Sindrome de Cornelia de Lange

1. Laura Salazar Gómez
Facultad de medicina
Universidad Pontificia
Bolivariana
Tercer semestre

2. INTRODUCTION
Cornelia de Lange Syndrome
 Distinctive facies
 Growth retardation
 Intellectual disability
 Feeding difficulties
 Multiple organ system
anomalies
 The worldwide incidence of
CdLS is reported to range-
from 1 to 3 per 30, 000 births
 Dysregulation of CdLS-
related genes plays an
important role in the
occurrence of CdLS

3. INTRODUCTION
HDAC8
 About 5% patients have
HDAC8 mutation.
 Pathogenic variation of the
HDAC8 gene results in CdLS
5 (OMIM#300882) which has
an X-linked dominant
inheritance.
 HDAC8 contains 11 exons and
spans approximately 243
kilobases on human
chromosome Xq13.1.
 It encodes a zinc dependent
metalloproteinase, which
regulates deacetylation of
the SMC3 protein.

4. Study the functional mutation in
the HDAC8 gene as a new
diagnostic marker for the
Cornelia de Lange Syndrome
OBJECTIVE

5. METODOS
Este proyecto contó con
aprobación ética.
• 1,5 años
• 67 cm
• 7 kg
• 41 cm
• Retraso en el desarrollo
motor y del habla
• Retraso de crecimiento
• Reflejo de succión ausente

6. METODOS
PCR
1ª Desnaturalización del ADN doble
cadena
2ª Hibridación de los cebadores a la
zona 3´específica de cada una de las
hebras
3ª Extensión del cebador por actuación
de la DNA polimerasa
Pruebas de
paternidad
basadas en
ADN
1.
2. Se sintetizaron tres pares
de cebadores de PCR y se
usaron para amplificar el
exón 1 del gen del receptor
de andrógeno humano
HAR: Detectar la presencia
de polimorfismos de
repetición corta en
tándem

7. METODOS
SECUENCIACIÓN
SANGER
 El ADN blanco es copiado
muchas veces y se hacen
fragmentos de diferentes
longitudes.
 Nucleótidos fluorescentes que
actúan como "terminadores de
cadena" marcan los extremos
de los fragmentos y permiten la
determinación de la secuencia
 Se utilizo para determinar las
secuencias de cebador para el
gen HDAC8 (c.806T>G,
p.I269R) para la mutagénesis
dirigida al sitio.

8. METODOS
SDS PAGE
 La SDS PAGE es una técnica en la cual se hace una electroforesis
para separar unas proteínas presentes en una muestra, las cuales
migran por peso y carga molecular.
 Su uso fue para determinar la solubilidad de la proteína HDAC8
recombinante
(PAGE = polyacrylamide gel electrophoresis)
+ detergente aniónico dodecilsulfato sódico (SDS).

9. RESULTADOS
 Una novedosa mutación sin
sentido (c.806T> G, p.I269R)
en el gen HDAC8 se identificó
como una mutación
patogénica gracias a los
estudios realizados.
 Los resultados mostraron
que la nueva mutación sin
sentido fue una mutación de
Novo.
P33: Hijo: La timina fue
cambiada por una guanina.
P33F: Padre
P33M: Madre

10. RESULTADOS
 B) Conservación evolutiva
del nuevo locus de
mutación del gen HDAC8
• A) La nueva mutación sin sentido
disminuyó actividad de la proteína
HDAC8

11. RESULTADOS
• SDS-PAGE mostró que la expresión in vitro
de las proteínas recombinantes HDAC8
fue inducida con éxito por IPTG.
• El ensayo del sobrenadante obtenido
indicó una menor solubilidad de la
proteína recombinante variante HDAC8
frente a la proteína recombinante de tipo
silvestre HDAC8.
EXPRESIÓN INVITRO DE
PROTEÍNAS RECOMBINANTES
HDAC8
MutadoSalvaje

12. RESULTADO
 Comparando los rasgos tipicos de pacientes
con sindrome de Cornelia de Lange, la
paciente estudiada coincidía con la baja
estatura, un bajo peso al nacer por debajo
del percentil, microcefalia, distancia amplia
de los ojos, problemas en la alimentación,
problemas intelectuales, entre otros.
Desde el punto de vista medico, este
síndrome se caracteriza por los
siguientes fenotipos:

13. DISCUSSION
AUTHOR WHAT THEY PROPOSED WAS ITTRUE?
DEARDORFF ET AL.
In 2012, Deardorff et al. found that
pathogenic mutations of the HDAC8
gene could cause CdLS 5
KLINE ET AL.
However, there was a report of
another female patient without arched
eyebrows and synophrys, similar to the
present patient. In addition, Kline et al.
found that the facies of CdLS patients
could
change with age.
DEARDORFF MA
KAISER FJ
FIEREMANS N
Previous studies indicated that atypical
phenotypes of female CdLS patients
with HDAC8 mutation might be due to
SXCI. In view of this, SXCI analysis of
the present patient was also carried
out and confirmed the presence of
SXCI, which could explain the atypical
phenotype of the patient.

14. CONCLUSIONS
 The study allowed us to identify that the de novo mutation of the
patient in the HDAC8 gene could lead to Cornelia de Lange
syndrome, which amplified the mutations which may be the cause
of this syndrome.
 The Cornelia de Lange syndrome, although it has its own
phenotypic characteristics, can be expressed in different ways and
with varying degrees of intensity. Although the phenotype is the
most important aid to identify the pathology, there are also other
parameters that help the diagnosis