Desarrollo de metodologías: Expansión y Generación de Células T
reguladoras
Nº Estudio Fase Especifici
dad
Estrategia Condici
ón
Tras
plant
e
NCT03577431 I/II Ag-Esp Tregs : CD40L-
Bcells / IS
Everolimus
Hígado
NCT02711826 II Poli Tregs autòlogas /
IS Everolimus
Riñon
Autoi
nmu
nida
d
NCT02691247 II Poli Tregs autòlogas Diabete
s tipo 1
EudraCT: 2014-
004320-22
I Poli Tregs autòlogas Esclero
sis
Múltiple
GvH
D
NCT01795573 I Ag-Esp Tregs : DC Prevenc
ión
GvHD
NCT00602693 I Poli Tregs cordón
umbilical
Leucemi
a
Trasplante
Autoinmunidad
GvHD
26. •Infusión en pacientes para la inducción de
Tolerancia inmune
•Supresión antígeno – específica de células
patológicas
•Reducción de efectos colaterales del consumo
de medicamentos
•Mejorar la calidad de vida de los pacientes
¿Por qué y para qué?
Alba C, et al. (2016) Complications after Heart Transplantation: Hope for the Best, but
Prepare for the Worst. Int J Transplant Res Med 2:022.
Nueberger et al. Practical Recommendations for Long-term Management of Modifiable
Risks in Kidney and Liver Transplant Recipients.Transplantation 2017;101: S1 – S56.
Incidencia de
complicaciones
post-trasplante
Tasa de
supervivencia de
pacientes
trasplantados e
injerto
27. Retos en el empleo de Células T reguladoras en la Inmunoterapia
Dosis:
5 - 20 x 106
c e l l s / K g .
Muchos ciclos
de expansión
Migración al
ó r g a n o o
tejido blanco
Policlonal o
a n t í g e n o -
e s p e c í f i c a .
S u p r e s i ó n
generalizada
Mantenimiento
d e l a
estabi l i dad
fenotípica y
funcional
Calidad / Seguridad / Eficacia
28. ¿TREGS TÍMICAS O INDUCIDAS in vitro?
J Immunol October 1, 2011, 187 (7) 3521-3529
Adhesión y migración
Artritis autoinmune
Arthritis Rheum. 2012 Aug; 64(8): 2548–2558.
Trasplante MO - NCT01634217
Blood Adv. 2021 Mar 9; 5(5): 1425–1436.
30. Large amount of viables iTregs were obtained after 6
weeks of expansión that were mostly CD25+FOXP3+
E v e l y n K . A l v a r e z - S a l a z a r , A r i m e l e k C o r t é s
Hernández, Saul Arteaga, Josefina M Alberu, Gloria
Soldevila. Large-scale generation of human
allospecific induced-Tregs with functional
stability for immunotherapy in transplantation.
Front Immunol. 2020
31. Allospecific suppression mediated by
long-term expanded iTregs cells long-
term expanded is not affected by
proinflammatory cytokines.
Expanded allospecific iTregs express
chemokine receptors related to migration to
inflamed tissue.
32. Las Tregs generadas in vitro no llegan a desmetilar la región CNS2 (comparando con las células
tTregs que tienen un 10% de metilación)
Empleo de
modificadores
de la cromatina
33. GEN FOXP3
Pérdida del fenotipo
Pérdida de funciones
reguladoras
Patogénicas
Promotor CNS1 CNS2
34. TET
5mC → 5hmC → C
Butirato de Sodio
UNC0646
Azacitidina
Ácido retinoico
Vitamina C
Am J Transplant. 2020 Sep; 20(9): 2366–2379.
In vivo - Skin allografts
In vitro
36. Pruebas de calidad del producto
• Esterilidad
✔Ensayo de esterilidad: Bacterias, hongos (21 CFR
610.12, USP<71>)
✔Micoplasma
• Identidad: Marcadores de superficie, polimorfismo
genético
• Pureza
✔Contaminantes residuales: Citocinas, anticuerpos,
perlas, suero, células contaminantes, debris (ICH Q3)
✔Pirogenicidad/Endotoxina (21 CFR 610.13)
• Potencia
✔Caracterización del producto
✔Mecanismo de acción
• Otros: Viabilidad, número de células / dosis
Identificar el momento adecuado: Al comienzo, in-process, al final, sobre todo en sistemas abiertos
Ensayos de estabilidad
37. Identidad CD4+CD25+FOXP3+
Pureza ↓CD19, ↓ CD8, ↓ Perlas
Viabilidad >80%
Potencia % Inhibición ag-esp (Ensayo de
supresión)
Expresión de Marcadores
quimiocinas
Estabilidad Mantenimiento del fenotipo y
función en presencia de
Citocinas pro-inflamatorias y
después de la criopreservación.
Esterilidad Cultivos libres de bacterias,
hongos, mycoplasma y
endotoxinas